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结蛋白和抗肌营养不良蛋白在老年腹股沟疝患者腹内斜肌中的表达及意义
目的 探索结蛋白和抗肌营养不良蛋白在腹内斜肌中的表达与老年腹股沟疝(inguinal hernia,IH)发病的关系.方法 选择40例老年IH患者为研究组,20例无IH的老年阑尾炎患者为对照组,术中取同一解剖部位的腹内斜肌活组织,应用HE染色和免疫组织化学及显微镜图象分析的方法,观察HE染色下肌组织的形态及免疫组化下检测肌细胞内结蛋白和抗肌营养不良蛋白的含量.结果 (1)HE染色图像分析表明:两组肌肉组织的形态学改变经分级后比较(P<0.05),有统计学意义;(2)免疫组织化学和图像分析方法表明:老年IH患者中结蛋白的含量与对照组比较明显减少(P<0.05);老年IH患者中抗肌营养不良蛋白的含量与对照组比较明显减少(P<0.05).结论 老年IH腹内斜肌的肌组织有明显的退行性改变,其肌细胞内结蛋白和抗肌营养不良蛋白表达减少,可能是老年IH发病的机理之一.
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低氧训练诱导大鼠腓肠肌抗肌营养不良蛋白和代谢酶变化及延长高速力竭运动时间
本文旨在探讨抗肌营养不良蛋白(dystrophin)和膜通透性在低氧训练中的变化及其作用.8周龄的Sprague Dawley (SD)大鼠共72只,随机分为4组；常氧安静(normoxic non-train,NC)组、常氧运动(normoxic train,NT)组、低氧安静(hypoxic nontrain,HC)组、低氧运动(hypoxic train,HT)组；每组又随机分为3个亚组:无力竭亚组、低速力竭亚组和高速力竭亚组.常氧运动组和低氧运动组进行4周运动训练；低氧组在氧浓度为12.7％(相当于海拔高度4 300 m)的常压低氧环境下生活训练.训练4周后,对各组的无力竭亚组取材,分别测定腓肠肌组织的乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)活性和dystrophin含量以及血清LDH活性.其余大鼠分别进行力竭测验,记录力竭时间.结果显示,相对常氧运动组,低氧运动组大鼠体重增长减缓,而骨骼肌dystrophin水平无显著变化.低氧运动对MDH和LDH活性的作用明显.氧浓度和运动训练及其交互作用对MDH均有显著性影响(P＜0.05),腓肠肌LDH仅受氧浓度的影响(P＜0.05),而血LDH受氧浓度和运动训练交互作用的影响(P＜0.05),表现为肌LDH活活性下降,血清LDH活性增高.对于大鼠力竭时间,力竭测验速度、运动训练及其交互作用有显著影响(P＜0.05),运动训练和氧浓度的交互作用也有显著影响(P＜0.05),而氧浓度的作用没有显著影响.低氧运动组的高速力竭亚组力竭总时间大于常氧运动组的高速力竭亚组,而且在力竭测试中疲劳出现较早但恢复迅速.以上结果提示,低氧运动能够有效延长大鼠高速力竭运动的时间,其作用机制可能与低氧运动后膜通透性增加而引起的血LDH含量上升有关.
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DMD/BMD患者的dystrophin基因表达研究
目的 探讨杜氏进行性肌营养不良(DMD)/贝氏进行性肌营养不良(BMD)患者的dystrophin基因突变与蛋白质表达之间的关系.方法 用多重连接探针扩增(MLPA)法检测14例DMD/BMD患者dystrophin基因突变,肌肉活检观察组织的形态结构特点,免疫组织化学染色检测患者腓肠肌组织中dystrophin蛋白的表达情况.结果 14例DMD/BMD患者中有3例检出dystrophin基因缺失,其余未检出基因突变.肌肉活检结果显示,14例患者均可见肌纤维大小不一,圆形化,肌纤维明显变性、坏死,不同程度再生;部分肌纤维间可见少量炎性细胞浸润,结缔组织增生.免疫组织化学染色显示,3例未表达dystrophin基因突变患者的肌纤维膜dystrophin蛋白不同程度表达减弱,其余11例患者可见肌纤维膜dystrophin蛋白质表达完全缺失.结论 MLPA联合肌肉活检及免疫组化染色可以鉴别诊断DMD/BMD,为患者的诊治和预后提供了依据.
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胎儿肌肉来源细胞的分离及其成肌分化研究
目的 观察胎儿肌肉来源细胞(flMDC)体外成肌分化能力以及在mdx鼠体内再生抗肌营养不良蛋白.方法 使用舍10％新生牛血清的DMEM/F12培养液,采用预贴壁方法从胎儿肌肉组织中分离fMDC.采用免疫染色鉴定肌肉特异标志的表达.肌内注射fMDC到6.5 Gy照射3d后的mdx小鼠股直肌,1个月后采用免疫荧光染色法和RT-PCR方法检测人抗肌营养不良蛋白和基因的表达.结果 采用预贴壁方法可从胎儿肌肉组织中分离到贴壁生长、梭型的flMDC.可在fMDC的一些长纤维细胞包浆中检测到MHC的表达,在一些细胞胞核中检测到成肌素的表达.可在注射fMDC的mdx小鼠肌肉中检测到人抗肌营养不良蛋白和基因的表达.结论 fMDC中存在MHC和成肌素的阳性表达,注射fMDC到照射过的mdx小鼠体内可以再生抗肌营养不良蛋白表达.
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进行性肌营养不良患者视网膜眼电图表型与临床分型及基因型的关系
目的 研究进行性肌营养不良(Duchenne/Becker muscular dystrophy, DMD/BMD)患者视网膜眼电图(electroretinogram,ERG)表型与临床分型以及基因型的关系，进一步探讨不同基因型的DMD患者抗肌营养不良蛋白(dystrophin)及其同源蛋白在视网膜上的表达及功能，揭示DMD出现ERG异常的分子机理。方法 用11对引物对22例临床确诊的DMD/BMD患者作三步多重PCR进行基因缺失分析，并行ERG检查。结果 DMD/BMD患者ERG改变与临床分型及病情严重程度无关，与DMD/BMD的基因型有关，基因中央区缺失型的ERG异常率明显高于基因非缺失型。结论 DMD/BMD的ERG改变与DMD基因突变位点有关，可能DP260转录启动子与视网膜电信号的传导关系密切。
