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气道上皮细胞阴离子交换蛋白2在豚鼠支气管哮喘模型中表达的实验研究
目的研究支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠气道上皮细胞阴离子交换蛋白2(anion exchanger2,AE2)的表达及意义.方法取20只豚鼠随机分为2组,每组用卵清白蛋白(OVA)致敏,然后分别用生理盐水(对照组)和OVA(哮喘组)雾化吸入激发豚鼠哮喘.在连续雾化3 d后,刮取气道上皮以免疫印迹(western blotting)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法作AE2蛋白及其mRNA表达水平的检测.结果①呼吸频率:激发后对照组与哮喘组比较差异有统计学意义(P<0.01);同组内激发前后比较对照组内差异无统计学意义(P>0.05),哮喘组内比较差异有统计学意义(P<0.01).②血清IgE浓度和血嗜酸粒细胞(EOS)计数:对照组IgE浓度和EOS计数与哮喘组比较,差异有统计学意义(P<0.01).③豚鼠肺组织病理形态改变:光学显微镜观察发现:对照组,豚鼠肺组织未见病理形态改变,哮喘组则有明显哮喘病理形态改变.④AE2蛋白及其mRNA的表达:结果表明对照组豚鼠气道上皮有较高的AE2蛋白和mRNA表达量,哮喘组相对对照组表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论AE2蛋白及mRNA在正常豚鼠气道上皮有一定的基础表达.过敏性哮喘模型豚鼠气道上皮细胞表达的AE2蛋白及mRNA表达明显减少.
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气道上皮细胞阴离子交换蛋白2在豚鼠支气管哮喘模型中表达的实验研究
目的 研究支气管哮喘（简称哮喘）豚鼠气道上皮细胞阴离子交换蛋白2( anion exchanger2，AE2)的表达及意义。方法取20只豚鼠随机分为2组，每组用卵清白蛋白(OVA)致敏，然后分别用生理盐水（对照组）和OVA(哮喘组)雾化吸入激发豚鼠哮喘。在连续雾化3d后，刮取气道上皮以免疫印迹( western blotting)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法作AE2蛋白及其mRNA表达水平的检测。结果①呼吸频率：激发后对照组与哮喘组比较差异有统计学意义(P＜0.01)；同组内激发前后比较对照组内差异无统计学意义(P＞0.05)，哮喘组内比较差异有统计学意义(P＜0.01)。②血清IgE浓度和血嗜酸粒细胞(EOS)计数：对照组IgE浓度和EOS计数与哮喘组比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。③豚鼠肺组织病理形态改变：光学显微镜观察发现：对照组，豚鼠肺组织未见病理形态改变，哮喘组则有明显哮喘病理形态改变。④AE2蛋白及其mRNA的表达：结果表明对照组豚鼠气道上皮有较高的AE2蛋白和mRNA表达量，哮喘组相对对照组表达明显降低，差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 AE2蛋白及mRNA在正常豚鼠气道上皮有一定的基础表达。过敏性哮喘模型豚鼠气道上皮细胞表达的AE2蛋白及mRNA表达明显减少。
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组织工程化气管上皮细胞培养的技术进展
组织工程化气管是气管缺损外科修复的替代物,它是利用组织工程学技术和原理在体外构建出具有生理功能及生物活性的人工气管.与其他种类的气管替代物相比, 组织工程化气管的优点为无免疫原性,具有生物活性,有潜在的生长能力.种子细胞是组织工程研究中为重要的方面,是组织工程化组织或器官形成的物质基础,气管上皮细胞作为种子细胞是组织工程化气管中不可缺少的一部分.文章就气管上皮细胞分离培养技术研究进展进行综述,并指出组织工程化气管研究领域所面临的问题和今后的研究方向.
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ABCG2/Bcrp1可能是大鼠气管上皮干细胞的标记物
目的:探索气管上皮干细胞的表面标记物.方法:取2周龄的Wistar大鼠,取出气管环,5-FU损伤12 h后,取气管上皮涂片进行增殖细胞核抗原、ABCG2/Bcrp1抗原染色、RT-PCR检测ABCG2/Bcrpl基因表达.结果:5-FU损伤后大鼠气管上皮气管环的上皮全部脱落,残留间隔分布的裸核样细胞,基底膜完整.气管上皮涂片免疫组织化学染色可见PCNA染色阳性的细胞与阴性细胞间隔分布,间接免疫荧光染色可见ABCG2/Bcrpl阳性细胞;RT-PCR检测ABCG2/Bcrpl阳性反应产物与预计长度符合.结论:ABCG2/Bcrpl可以作为气管上皮干细胞的标记,为进一步分离纯化扩增奠定基础.
关键词： 气管上皮 干细胞 ABCG2/Bcrpl 氟脲嘧啶 -
镍钛合金支架联合自体心包重建长段气管的动物实验
目的 完善镍钛合金支架联合自体心包重建长段气管的手术流程,评价治疗效果及研究术后并发症.方法 选取健康巴马香猪12只,体质量18 ～ 25 kg;取猪心尖周围心包组织包裹镍钛合金支架重建长段(6 cm)气管缺损.观测术后实验动物的生存状况及术后并发症,气管镜观察人工气管管腔新生上皮的性质及生长速度.结果 2只动物于术后早期分别死于感染和出血,7只于术后2～4个月因管腔中段增生、痰栓堵塞死亡;42周有3只动物存活,但有呼吸困难症状.术后1、2、3、4、5个月新生上皮平均爬行长度分别为1、3、5、7、10 mm;气管镜检查吻合口狭窄发生率分别为0 (0/10)、0(0/9)、0(0/4)、33.3％ (1/3)、33.3％ (1/3),管腔中段瘢痕增生发生率分别为20％ (2/10)、 66.7％ (6/9)、75.0％ (3/4)、66.7％(2/3)、100％ (3/3).术后7个月,气管镜发现人工气管中段的瘢痕增生较前有生长停滞、软化和缩小的趋势,呼吸道症状稍有缓解.尸检均可见人工气管中段瘢痕增生明显;病理检查示管腔中段增生为坏死组织和纤维组织.结论 镍钛合金支架联合自体心包重建气管能保障气管管腔通畅,且支持气管上皮再生;人工气管内壁增生、继发痰栓堵塞是实验动物死亡的主要因素.
