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表皮生长因子、促甲状腺激素释放激素及地塞米松对胎兔肺表面活性物质蛋白mRNAs表达的调节
目的比较表皮生长因子(EGF)、促甲状腺素释放激素(TRH)及地塞米松(Dex)对胎兔肺表面活性物质蛋白(SP)-A、SP-B、SP-C mRNAs表达的影响.方法 64只妊娠兔在妊娠第22天或24天,分别静脉注射Dex(Dex组)、EGF(EGF组)、TRH(TRH组)和生理盐水(对照组),每组16只.于妊娠第25天及第27天处死妊娠兔取胎肺.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和DNA印迹法检测胎肺SP-A、SP-B及SP-C的mRNAs水平.结果 (1)对照组、EGF组、TRH组及 Dex组在妊娠第27天时,胎肺SP-B mRNA的相对值分别为0.67±0.14、1.01±0.33、1.17±0.48、1.04±0.27,EGF组、TRH组及 Dex组均显著高于对照组(P<0.05);在妊娠第25天,SP-A和SP-C mRNAs在各组胎肺均有较高水平表达,但SP-B mRNA仅能在Dex组检出,相对值为0.58.(2)在妊娠第27天,胎肺中的SP-B mRNA水平(0.67)明显低于SP-A mRNA(1.21)和SP-C mRNA(1.26)(P<0.01);SP-A和SP-C mRNAs在各组间比较,差异无显著性(P<0.05).结论 (1)胎兔肺SP-A和SP-C mRNAs表达早于SP-B mRNA,而相同样本的SP-B mRNA表达水平低于SP-A和SP-C mRNAs;(2)Dex、EGF和TRH均可促进胎兔肺SP-B mRNA的表达,但在妊娠的早期,Dex的作用更为明显.
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人肺表面活性物质相关蛋白A1基因在大肠杆菌中的表达及产物的分离纯化
目的研究人肺表面活性物质相关蛋白A1（SP-A1）在大肠杆菌中的表达、产物纯化及免疫原性。方法将人SP-A1基因克隆至表达载体pGEX-2T上，分别转化至大肠杆菌JM101、JM105、JM109、XL1-blue和BL21（DE3）等不同宿主，并在不同温度中的表达，采用包涵体纯化方法及亲和层析法纯化目的蛋白，用ELISA及Westert blot初步分析SP-A1蛋白的免疫原性，融合蛋白质经凝血酶酶切分析。结果 SP-A1基因在前4种宿主中表达有完整蛋白质和不完整蛋白质，目的蛋白质分别占总蛋白的6.7%、9.8%、9.3%、14.8%；于28℃时，该基因在BL21（DE3）宿主中表达产物均为完整蛋白质，占总蛋白质的10％。经包涵体纯化和Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化，可获得纯度达95%以上的纯化蛋白。目的蛋白可被抗SP-A多克隆抗体特异识别，凝血酶作用后可切出相对分子质量为26 000的目的蛋白质片段。结论人组织特异性蛋白质SP-A1可在大肠杆菌中表达，表达产物具有良好的免疫原性。
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宫内急性缺血缺氧对新生大鼠肺表面活性蛋白A和B表达的影响
目的探讨宫内急性缺血缺氧对新生大鼠肺表面活性蛋白A、B (SP-A、SP-B)表达的影响,为临床治疗新生儿窒息后肺损伤提供依据.方法结扎孕21 d 的Wistar大鼠一侧怀孕子宫角血管,其宫内胎鼠为缺血缺氧实验组,另一侧子宫角血管不结扎,其宫内胎鼠作为假手术对照组,于缺血后不同时间点剖宫取胎鼠;另设胎龄21 d正常剖宫产新生大鼠为正常对照组.采用免疫组织化学染色和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察肺组织SP-B蛋白和SP-A、SP-B mRNA的表达.结果宫内急性缺血缺氧后,新生大鼠肺组织SP-B阳性Ⅱ型肺泡上皮细胞数减少、染色变浅,于缺血20、30和40 min时其平均灰度值分别为78.89±1.08、79.69±0.13和80.00±0.63,与正常对照组(76.13±0.43)相比,差异有显著意义(P均<0.01);肺组织SP-A和SP-B mRNA的表达随缺血缺氧时间的延长而减弱,于缺血20、30和40 min 时肺SP-A mRNA的相对值分别为1.16±0.06、1.14±0.01和1.13±0.04,SP-B mRNA的相对值分别为0.81±0.02、0.78±0.02和0.79±0.04,与正常对照组(分别为1.27±0.09与0.89±0.06)相比,差异有显著意义(P＜0.05或<0.01).结论宫内急性缺血缺氧可引起新生大鼠肺组织SP-A和SP-B基因表达下调,SP-B蛋白合成减少.本研究为新生儿窒息后肺损伤早期应用含SP-A、SP-B的肺表面活性物质治疗提供了理论依据.
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肝硬化患者血清脂质脂蛋白载脂蛋白检测对肝功能的评价
目的 测定肝硬化患者血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A1和载脂蛋白B的水平,分析评估肝功能状态,并探讨临床意义.方法 对肝硬化60例患者按照Child-Pugh评分标准进行评分,分A、B、C级3组,按临床分期分为失代偿期和代偿期,检测血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A1和载脂蛋白B以及总胆红素、白蛋白.另选健康体检者作对照组,比较其差异.结果 肝硬化患者血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A1和载脂蛋白B水平均低于对照组(P＜0.01);肝硬化失代偿期均低于代偿期、对照组(P＜0.01或P＜0.05),而代偿期尽管低于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05);不同的分级间存在C级组＜B级组＜A级组,组间差异有统计学意义(P＜0.01);与总胆红素呈负相关,与白蛋白呈正相关.结论 提示肝硬化存在脂类代谢紊乱,并与肝功能的恶化程度相一致,其水平的测定能准确反映肝硬化患者肝脏的储备功能及其变化,可作为判断肝硬化病情严重程度的指标,并可帮助了解预后及指导临床治疗.
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肾移植患者的血脂改变
目的研究肾移植患者的血脂变化.方法对上海市8家医院174例肾移植的资料进行调查分析.结果与正常对照组相比,肾移植患者术前血胆固醇(Tch)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-ch)显著增高,血甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-ch)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-ch)与正常对照组的差异无显著性;载脂蛋白A1(Apo A1)及卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)均低于正常对照组,脂蛋白(a)[Lp(a)]的水平显著高于正常对照组;肾移植患者手术前后上述各指标的变化不显著.结论肾移植患者脂质紊乱相当常见,应高度重视.
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中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白与肾脏疾病
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin NGAL)是一种脂质运载蛋白,自从1993年被Kjeldsen等在中性粒细胞中发现以来,人们对NGAL的研究和认识逐步深入,已知NGAL与感染、炎症、肿瘤、肾脏疾病等都有着密切的联系.近年来的研究发现NGAL可作为肾脏损伤的早期监测生物学指标,并在肾脏疾病发展过程中发挥肾脏保护作用.本文就近年来NGAL在肾脏疾病中的研究进展作一综述.
