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不同类型子宫内膜腺上皮细胞中bcl-2和bax基因表达的研究
目的:探讨bcl-2、bax在不同类型子宫内膜腺上皮细胞中的表达.方法:采用免疫组化检测子宫内膜腺上皮细胞中二指标的表达.结果:从单纯性、复杂性到不典型增生,bcl-2和bax的表达评分均有逐渐增多的趋势,不典型增生与前二者相比差异均有统计学意义,P＜0.01.在内膜样腺癌中,随着分化程度的降低、分期的增加,bcl-2表达评分下降.随着分化程度的降低bax的表达逐渐降低;随着浸润深度的增加bax表达逐渐增加.在增生期和分泌期bcl-2和bax的表达无负相关,但在内膜样腺癌组织中bcl-2表达与bax呈正相关.结论:bcl-2和bax参与了癌前病变的发生,bcl-2、bax表达水平在一定程度上反映了内膜样腺癌的生物学行为.bcl-2和bax在增生期和分泌期内膜变化中的相互作用关系不大,但二者共同作用参与了内膜样腺癌的发生与发展.
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子宫内膜基质干细胞的分离培养研究
目的:通过体外分离、培养子宫内膜基质干细胞,观察其生物学特性,探索一种简便、高效的分离培养人子宫内膜基质干细胞的方法.方法:取10例因子宫肌瘤行全子宫切除术患者的内膜组织标本,磁珠分选及克隆形成实验法分选子宫内膜基质干细胞,传代培养.流式细胞仪检测原代细胞表面标记,MTT法观察基质干细胞体外增殖情况；体外向成骨、成脂诱导分化,茜素红和油红O染色鉴定细胞分化能力,RT-PCR测定骨细胞和脂肪细胞特异性基因表达.同时检测基质干细胞表达胚胎时期标志蛋白OCT-4的情况.结果:通过该方法可获得子宫内膜基质干细胞,细胞易于贴壁,生长良好,传代稳定.细胞CD90和CD105表达阳性而CD45和CD34表达阴性.细胞周期的S期和G2-M期细胞比例高,细胞生长曲线呈“S”形.经成骨及成脂诱导后茜素红和油红O染色分别呈阳性反应,成骨及成脂标志性基因表达阳性.此外,免疫细胞化学染色显示OCT-4表达阳性.结论:子宫内膜基质干细胞具有间充质干细胞特性,来源广、易获取,可作为组织工程种子细胞来源.
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人子宫内膜细胞体外培养模型的建立
【目的】构建人子宫内膜细胞体外培养模型。【方法】收集子宫内膜组织，采用酶消化、筛网滤过、梯度离心的方法获得腺上皮与基质细胞混合细胞进行体外原代培养，采用光学显微镜下观察体外培养的细胞形态，采用波形蛋白和角蛋白单克隆抗体进行免疫组化法鉴定子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞。【结果】倒置显微镜下发现子宫内膜细胞中腺上皮细胞和基质细胞呈混合生长，其中基质细胞占大部分，为72．0％；腺上皮细胞占小部分，为24．5％，基质细胞和腺上皮细胞免疫组化染色后呈阳性，细胞纯度分别为24．5％和70．5％，两种细胞加起来的纯度为95％。【结论】该方法操作简便，效率高，可建立一个稳定实用的人子宫内膜细胞体外培养体系。
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液基细胞学检测非典型腺细胞的临床研究
目的 探讨液基细胞学检测(thinprep cytologictest,TCT)非典型腺细胞(atypical glandularcells,AGC)的临床意义.方法 选择经TCT检测诊断AGC患者109例,其中AGC-宫颈管细胞(EC)59例、AGC-子宫内膜细胞(EM)26例和AGC-无其他特殊意义(NOS)24例,对上述三种情况分别阴道镜下行宫颈活检、子宫内膜及颈管内膜刮取术(endocervical curettage,Ecc)并行病理诊断及HPV-DNA检查,分析其临床意义.结果 AGC患者检出率为0.25％ (109/44282).109例患者中AGC-EC59例(54.13％),≤40岁者检出比例高于＞40岁者(x2=5.49,P＜0.05)；AGC-EM 26例(23.85％),＞40岁者检出比例高于≤40岁者(x2 =4,65,P＜0.05);AGC-NOS 24例(22.02％),≤40岁者与＞40岁者检出比例差异无统计学意义(P＞0.05).无AGC-倾向瘤变.各组临床症状指标分布不同(x2=24.69,P＜0.01),发病年龄≤40岁宫颈病变发生率高于子宫内膜病变组(x2=8.79,P ＜0.01)；宫颈病变HPV阳性高于子宫内膜病变组(x2=11.52,P＜0.01),但两组余项指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 TCT检测仍是一种筛查AGC的有效手段,AGC具有重要的细胞学诊断提示作用,与宫颈、子宫内膜病变有关,且发病年龄趋向年轻化,要加强年轻女性宫颈疾病的普查及防治工作,做到早期诊治,可降低宫颈癌及子宫内膜癌的发病率和死亡率.
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子宫内膜细胞及干细胞分离培养和鉴别方法的研究进展
子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是子宫内膜间质细胞和腺上皮细胞种植于子宫腔外的雌激素依赖性疾病,具有易复发、侵袭性等恶性肿瘤样生物学特性[1].1978年,Prianishnikov[2]提出了子宫内膜干细胞的概念并认为其发展与干细胞相关.有学者报道,体外培养的异位子宫内膜细胞仍具有形成集落及分化能力提示异位的子宫内膜中可能存在干细胞[3-4].Du与Taylor[5]在异位内膜移入骨髓来源干细胞可分化为内膜细胞,也表明干细胞能够促进病变发展.尽管干细胞处于异位,但内膜本身能够转递信号直接复位干细胞.异位干细胞移行和分化可能是EMS发病的一种新机制.因此,建立体外研究的干细胞模型对于进一步研究EMS的分子发病机制具有重要意义[6].
