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脉动流预适应增强组织工程心脏瓣叶上内皮细胞的黏附性
将受体的细胞种植于可降解材料或去细胞的异种或同种瓣膜上制成的组织工程心脏瓣膜无需抗凝,耐久性好,且有生长潜力,理论上是理想的心脏瓣膜替代物.但生理情况下,心脏瓣膜要受到高速、高压的血流冲击,简单的将内皮细胞种到瓣膜支架,经过血流冲击,细胞很快被冲掉.
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组织工程心脏瓣叶体外研究瓣叶基质的检测
目的初步探讨组织工程心脏瓣叶体外生成基质的检测.方法杂种猪4只,取主动脉.分离并培养、扩增内皮与成纤维、平滑肌细胞,将细胞种植在湿化处理后的支架材料上(聚羟基烷酸酯,PHA).以首次种植成纤维、平滑肌细胞为起点,培养28 d,使用氯胺-T法检测样本的羟脯氨酸含量,并行扫描电镜检测.结果氯胺-T法检测羟脯氨酸,方法简便,准确性高,经测定组织工程心脏瓣叶羟脯氨酸含量为(10.93±2.89)ug/g(材料重量).扫描电镜检测显示细胞表面可见基质的形成.结论氯胺-T法可精确测定体外培养的组织工程心脏瓣叶胶原含量,结合扫描电镜可有效检测基质的生成.
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组织工程心脏瓣叶的体外培养
目的 探讨瓣叶支架种植细胞后,不同体外培养时间瓣叶的生成情况. 方法杂种猪9只,取主动脉,分离内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌细胞,培养扩增.将成纤维细胞、平滑肌细胞和内皮细胞按顺序种植在预湿处理的支架材料上,以首次种植成纤维细胞、平滑肌细胞为起点,取7天、14天和28天样本使用戊二醛固定,用扫描电子显微镜(SEM)检测,对培养28天的样本进行组织学检查. 结果 SEM检测显示:随着培养时间的延长,细胞数量增加,细胞间连接出现,并有基质生成;至28天,瓣膜支架上可见大量细胞黏附,细胞融合成片,表面可见基质形成.支架的细胞覆盖率也随时间的延长明显增加.组织学检测见大量细胞黏附材料,细胞已长入材料中部. 结论体外培养的瓣叶存在生长活性,使用组织工程方法有可能生成组织工程心脏瓣膜.
