首页 > 文献资料
-
结肠癌组织microRNA-135a表达增高的临床意义与预后分析
目的 miRNA-135a作为miRNA-135家族的重要组成成员,其与多种肿瘤发生发展密切相关.但关于miRNA-135a的表达异常对结肠癌的临床意义及预后判断的研究较少.本研究旨在明确结肠癌组织miRNA-135a相对表达量与结肠癌患者临床病理因素的相关性及对患者生存预后的影响.方法 收集2009-01-01-2009-12-31在哈尔滨医科大学附属第四医院行手术切除的结肠癌组织样本及距离肿瘤边缘5cm处癌旁黏膜组织样本共47对.在47对结肠癌样本中应用逆转录实时定量聚合酶链反应,检测miRNA-135a相对表达量,进一步分析其表达变化与结肠癌临床病理特征的相关性.并运用Kaplan-Meier生存曲线进行预后分析.结果 miRNA-135a在结肠癌组织中表达较癌旁组织显著升高,P=0.03.miRNA-135a表达量变化与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、肿瘤分化程度、浸润深度及远处转移均无关,P值均＞0.05.但在淋巴结转移组miRNA-135a表达明显升高,均值为0.49±0.25,而无淋巴结转移组为0.35±0.17,两组比较差异有统计学意义,P=0.03.在临床Ⅲ/Ⅳ期的患者中miRNA-135a表达较Ⅰ/Ⅱ期的患者显著升高,两组比较差异有统计学意义,P=0.04.Logistic二项回归分析显示,miRNA-135a高表达组增加了结肠癌患者淋巴结转移的风险,P=0.03.miRNA-135a高表达同时可增加结肠癌疾病进展(TNM分期)的风险,P=0.04.生存分析表明,21例miRNA-135a高表达组的中位生存期为(41±9.73)个月,26例miRNA-135a低表达组的中位生存期为(58±6.16)个月,两组比较差异有统计学意义,P=0.021.结论 miRNA-135a表达量增高与结肠癌疾病进展及不良预后正相关.miRNA-135a有望成为判断结肠癌预后的潜在靶点.
关键词： 微小RNA-135a 结肠癌 临床病理 预后 相关性 -
miR-135a在胶质瘤中的表达变化及作用机制
目的 探讨miR-135a在胶质瘤中的表达及对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其相关分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测60例的胶质瘤组织及相对应的癌旁组织、人胶质瘤细胞(U87、U251、A172)和人星形胶质细胞HA1800中miR-135a表达水平.将miR-135a mimics转染至U87细胞,采用CCK-8实验、流式细胞术观察U87细胞增殖活性及凋亡率的变化,采用Western blotting法观察U87细胞HOXA10蛋白的表达变化.结果 胶质瘤组织较癌旁组织中miR-135a表达低(P<0.01);胶质瘤细胞U87、U251、A172中miR-135a表达较人星形胶质细胞HA1800低(P<0.01);随着胶质瘤病理分级的增高,miR-135a的表达逐渐降低(P均<0.01).上调U87细胞miR-135a的表达后,细胞的增殖活性降低,凋亡率升高,HOXA10蛋白表达降低(P均<0.01).结论 miR-135a在胶质瘤中呈低表达,miR-135a通过下调HOXA10基因在胶质瘤中发挥着抑癌作用.
关键词： 微小RNA-135a 胶质瘤 细胞增殖 细胞凋亡 同源框基因A10 -
微小RNA-135a通过Notch通路调控小儿肝母细胞瘤细胞增殖的机制
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-135a通过Notch通路调控小儿肝母细胞瘤细胞增殖和增殖的影响.方法 将传代的肝母细胞瘤细胞分为两组:A组:PEF miR-135a和PSV2neo共转染组,B组:PEE和PSV2neo共转染组,取正常小儿肝脏细胞作为C组.A组为实验组,B、C两组为阳性对照组和阴性对照组.采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-135a在两组肝母细胞瘤细胞中的表达,采用流式细胞法检测过表达的miR-135a对肝母细胞瘤细胞凋亡的影响,利用噻唑蓝(MTT)法及碱性磷酸酶(ALP)法检测观察两组细胞的增殖和增殖,Western blot检测两组细胞中Jagged1和Notch1蛋白的表达水平.结果 Real-time PCR显示miR-135a在肝母细胞瘤细胞中的表达较正常小儿肝脏细胞明显下调(P=0.009);成功构建PEF-miR-135a真核表达载体,Real-time PCR显示:A组细胞miR-135a的表达明显上调(P =0.003).膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)检测显示miR-135a过表达能够显著抑制肝母细胞瘤细胞的凋亡率(P=0.030).Western blot检测显示miR-135a过表达可以显著下调Jagged1和Notch1蛋白的表达水平.结论 miR-135a过表达可能通过下调Notch通路的表达来抑制小儿肝母细胞瘤细胞的增殖.
关键词： 肝母细胞瘤 微小RNA-135a Notch通路 增殖 -
微小RNA-135a通过抑制其靶基因Sp3的表达促进大鼠胰腺腺泡细胞凋亡
目的 探讨微小RNA-135a(miR-135a)是否通过抑制其靶基因Sp3基因的表达促进大鼠急性水肿性胰腺炎中胰腺腺泡细胞(AR42J)凋亡.方法 设计miR-135a模拟物及反义寡核苷酸链,并通过慢病毒转染AR42J细胞,72 h后于荧光显微镜下观察AR42J细胞荧光表达量,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测转染后miR-135a的表达量.使用50 μg/L重组大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导AR42J细胞建立体外急性水肿性胰腺炎模型(AEP),淀粉酶试剂盒检测培养基上清淀粉酶含量,Western blot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达量,流式细胞术检测AR42J细胞的凋亡率.构建Sp3野生型(WT)和突变型(Mut)3'非编码区(3'UTR)-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统检测miR-135a对Sp3基因野生型及突变型3'UTR荧光素酶活性的影响,并通过FQ-PCR和Western blot法检测转染miR-135a模拟物及反义寡核苷酸链后Sp3基因mRNA及蛋白表达量变化.结果 转染miR-135a模拟物组较转染空病毒组miR-135a表达量升高(5.84±0.16)倍,转染miR-135a反义寡核苷酸链组miR-135a表达量是转染空病毒组的(0.54±0.01)倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).建立急性水肿性胰腺炎模型后,转染miR-135a模拟物组AR42J细胞凋亡率[(40.63±3.24)％]较转染空病毒组[(25.40±0.79)％]明显升高,转染miR-135a反义寡核苷酸链组AR42J细胞凋亡率[(15.10±0.10)％]较空病毒组明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).生物信息学软件及荧光素酶定量实验结果表明Sp3是miR-135a的靶基因,转染miR-135a模拟物组Sp3 mRNA及蛋白质表达量较转染空病毒组明显降低,转染miR-135a反义寡核苷酸链组Sp3 mRNA及蛋白质表达量较空病毒组明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-135a可能能够通过抑制其靶基因Sp3基因的表达促进大鼠体外急性水肿性胰腺炎中AR42J细胞的凋亡.
关键词： 微小RNA-135a 急性水肿性胰腺炎 脱噬作用 胰腺腺泡细胞 -
微小RNA-135a在消化系统恶性肿瘤中的研究进展
微小RNAs(miRNAs,miR)是一类内源性、非编码的单链RNAs,在恶性肿瘤的演进过程中可发挥癌基因或抑癌基因的作用.研究结果表明,miRNA在消化系统肿瘤的发生、发展过程中均发挥着重要作用.目前,miR-135a在消化系统肿瘤发生、发展中的作用已引起广泛关注.研究结果证实,miR-135a可通过调控其靶基因的表达而影响肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移等多个关键生物学过程.本文主要就miR-135a在消化系统肿瘤中的新研究进展予以综述.
