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人骨肉瘤组织钙网织蛋白表达及其意义探讨
目的:探讨钙网织蛋白(calreticulin,CRT)在骨肉瘤组织中的表达与骨肉瘤生长、转移的关系,以及化疗对其表达的影响.方法:取2005-10-01-2010-09-31在山东中医药大学附属医院(15例)、山东大学齐鲁医院(11例)及新汶矿务局集团中心医院(4例)骨科行骨肉瘤切除术、病历资料完整并排除合并其他运动系统肿瘤的骨肉瘤标本30例,其中转移20例,术前化疗者20例.每例标本同时取距离瘤组织＞ 30 mm的正常组织作对照.免疫组织化学染色法检测CRT在瘤体组织和正常组织中的表达;RT-PCR法检测CRT在mRNA水平的表达;蛋白质印迹法检测CRT蛋白的表达.结果:CRT主要存在于细胞质内,在所有标本中都有表达.其表达强度为瘤体组织(1.07±0.32)＜瘤体周围正常组织(2.68±0.09),P＜0.01;肿瘤转移组(0.93±0.21)＜未转移组(1.36±0.42),P=0.020;术前未化疗组(0.75±0.21)＜术前化疗组(1.24±0.30),P=0.001.CRT mRNA的表达强度为瘤体组织(0.58±0.30)＜瘤体周围正常组织(1.48±0.14),P＜0.01;肿瘤转移组(0.50±0.22)＜未转移组(0.73±0.23),P=0.033;术前未化疗组(0.27士0.13)＜术前化疗组(0.74±0.23),P＜0.01.CRT蛋白的表达水平为瘤体组织(369.35±14.27)＜瘤体周围正常组织(599.23±6.78),P＜0.01;肿瘤转移组(361.95±17.37)＜未转移组(394.15±17.97),P=0.031;术前未化疗组(288.96±12.86)＜术前化疗组(409.54±18.22),P＜0.01.结论:CRT的表达在人骨肉瘤组织中降低,其mRNA和蛋白质表达水平下降程度与瘤体是否转移有关,化疗可增加其表达水平.
关键词： 骨肉瘤 钙网织蛋白 免疫荧光组织化学染色 逆转录聚合酶链反应 蛋白质印迹 -
体内和体外条件下Nogo-A在大鼠小脑颗粒神经元上表达差异的研究
Nogo-A是网膜家族蛋白的成员之一,在抑制成年哺乳动物中枢神经系统损伤后轴突再生的过程中发挥着重要作用.Nogo-A表达于寡突胶质细胞和多种神经元,但在成年动物的小脑颗粒神经元中却未检测到.为探讨Nogo-A在小脑颗粒神经元上的表达情况及其影响因素,本实验应用免疫荧光组织化学染色法研究了Nogo-A蛋白在新生大鼠脑切片上和不同体外培养条件下小脑颗粒神经元中的表达.结果显示:在体条件下Nogo-A蛋白在新生大鼠的小脑颗粒神经元上的表达逐渐减少,至新生14 d时检测不到;而在体外培养的来源于新生7 d大鼠的小脑颗粒神经元中Nogo-A蛋白持续表达,可维持到14 d;与胶质细胞共培养,或加入胶质细胞培养上清的小脑颗粒神经元仍然表达Nogo-A蛋白.本研究结果表明,体内和体外两种条件下Nogo-A蛋白在小脑颗粒神经元上的表达存在差异,新生期Nogo-A在小脑颗粒神经元上的表达下调可能与Purkinje细胞有关,提示Nogo-A在生后发育过程中可能与神经元的迁移或突触的形成密切相关.
关键词： Nogo-A 小脑颗粒神经元 表达 免疫荧光组织化学染色 大鼠
