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非小细胞肺癌患者外周血CK19mRNA检测临床意义的探讨
目的:应用逆转录多聚酶链反应(R-PCR)法检测肺癌外周血中的表达情况,并探讨其表达的临床意义.方法:用RT-PCR法检测98例肺癌患者外周血CK19 mRNA表达.结果:NSCLC组患者外周血CK19 mRNA的阳性率为77.55％(76/98),显著高于良性病变组的3.57％(1/28)和健康对照组的0,x2=73.68,P＜0.05；Ⅱ期[87.50％(35/40)]和Ⅲ期[88.89％(24/27)]NSCLC患者的阳性率显著高于Ⅰ期[54.84％(17/31)]患者的阳性率,x2=13.453,P＜0.05；淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19 mRNA阳性率分别为89.55％(60/67)和51.61％(16/31),差异有统计学意义,x2=17.523,P＜0.05；而不同病理类型NSCLC患者外周血CK19mRNA阳性率之间差异无统计学意义,x2=0.414,P＞0.05.结论:肺癌患者外周血中CK19 mRNA表达较高可能与肺癌转移有关,检测CK19 mRNA对于早期判断患者转移和复发有一定的临床意义.
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非小细胞肺癌患者外周血细胞角蛋白19 mRNA表达的临床意义
细胞角蛋白19(cytokeratin19,CK19)mRNA仅在上皮源性的细胞内转录,正常外周血中无上皮源性细胞.因此,如果在外周血中检测到CK19 mRNA的转录,则提示上皮源性肿瘤细胞已进入外周血中.
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非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义
目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性.方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达.结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376).结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗.
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实时定量RT-PCR检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平及其临床价值
目的:以细胞角蛋白19(CK19)mRNA作为基因标志,建立实时定量RT-PCR方法(QRT-PCR)检测乳腺癌患者外周血中播散的肿瘤细胞,并探讨其在乳腺癌微转移监测及预后预测中的临床应用价值.方法:采用QRT-PCR方法,检测102名正常献血员、177例乳腺原发癌患者及12例有远处转移的乳腺癌患者外周血有核细胞的CK19 mRNA水平.结果:正常对照组、原发乳腺癌组及远处转移组CK19 mRNA的中位数分别为67、542和1082,原发乳腺癌组与另外两组比较,CK19 mRNA平均水平差异具有显著性(P<0.05);以正常对照组CK19 mRNA的大值497拷贝/ml血作为阳性阈值,原发乳腺癌患者外周血肿瘤细胞阳性检出率为52.0%,与正常对照组(0)比较差异具有显著性(P<0.05),远处转移组肿瘤细胞阳性检出率(83.3%)显著高于原发乳腺癌组(P<0.05);原发性乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平及肿瘤细胞阳性率在临床病理因素各组间差异无显著性,但随着临床分期的增加,患者外周血CK19 mRNA水平呈递增趋势.结论:QRT-PCR方法定量检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平可早期发现血行播散的肿瘤细胞,应用于临床可指导个体化治疗方案的选择和疗效的动态监测,同时有望成为有价值的预后预测指标.
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巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19mRNA的临床意义
目的:对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值.方法:采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况.结果:胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关(P＜0.05),而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关(P＞0.05),而健康志愿者外周血中CK19 mRNA无1例阳性表达.结论:CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物.
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宫颈癌患者淋巴结CK19 mRNA的检测及其临床意义
背景与目的:采用RT-PCR技术检测CK19(cytokeratin 19)mRNA的转录,可在部分恶性肿瘤患者中检测到常规病理学方法不能检测到的隐性微转移.本研究旨在检测宫颈癌患者盆腔淋巴结组织特异性标志物(CK19 mRNA)的表达,并探讨其临床意义.方法:采用RT-PCR技术检测Ⅰ～Ⅱ期宫颈癌患者盆腔淋巴结CK19 mRNA的转录.生存曲线用Kaplan-Meier转录.生存率比较采用Log-rank检验.结果:32例宫颈癌患者共检测淋巴结标本206枚,经常规病理组织学方法检测到24枚淋巴结有癌转移,阳性率为12%(24/206);经RT-PCR法检测到44枚淋巴结表达CK19 mRNA,检出率为21%(44/206).RT-PCR法与常规病理组织学方法比较,差异有显著性(P＜0.01).常规HE染色阴性的182枚淋巴结中,29枚检测到CK19 mRNA的特异性条带,微转移的检出率为15.9%(29/182).低分化患者的淋巴结CK19检出率为87.5%(7/8)显著高于中～高分化患者的检出率33.3%(8/24)(P＜0.05).而淋巴结CK19的检出率与年龄、临床分期、组织学类型、宫颈肿瘤大小、肌层浸润深度、宫旁浸润、脉管癌栓均无明显关系(P＞0.05).淋巴结CK19 mRNA阳性患者的4年无瘤生存率为58%;而淋巴结CK19 mRNA阴性患者的4年无瘤生存率为76.5%,差异无显著性(P＞0.05).结论:与传统的病理组织学比较,采用RT-PCR技术检测CK19 mRNA转录能显著提高淋巴结微转移的检出率,预后判断有待增大病例数进一步研究.
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检测胃癌患者腹腔冲洗液CK19 mRNA和CEA mRNA用于预测腹膜微转移
目的:探索检测胃癌患者腹膜微转移的方法.方法:收集67例胃癌和9例胃良性病变患者腹腔冲洗液以及临床病理资料,分别采用巢式RT-PCR 检测腹腔冲洗液中角蛋白19(CK19)mRNA、癌胚抗原(CEA) mRNA、角蛋白20(CK20)mRNA表达;采用时间分辨荧光(TRF)检测腹腔冲洗液上清液中CEA蛋白(P-CEA)含量;采用H-E染色进行腹腔冲洗液细胞学(PLC)检查.结果:患者腹腔冲洗液中CK19 mRNA和CEA mRNA的阳性检出率分别为62.7%和52.2%,明显高于P-CEA(35.8%)、CK20 mRNA(34.3%)和PLC(31.3%)(P<0.01),且阳性率随肿瘤浸润深度、TNM分期及腹膜受累程度增加而增加.结论:巢式 RT-PCR联合检测胃癌患者腹腔冲洗液中CK19及CEA基因,可提高检测腹腔游离肿瘤细胞的灵敏性,适用于预测胃癌患者腹膜微转移.
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CK19 mRNA 逆转录聚合酶链反应检测循环乳腺癌细胞
目的:评估细胞角质蛋白CK19 mRNA检测对乳腺癌诊断的应用价值.方法:Ⅰ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者各77例,40例非肿瘤志愿者.每例取1.5 ml外周静脉血,小量血总RNA快速抽提纯化,RT-PCR扩增产物作琼脂糖凝胶电泳并测序,对比其在不同分期乳腺癌中的阳性率.结果:琼脂糖凝胶电泳和测序证实扩增产物为目的片段.Ⅰ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性率分别为19.48%(15/77)和40.26%(31/77),显著高于正常对照的5%(2/40)(P=0.037,P=0.001),且Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性率显著高于Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者(P=0.005).结论:CK19 RT-PCR是检测乳腺癌循环肿瘤细胞的较好方法,对治疗决策可能有指导意义.
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乳腺癌外周血细胞角蛋白19 mRNA的检测及临床价值
目的 应用荧光定量RT-PCR 检测乳腺癌外周血中的表达情况,并评价其表达的临床意义.方法 用荧光定量RT-PCR方法检测49例乳腺癌患者外周血CK19 mRNA表达.结果 49例乳腺癌患者外周血中CK19mRNA 检测阳性28例,阳性率57.1%,统计结果显示乳腺癌患者外周血CK19 mRNA的表达阳性率在患者不同年龄、病理类别、临床分期、ER、PR状态的各组差异无显著性(P＞0.05),在淋巴结转移状态间有显著差异.结论 CK19 mRNA可作为RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血微转移的分子标志物,有助于早期预测乳腺癌发生血道微转移,指导临床治疗.
关键词： 乳腺癌 CK19 mRNA 荧光定量RT-PCR 微转移 外周血 -
实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测结肠癌患者血CK19 mRNA水平及其意义
目的:了解结肠癌患者外周血CK19 mRNA的水平,探讨其临床意义.方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应,检测结肠癌患者75例、炎症性肠病(IBD)患者30例、健康志愿者41例外周血CK19 mRNA的水平.结果:75例结肠癌患者外周血CK19 mRNA的水平为(12 600±73 100)copies/mL,其中39例阳性,阳性率为52%.健康志愿者未检测到CK19 mRNA.CK19 mRNA水平与肿瘤病理分期和分化程度相关;CK19 mRNA阳性组中CK19蛋白阳性者显著多于CK19 mRNA阴性组(P＜0.05).结论:外周血CK19 mRNA可作为结肠癌辅助诊断指标,定量检测外周血CK19 mRNA有助于结肠癌微转移的监测.
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外周血循环hTERT mRNA和CK19 mRNA的表达与鼻咽癌肿瘤微转移的相关性研究
目的 探讨鼻咽癌患者外周循环血人端粒酶逆转录酶(hTERT) mRNA和细胞角蛋白19(CK19) mRNA表达与肿瘤微转移的相关性.方法 采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)定量检测44例鼻咽癌患者治疗前后外周循环血hTERT mRNA及CK19 mRNA定量表达,并分析其与临床病理特征的关系,同时以20例健康体检者作为对照.结果 对照组外周血中CK19 mRNA相对表达量为0.85±0.50,鼻咽癌患者外周血中CK 19 mRNA水平为10.97±4.60,差异有统计学意义(t=-14.39,P＜0.01);健康体检者外周血中hTERT mRNA相对表达量为1.09±0.40,鼻咽癌患者外周血中hTERT mRNA水平为10.45±3.81,差异有统计学意义(t=-16.64,P＜0.01).鼻咽癌患者外周血hTERT mRNA和CK19 mRNA的表达与临床分期、T分期、N分期、M分期有相关性(P＜0.05).治疗后鼻咽癌患者hTERT mRNA的表达量由10.75±3.81降低至5.46±2.00,而CK19 mRNA的表达量(5.63±1.91)较治疗前(10.97±4.60)亦明显下降(P＜0.01).结论 鼻咽癌外周血hTERT mRNA和CK19 mRNA的表达有可能作为预测外周血肿瘤细胞微转移和判断疗效的指标之一.
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大肠癌患者血清癌胚抗原、CEA mRNA和CK19mRNA检测的临床意义探讨
目的 探讨大肠癌患者血清中癌胚抗原(CEA)、CEA mRNA和CK19 mRNA检测的临床意义.方法 大肠癌患者48例为研究对象,放射免疫分析法检测血清中CEA水平;RT-PCR法检测患者血清中CEA mRNA和CK19 mRNA水平.分析血清CEA、CEA mRNA、CK19 mRNA水平与大肠癌患者病理因素关系;比较CEA、CEA mRNA、CK19 mRNA单独及联合检测的阳性率.结果 大肠癌患者血清中CEA、CEA mRNA、CK19 mRNA水平在Duckes C+D期患者的表达率明显高于Duckes A+B期患者.CEA+CEA mRNA+CK19 mRNA联合检测阳性率为87.5%,明显高于CEA、CEA mRNA、CK19 mRNA任何1项检测的阳性率,也明显高于CEA+CEA mRNA、CEA+CK19 mRNA、CEA mRNA+CK19 mRNA任何2项联合检测的阳性率.结论 联合检测CEA、CEA mRNA和CK19 mRNA可提高大肠癌阳性检出率.
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大肠癌患者外周血中细胞角蛋白19和癌胚抗原的表达及临床意义
目的:应用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT-PCR)技术检测大肠癌患者外周血中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达及临床意义,探讨其作为大肠癌微转移检测分子标记物的可能性.方法:应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA的表达.结果:大肠癌组CK19 mRNA和CEA mRNA表达的阳性率为58.89％ (53/90)和53.33％ (48/90);20例健康人外周血中无CK19 mRNA和CEA mRNA的表达;20例大肠腺瘤疾病患者有1例CK19 mRNA的表达,阳性率为5.00％ (1/20),无CEA mRNA的表达.大肠癌患者中CK19 mRNA、CEA mRNA的阳性率与肿瘤分期及肿瘤转移有显著相关性(P＜0.05).结论:CK19 mRNA和CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标记物具有良好的敏感度和特异性,同时可作为判断大肠癌患者的预后指标.
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CK19 mRNA和LUNX mRNA RT-PCR
目的以CK19、LUNX为靶基因,建立RT-PCR检测肺癌患者外周血中微转移的方法;检验CK19 mRNA、LUNX mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性及二者特异性和敏感性的比较.方法选择影像学未发现转移灶的非小细胞肺癌(NSCLC)患者40例,在治疗前抽取外周血;另选择肺部良性疾病30例与健康人10例作为对照组.对以上标本用逆转录PCR(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测CK19及LUNX mRNA的表达,同时对其进行半定量.结果 40例NSCLC外周血中CK19 mRNA和LUNX mRNA阳性率分别为42.5%(17/40)和57.5%(23/40),而30例肺良性疾病患者外周血中CK19及LUNX mRNA阳性率分别为6.7%(2/30)和0.0%(0/30);10例健康志愿者外周血无1例表达CK19 mRNA和LUNX mRNA,与肺癌组比较均有极显著差异.结论 CK19 mRNA、LUNX mRNA均可作为RT-PCR法检测肺癌患者外周血微转移的分子标志物;但后者在特异性和敏感性上优于前者.该方法的建立可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗.
