首页 > 文献资料
-
缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑Nogo受体水平及NEP1-40的神经保护作用
目的 探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBI)新生大鼠脑Nogo受体表达及Nogo受体拮抗剂NEP1-40的脑保护作用.方法 采用随机数字表法将80只7日龄大鼠随机分为对照组、HIBD组、GM-1组和NEP1-40组.正常对照组及HIBD模型组腹腔注射生理盐水0.25 ml/kg,NEP1-40组、GM-1组分别注射5 g/L NEP1-40、2.5μl/d,40 g/LGM-10.25 ml/(kg·d),视分组情况连用3 d或7 d.采用原位杂交法检测各组大鼠脑组织24 h、72 h及7 d NgR-mRNA表达水平,透射电镜观测其脑神经元与轴突的变化.多个样本率总体比较采用χ~2检验,组间均数多重比较采用LSD-t检验,数据均采用SPSS10.0统计软件包处理,以P<0.05有统计学意义.结果 HIBD组、GM-1组和NEP1-40组各时期脑组织NgR水平均低于对照组(t值分别为5.48、6.11、6.96、8.24、5.99和5.34,均P<0.05),三组间24 h NgR水平差异无统计学意义(t值分别为1.48、2.76和1.29,均P>0.05),而NEP1-40组72 h与7 d NgR水平低于同时期HIBD组、GM-1组;GM-1治疗后脑组织神经元得到不同程度的修复,而NEP1-40治疗后神经元修复良好,轴突再生明显.结论 缺氧缺血性脑损伤后脑NsR水平下调,NEP1-40可促进脑损伤的修复,发挥脑保护作用.
-
Nogo受体拮抗剂对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经修复作用的研究
目的 探讨早期应用Nogo-A受体拮抗剂NEP1-40对大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)轴突再生的影响.方法 将96只新生7日龄Wistar大鼠随机分为24h、72h和7d时段的对照组、缺氧缺血性脑损伤模型组(HIBD组)、NEP1-40治疗组(NEP1-40组)及神经节苷脂治疗组(GM-1组),依次分别腹腔注射生理盐水、NEP1-40、GM-1,视分组情况连用72h和7d.用免疫组化法(SP法)观察各组Nogo-A蛋白的表达水平及轴突生长情况.P<0.05为差异有统计学意义.结果 HIBD组在24h、72h和7d的Nogo-A蛋白表达均高于同时点的对照组(P<0.05),呈现增加的趋势.NEP1-40治疗组和GM-1治疗组Nogo-A蛋白表达均低于同时段模型组(P<0.05);NEP1-40治疗组Nogo-A蛋白表达弱于同时段的GM-1组,差异有显著性(P<0.05).电镜下,模型组神经元胞膜破裂,核固缩,胞质溶解,可见较多的凋亡小体,GM-1组72h及7d胶质细胞增生,轴突再生不明显,而NEP1-40组72h及7d胶质细胞数量增加,轴突再生明显.结论 中枢神经系统损伤后,中枢神经抑制因子Nogo蛋白表达增加,抑制了轴突的再生.NEP1-40可拮抗这一作用,发挥促脑损伤后神经的修复与再生作用.
-
Nogo受体拮抗剂对大鼠急性脊髓损伤的保护作用
目的 探讨Nogo受体拮抗剂NEP1-40对大鼠脊髓损伤后脊髓功能恢复的影响,为临床治疗急性脊髓损伤提供实验依据.方法 健康Wistar大鼠48只随机分为创伤对照组、NEP1-40治疗组.建立大鼠中段胸部脊髓后半部横切模型.对照组注入生理盐水,实验组采用NEP1-40治疗.分别在术后取材行苏木精-伊红染色、免疫荧光染色检测.术后第1、3天及1、2、3、4周对动物进行运动功能评分.结果 脊髓损伤3周后,NEP1-40组行为学评分高于对照组,同时NeuN/NF-200阳性染色亦明显高于对照组,差异有统计学意义.结论 NEP1-40治疗脊髓损伤能促进神经元的再生,恢复脊髓功能.
-
Nogo受体及其拮抗剂与神经节苷脂在新生大鼠HIBD中的作用
目的 观察Nogo-A受体拮抗剂NEP1-40及神经节苷脂对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤后神经再生的作用.方法 将100只7日龄新生大鼠随机分为10组:在6h、24h两个时间段分别设空白对照组,假手术组,缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型组,HIBD后NEP1-40治疗组及神经节苷脂治疗组,用原位杂交的方法观察各组别Nogo-A mRNA的表达情况.结果 HIBD组两时段的Nogo-mRNA表达均高于同时段空白组及假手术组,差异有统计学意义;NEP1-40治疗组能抑制HIBD后mRNA的表达,与同时段模型组对比差异有统计学意义;神经节苷脂治疗组mRNA的表达在6h时与HIBD组无明显差异,在24h时较HIBD组低但高于空白组.P值均<0.05.结论 Nogo-AmRNA在缺氧缺血性脑损伤后表达显著增高,其编码的Nogo-A可抑制中枢神经损伤后的再生,NEP1-40能拮抗这一作用,从而可能在促进缺氧缺血性脑损伤后神经再生中起到作用.神经节苷脂GM-1在缺氧缺血性脑损伤后也可抑制Nogo-A mRNA的表达,有稳定细胞膜、减轻细胞水肿、促进神经再生的作用.
-
Nogo髓鞘相关蛋白受体拮抗剂与缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经元再生的关系
目的 探讨Nogo髓鞘相关蛋白(Nogo-A)受体拮抗剂NEPI-40与新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经再生的关系.方法 将64只新生大鼠随机分为8组:6 h、24 h时段的对照组,HIBD模型组(HIBD组),NEP1-40治疗组(NEP1-40组)及神经节苷脂治疗组(GM-1组),分别依次腹腔注射9 g/L盐水0.25 mL/kg、9 g/L盐水0.25 mL/kg、NEP1-40 10 mg/kg、GM-1 20 mg/kg.用免疫组织化学法观察各组新生大鼠脑组织Nogo-A阳性细胞的表达情况,透射电镜观察其脑组织超微结构的动态变化.应用SPSS 13.0软件行单因素方差分析.结果 6 h、24 h HIBD组脑组织Nogo-A阳性细胞表达均显著高于同时段对照组(t=7.63,15.13Pa<0.01);NEP1-40组Nogo-A阳性表达减少,与同时段HIBD组比较有统计学差异(t=4.38,18.0 Pa<0.01);GM-1组Nogo-A阳性表达在6 h时与HIBD组比较无明显差异(t=0.25 P>0.05),在24 h时较HIBD组显著降低(t=4.25 P<0.01),但6 h、24 h均高于NEP1-40组(t=15.10,6.70 Pa<0.01).NEP1-40及GM-1治疗后新生大鼠脑组织超微结构得以不同程度恢复.结论 Nogo-A在HIBD中表达显著增高,可抑制中枢神经损伤后的再生,NEP1-40能拮抗这一作用,从而促进HIBD后神经的再生.
关键词： Nogo髓鞘相关蛋白 缺氧缺血 脑 再生 Nogo受体拮抗剂 -
Nogo受体拮抗剂对大鼠弥漫性轴索损伤神经保护作用及机制
目的 制作大鼠颅脑弥漫性轴索损伤模型,观察脑外伤后Nogo受体拮抗剂对大鼠脑外伤后的神经保护作用.方法 自由落体硬膜外撞击方法制作大鼠颅脑弥漫性轴索损伤模型,分假手术组、对照组、实验组,伤后立即腹腔注射Nogo受体拮抗剂NEP1-40,伤后24h和72 h神经行为学评分评价神经功能,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑脊液中细胞因子白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度,用Western blot检测伤区脑组织中凋亡相关蛋白的表达水平.结果 实验组的神经行为学评分(14.31 ±1.36)明显高于对照组(8.36±0.86),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组大鼠脑脊液中IL-1β和TNF-α的浓度较对照组明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).实验组与对照比较,促凋亡蛋白bax表达下调,而抑制凋亡蛋白B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)表达上调.结论 Nogo受体拮抗剂对大鼠脑外伤有明显的神经保护作用,其机制可能与阻断细胞因子的过度释放和抑制神经细胞的凋亡有关.
-
Nogo-A受体拮抗剂NEP1-40对新生大鼠HIBD中神经元轴突再生的影响
[目的] 观察Nogo-A受体拮抗剂NEP1-40对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain dam-age,HIBD)后神经再生的影响. [方法]将7日龄Wistar新生大鼠(n=100只)随机分为10组,2个不同时段(6 h、24h)的缺氧缺血性脑损伤模型组(HIBD组)、HIBD后NEP1-40治疗组(NEP1-40 组)及神经节苷脂治疗组(GM-1组)和相应时段的空白对照组及假手术对照组,用免疫组化(SP法)的方法观察各组阳性细胞的表达情况. [结果]HIBD组两时段的阳性细胞数表达均显著高于同时段假手术组;NEP1-40治疗组能抑制HIBD后Nogo-A的表达,与同时段模型组对比差异有显著性;神经节苷脂治疗组Nogo-A的表达在6 h时与HIBD组差异无显著性,在24 h时较HIBD组低但高于NEP1-40组(P<0.05). [结论]Nogo-A在缺氧缺血性脑损伤中表达显著增高,它可以抑制中枢神经损伤后的再生,NEP1-40能拮抗这一作用,从而促进缺氧缺血性脑损伤后神经的再生.
-
新型Nogo受体拮抗剂A3NEP1-40对大鼠坐骨神经损伤的保护作用
目的:研究本课题组自行设计的Nogo受体拮抗剂A3NEP1-40对大鼠坐骨神经损伤后轴突再生的影响及功能恢复的作用.方法:雌性SD大鼠60只随机分为实验组、对照组和空白组.采用直接手术切断大鼠坐骨神经.在术中直视下用微量加液器在受损坐骨神经处直接注射药物,实验组给予A3NEP1--40(5μl,100μmol/L),对照组给予NEP1--40 (5μl,100μmol/L),空白组给予5μl PBS缓冲液.注射完后在神经外膜下植入导管并固定,逐层缝合伤口.术后经导管注射相应的药物进行干预治疗,注射量同前,2天1次,共注射3次,每次注射后再用5μl PBS缓冲液冲管.采用BBB评分法于术后第1、3天和第1、2、3、4、6、8周对大鼠运动功能进行评分.在术后第1、2、4、8周于坐骨神经损伤处取材、石蜡包埋和切片,行HE染色和NF-200免疫组化法观察神经元细胞损伤修复情况.结果:大鼠坐骨经损伤2w后A3NEP1-40组和NEP1-40组的NF200阳性细胞数量明显高于空白组,差异有统计学意义(P＜0.05);3w后A3NEP1-40组和NEP1-40组的BBB评分高于空白组,差异有统计学意义(P＜0.05);而在A3NEP1-40组和NEP1-40组之间NF200阳性细胞数目和BBB评分的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:Nogo受体拮抗剂A3NEP1-40能够促进周围神经损伤处轴突的延伸,促进大鼠急性坐骨神经损伤的后肢运动功能的恢复;为下一步实验(A3NEP1-40结合生物支架材料联合其他坐骨神经修复因子通过缓释技术综合治疗坐骨神经损伤)奠定基础.
