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酸敏感离子通道1a介导的激活蛋白-1在肝细胞肝癌中的表达及其与临床特征的关系
目的 分析酸敏感离子通道1a(ASIC1a)及其介导的激活蛋白-1(AP-1)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达,以及与患者临床特征的关系.方法 在转录组水平,肝癌细胞中使用表达谱芯片和生物信息学分析ASIC1a干扰前后下游信号通路变化.进一步借助无锡市第三人民医院2010年1月至2014年12月收治的HCC患者临床病理资料,选取63例HCC组织,42例无瘤癌旁组织.应用免疫组化染色检测ASIC1a、c-Jun、c-Fos在组织中的表达.使用非参数Spearman秩相关分析三者之间的关系.结果 基因芯片和生物信息分析筛选出AP-1(由C-Jun与c-Fos组成).蛋白印迹(Weatern blot)检测ASIC1a干扰后,干扰组c-Jun和c-Fos蛋白表达水平明显低于对照组.在HCC组织中,ASIC1a、c-Jun与c-Fos阳性率高于癌旁组织,68.3％比19.0％,55.6％比11.9％,47.6％比11.7％,差异有统计学意义(P＜0.05).相关分析显示,ASIC1a的表达与c-Jun、c-Fos的表达呈正相关(r=0.404、0.309,P＜0.05).ASIC1a、c-Jun和c-Fos的表达与年龄、肿瘤直径大小、性别无关(P＞0.05),与肿瘤的临床分期、AFP值以及淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 ASIC1a可能通过下游基因AP-1影响肝细胞肝癌的发生及发展.
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惊恐样行为模型小鼠中枢神经系统酸敏感离子通道1a的表达变化
目的 探讨惊恐样行为模型小鼠中枢神经系统酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion channel 1a,ASIC1α)蛋白的表达变化.方法 将20只雄性C57BL/6小鼠按照体质量随机分为两组:惊恐样行为模型组(RET组)和对照组(Ctr组),每组10只.采用大鼠暴露刺激方法建立惊恐样行为小鼠模型.记录大鼠暴露10 min内小鼠的防御行为和逃避行为,采用高架十字迷宫(elevated plus maze,EPM)评估小鼠的焦虑水平,Western blot检测小鼠前额皮层、海马、中脑导水管周围灰质(Peri-aqueductal gray,PAG)ASIC 1a的表达水平.结果 RET组小鼠冻结反应时间[(5.83±1.92)s]较Ctr组[(1.00±0.45)s]显著增加(P<0.01),风险评估行为[(5.33±0.49)次]较Ctr组[(0.60±0.40)次]显著增加(P<0.01),接触铁丝网时间[(17.83±4.38)s]较Ctr组[(50.00±6.90)s]显著降低(P<0.01),保护区停留时间[(431.00±33.13)s]较Ctr组[(264.40±40.43)s]显著增加(P<0.01).RET组小鼠在开放臂时间的百分比[(8.28±1.12)％]较Ctr组[(16.81±2.13)％]显著降低(P<0.05),在闭合臂时间的百分比[(80.08±4.26)％]较Ctr组[(60.91±5.27)％]显著增加(P<0.05).RET组小鼠前额皮层ASIC 1a(1.67±0.17)和海马区ASIC 1a(1.65±0.20)表达较Ctr组[前额皮层:(0.98±0.07);海马:(1.56±0.16)]升高,差异具有统计学意义(P<0.05).而PAG脑区ASIC 1a(0.71±0.06)表达较Ctr组(1.26±0.05)降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 大鼠刺激引起小鼠产生惊恐样行为,同时导致小鼠前额皮层和海马区ASIC1a表达水平升高,PAG脑区ASIC1a表达水平降低.
