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生物芯片技术及其在肿瘤研究的应用进展
生物芯片是近几年来发展起来的一项新兴生物技术,它将大量的核酸或蛋白质等的探针同时有序的固化于固相支持物表面,然后与样品进行杂交,可以实现对核酸、蛋白、细胞等生物组分进行快速、准确、平行、大量的检测.这些芯片具有体积小、便于携带、无污染、分析速度快、所用样品少等优点,广泛应用于基因表达分析、新基因发现、基因组文库作图、基因突变及多态性分析、疾病诊断、药物筛选、基因测序等领域.本文就其技术原理、操作步骤、在肿瘤研究中的应用、存在的问题及发展前景作一简要综述.
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过表达CT120B基因诱导肺腺癌细胞G1期停滞及基因表达谱改变
目的探讨过表达CT120B基因对肺腺癌细胞生长的影响及其诱导的基因表达谱改变.方法用cDNA转染方法建立稳定过表达CT120B细胞株;CCK-8方法和裸鼠致瘤实验观察过表达CT120B对细胞在体外和体内生长的影响;表达阵列分析显示过表达CT120B诱导的基因表达谱变化;流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡.结果过表达CT120B的SPC-A-1细胞株生长速度明显减慢,在裸鼠体内致瘤能力降低.在稳定过表达CT120B的细胞中,cyclin E1、cdk2、c-kit和CXCR4等34个基因表达下调,caspase 8等4个基因表达上调.过表达CT120B诱导细胞G1期停滞,对细胞凋亡无明显影响.结论过表达CT120B通过诱导G1期停滞抑制肺腺癌细胞生长,稳定过表达CT120B细胞株中,c-kit和CXCR4等基因表达下调也有助于CT120B的生长抑制活性.
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EGCG诱导鼻咽癌细胞凋亡的cDNA阵列分析
目的探讨茶中多酚类物质EGCG介导鼻咽癌细胞凋亡的机制以及对EB病毒潜伏膜蛋白(LMP1)诱导凋亡的干预作用.方法采用已建立的受四环素调控的LMP1表达的鼻咽癌细胞系(pTet-on-LMP1 HNE2),经0.6 mg*L-1 Dox 和 100 mg*L-1EGCG处理24 h后,抽提RNA,分别与含有细胞凋亡相关基因为主的Atlas apoptosis cDNA expression array膜杂交.结果 EGCG上调或下调某些与鼻咽癌细胞凋亡相关基因表达. 结论 EGCG诱导肿瘤细胞凋亡的作用是多个基因及多条信号转导通路作用的结果,并对LMP1诱导鼻咽癌细胞凋亡相关基因表达有一定的干预作用.
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用cDNA阵列研究人肺癌与正常肺及胚肺组织基因表达谱
目的:研究人肺癌、成人肺及胚肺组织基因表达谱差异,观察肺癌发生中多个基因的作用.方法:用鳞状细胞肺癌、胎儿胚肺、胸外伤部分肺切除肺组织,提取总RNA后逆转录标记cDNA探针,与代表588个基因的AtlasTM cDNA阵列杂交,灰度扫描杂交信号强弱及统计分析差异.结果:肺癌组织中c-myc、c-fos相关基因等多个较正常肺组织表达增加的基因,其中有些基因表达变化与胚胎肺组织相似.结论:多个基因的表达变化在肺癌发生中起作用,且与胚肺基因表达谱相似,而表现出恶性肿瘤发生中的"胚胎化"生物学特性.
