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人胰岛淀粉样多肽对大鼠胰岛细胞瘤细胞自噬的影响及相关机制
目的 研究人胰岛淀粉样多肽(hIAPP)对大鼠胰岛细胞瘤细胞(INS-1细胞)自噬的影响及相关机制.方法 hIAPP孵育大鼠INS-1细胞后,采用电镜观察细胞自噬体数量的变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力的变化,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测细胞活性氧族(ROS),蛋白质印迹检测磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)以及自噬标志物p62及微管相关蛋白1轻链3(LC3)的变化.结果 hIAPP组INS-1细胞自噬体的数量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达明显增加(P值均＜0.05).hIAPP组细胞ROS水平为对照组的1.76倍(P＜0.01).抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)可抑制hIAPP所诱导的INS-1细胞ROS增加和抑制磷酸化AMPK及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达升高(P值均＜0.05).使用AMPK抑制剂compoundC预处理INS-1细胞可抑制hIAPP和AMPK激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺-1-β-D-呋喃核糖苷(AICAR)所诱导的LC3-Ⅱ/LC3-1和磷酸化AMPK增加(P值均＜0.05).自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和compound C加重hIAPP所诱导的INS-1细胞死亡和ROS升高(P值均＜0.05).AICAR可明显缓解hIAPP的细胞毒性作用(P＜0.05).结论 AMPK通路相关自噬减轻hIAPP对INS-1细胞的毒性作用和氧化损伤.
关键词： 胰岛淀粉样多肽 自噬 氧化应激 磷酸腺苷依赖的蛋白激酶 -
磷酸腺苷依赖的蛋白激酶在自噬通路中作用的研究进展
近年来，磷酸腺苷依赖的蛋白激酶（AMPK、5′-AMP-activated protein kinase）在细胞自噬（autophagy）中的研究已成为热点之一。自噬是一个多步骤复杂的过程并对能量敏感，AMPK 作为能量感受器对营养敏感且在自噬的过程中发挥关键酶的作用。本文主要介绍了细胞自噬以及 AMPK 通过 mTOR（mammalian target of rapamy-cin）、p53、PI3K 3条通路影响自噬通路的过程。
