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疏肝健脾活血方含药血清对肝纤维化模型大鼠肝窦内皮细胞失窗孔化的影响
目的 探讨疏肝健脾活血方治疗肝纤维化的可能作用机制.方法 10只SD大鼠以10 ml/kg疏肝健脾方浓缩液(浓度2.7 g/ml)灌胃,每日1次,连续3天后制备含药血清.中药血清设5％、10％、15％、20％、25％共5个浓度,采用MTT法筛选实验药物浓度.采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射建立肝纤维化大鼠模型后分离肝纤维化肝窦内皮细胞(SEC),同时集正常大鼠肝星状细胞(HSC)和SEC.实验分为正常组、模型组、DAPT组、NF组、中药组、中药加DAPT组、中药加NF组,共7组.各组均加入HSC,正常组加入正常大鼠SEC,其余组加入肝纤维化大鼠SEC,常规培养24h.吸出上清液,DAPT组、中药加DAPT组加入0.2 μmol/L DAPT(Notch通路阻断剂),NF组、中药加NF组加入1 gsu/ml rhNF-κB(Notch通路激动剂).前4组加入含10％ FBS DMEM/12培养基,后3组加入含预筛选浓度中药血清、10％ FBS DMEM/12培养基,培养72h后MTT法检测各组HSC活力,Western Blot法检测SEC中CD31、vWF蛋白表达情况.结果 筛选出10％浓度的中药血清对细胞增殖有抑制作用.与正常组比较,造模2、4、8周模型组HSC活力上升,造模4、8周CD31蛋白表达升高(P＜0.05或P＜0.01);与模型组比较,NF组HSC活力上升,DAPT组和中药组HSC活力、CD31、vWF蛋白表达下降(P＜0.05或P＜0.01);与NF组比较,中药加NF组HSC活力、CD31、vWF蛋白表达下降(P＜0.05或P＜0.01);与DAPT组比较,中药加DAPT组HSC活力、CD31、vWF蛋白表达均下降(P＜0.05或P＜0.01). 结论 疏肝健脾活血方可通过干预Notch通路,抑制HSC活力及SEC失窗孔化,可能是其治疗肝纤维化的作用机制之一.
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Notch通路与骨髓基质细胞衰老的关系探讨
本研究探讨Notch通路活化与骨髓基质细胞衰老的关系.用脂质体转染法将Notch1胞内区(ICN)转入体外培养的小鼠骨髓基质细胞,转染后3天,用MTT法检测细胞增殖率;用流式细胞术检测细胞周期分布;用细胞化学法检测衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β galactosidase,SA-β-ga1)阳性细胞百分率;用RT-PCR及Western blot法分别检测周期蛋白激酶抑制因子P53、p21cip1/waf1基因水平和蛋白水平的表达.结果表明,ICN转染入小鼠骨髓基质细胞后3天,骨髓基质细胞增殖受抑,细胞周期阻滞在Gl期,sA-β-gal阳性细胞百分率增加,无论从基因水平还是蛋白水平均显示P53、p21Cip1/Waf1表达增高,与未转染组及转空质粒组相比差异均具有统计学意义.结论:Notch通路活化可导致骨髓基质细胞衰老,这种作用可能是通过增加p53、p21Cip1/Waf1蛋白的表达实现的.
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肢体缺血预处理对麻醉单肺通气时肺功能的保护作用及对Notch通路蛋白表达的调控研究
目的 分析肢体缺血预处理对麻醉单肺通气时肺功能的保护作用及对Notch通路蛋白表达的调控,为临床治疗提供参考.方法 回顾性分析2010～2015年收治的肢体缺血预处理麻醉行左侧开胸食管癌根除单侧肺通气患者临床资料.以通气行麻醉单侧肺通气未肢体缺血预处理患者为对照组(n=90).分析两组患者的不同时间点肺功能相关指标血氧分压、血二氧化碳分压、氧合指数及肺泡-动脉氧分压差;检测两组研究对象静脉血中炎症反应因子白细胞介1(IL-1)、白细胞介2(IL-2)、白细胞介6(IL-6)、Notch通路蛋白Notch1、Notch2蛋白及基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9水平的变化.结果 两组在插管后5 min血气指标、炎症反应因子及Notch通路蛋白之间差异无统计学意义(P>0.05),而肢体缺血预处理组患者在单侧肺通气后60 min、恢复双肺通气后10 min和手术结束时,血氧分压、氧合指数及肺泡-动脉氧分压差均明显低于对照组(P<0.05),且炎症反应因子IL-1、IL-2、IL-6和Notch通路蛋白Notch1、Notch2及MMP-2、MMP-9均明显低于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.05).结论 肢体缺血预处理对麻醉单肺通气肺功能有明显保护作用,且能够抑制Notch通路蛋白及炎症反应因子和基质金属蛋白酶的表达.
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从Notch通路探讨电针促进局灶性脑缺血再灌注大鼠海马神经干细胞增殖的作用机制
目的:通过Notch信号通路探讨电针对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠海马神经干细胞增殖的促进作用,阐明其治疗脑梗死的可能机制.方法:将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及电针组,以大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,通过巢蛋白(nestin)免疫组化法观察脑缺血大鼠海马神经干细胞增殖情况,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)和RT-PCR检测海马组织中Notch信号通路上关键信号分子Notch1和胞内片段(NICD)的表达情况,同时使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)浓度.结果:电针“曲池”、“足三里”穴可明显改善MCAO大鼠的神经功能缺损症状;促进脑缺血后海马神经干细胞(nes-tin+)的增殖(模型组vs电针组:173.40±38.76vs246.80±47.73,P=0.028);增强Notch信号通路中Notch1和NICD的表达,并提高血清中VEGF的分泌.结论:电针可通过活化Notch信号通路,同时促进VEGF的分泌,促进海马神经干细胞的增殖,来实现对脑缺血的治疗作用.
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Notch胞内域1对高糖诱导小鼠肾小球足细胞凋亡的影响
目的 通过体外高糖培养小鼠肾小球足细胞,检测Notch胞内域1(NICD1)的表达与肾小球足细胞凋亡的关系并了解其他信号通路是否介导高糖对Notch通路的激活,以探讨治疗糖尿病肾病的潜在方向.方法 高糖培养小鼠足细胞,于刺激0、12、24、48、72 h后收集细胞,检测NICD1蛋白表达情况.将细胞分为7组:正糖组、高糖组、高糖+γ分泌酶抑制剂(GSI,抑制NICD1活化)组、高糖+ p38细胞分裂素活化蛋白激酶抑制剂组、高糖+Janus激酶2抑制剂组、高糖+转化生长因子β1Ⅰ型受体抑制剂组和高糖+磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B抑制剂组.分别采用免疫细胞化学和Western blotting法检测NICD1的表达,流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)观察足细胞凋亡情况.两组间数据比较采用t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析.结果 高糖培养足细胞NICD1蛋白较正糖组(0.079±0.010)增加,12 h开始增加(0.443 ±0.075),48 h达峰(0.746±0.034),72 h略下降(0.658±0.056,F=6.235,P＜0.01).流式细胞术及TUNEL显示48 h时足细胞凋亡率升高,给予GSI后抑制NICD1的活化及足细胞凋亡(P＜0.01)；给予Janus激酶2(0.193±0.096)和转化生长因子β1Ⅰ型受体抑制剂(0.225±0.067)可抑制高糖对NICD1蛋白的活化(t=6.781、4.287,均P＜0.01).结论 高糖通过Notch通路诱导足细胞凋亡,高糖对Notch通路的激活可能通过Janus激酶/转录激活因子和转化生长因子β1/Smad通路.
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DAPT对离体培养的基底膜的影响
目的 观察新生大鼠体外培养的基底膜在Notch通路被阻断的情况下,毛细胞的生长变化情况.方法 取新生(P0) SD大鼠耳蜗基底膜进行体外培养,采用自身对照的方式,实验组基底膜加入含Notch通路阻断剂DAPT(终浓度为5μM)的高糖培养基,对照组不加DAPT,培养5天(P5)后,用激光共聚焦显微镜观察毛细胞的生长变化情况.P0时采用逆转录PCR检测Notch通路的存在与否,P5时采用实时定量PCR检测阻断Notch通路后下游基因的变化情况.结果 实验组经DAPT的处理后有毛细胞的增多,逆转录PCR证实了出生第一天时尚有Notch通路的存在,实时定量PCR证实DAPT处理后Hes1和Hes5表达降低,而Math1表达升高.结论 新生大鼠中Notch通路活性尚存,加入Notch通路阻断剂DAPT后,抑制毛细胞生成的Hes1和Hes5表达降低,而促毛细胞生成的Math1表达升高,并且,通过形态学观察和统计学分析发现毛细胞数目增多.
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Notch通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导人牙周膜细胞表达RANKL/OPG的影响
目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCS)后Notch信号通路的表达及其对RANKL/OPG表达的影响.方法:酶消化法结合组织块法原代培养hPDLCs,取第三代至第五代细胞给予0.1、1、10μg/mlPg-LPS刺激72h,Real-time PCR检测RANKL/OPG mRNA的表达,并选择佳诱导浓度1μg/ml组,采用Real-time PCR检测Notch通路Notch1-2、Notch4、Jagged-1、Jagged-2、DLL-1以及Hey-1表达受体配体及目的基因表达.随后,以γ-分泌酶抑制剂DAPT预处理hPDLCs 1h,予1μg/ml Pg-LPS刺激72h后,Real-time PCR、Western-Bloting检测Noah通路目的基因Hey-1及RANKL/OPG mRNA、蛋白水平的表达.结果:1 μg/ml Pg-LPS可显著上调hPDLCs RANKL、Notch通路受体Notch4、配体DLL-1、Jagged-1及目的基因Hey-1的表达(P＜0.05);而对OPG、Nocth1-2、Jagged-2 mRNA水平表达无明显影响(P＞0.05).此外,γ-分泌酶抑制剂DAPT可抑制Pg-LPS诱导RANKL及Hey-1 mRNA及蛋白的表达上调,而仅对OPGmRNA表达有影响(P＜0.05).结论:Notch信号通路参与调控Pg-LPS诱导的hPDLCs RANKL/OPG表达.
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曲古抑菌素A对细胞PANC-1株凋亡和肿瘤转移相关基因表达的影响
目的 探讨曲古抑菌素A( TSA)诱导胰腺癌细胞PANC-1细胞凋亡机制.方法 TSA 0.1～0.6 μmol·L -1培养PANC-1细胞0～48 h,MTT法检测细胞存活率并计算IC50.TSA 0.4 μmol·L -1 PANC-1 培养0 ～48 h,Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化.TSA 0.4 μmol·L-1 PANC-1培养0～12h,检测胱天蛋白酶3活性.TSA 0.4 μmol·L-1与PANC-1培养24 h,实时定量PCR检测c-myc,p53,Bcl-2,Bax,存活素,基质金属蛋白酶1 (MMP1)和基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)和Notch-1基因的表达.TSA 0.4和0.6 μmol·L-1与PANC-1培养24 h,细胞免疫化学方法检测Notch-1蛋白的胞内活性形式NICD表达.结果 TSA可以明显抑制PANC-1细胞增殖,12,24和48 h的IC50值分别为0.42,0.32和0.19 μmol·L-1,具有量效(r =0.640,P=0.01)和时效(r=0.768,P=0.002)关系.Hoechst 33258染色结果表明,TSA 0.4 μmol·L-1增加PANC-1细胞核的蓝色荧光并出现凋亡特征.TSA 0.4 μmol·L-1作用4,8和12 h后,胱天蛋白酶3的活性分别为正常对照组的1.62±0.12,2.68±0.17和(3.92±0.23)倍.PCR结果显示,TSA 0.4 μmol·L-1作用24 h后,p53,c-myc和存活素mRNA表达下降,分别为对照组的(18.3±5.1)％,(24.2±0.9)％和(15.8±1.0)％,Bcl-2和Notch-1 mRNA未见明显变化,而Bax,MMP1和TIMP-1 mRNA升高(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值降低到正常对照组的(13.0±2.8)％.Notch-1活性分子NICD明显升高(P＜0.05).结论 TSA可通过线粒体途径诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡,而且使Notch-1激活,促进转移相关基因表达.
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高压氧及Notch信号阻断剂对大鼠颅脑损伤后海马区神经干细胞增殖分化的影响
目的 观察高压氧及Notch信号阻断剂(DAPT)对大鼠颅脑损伤后内源性神经干细胞增殖分化的影响.方法 100只成年健康Wistar大鼠随机平均分为假手术组、颅脑损伤组、DAPT{N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl-L-alanyl)]-Sphenylglycinet-butylester}组、高压氧组及二甲基亚砜(DMSO)组,应用改良的自由落体方法制备脑损伤模型,用免疫荧光双标记染色法观察伤后7、14、21 d及28 d大鼠海马区神经干细胞增殖分化.结果 颅脑损伤组、DAPT和高压氧组海马区BrdU/nestin双标阳性细胞数,在伤后7d为(14.2±1.3)、(11.4±1.7)个和(22.3±1.5)个,在伤后14 d为(9.6±0.7)、(6.9±2.1)个和(13.8±1.4)个,在伤后7d较伤后14 d明显增多(P＜0.05);与颅脑损伤组比较,DAPT组在伤后7d及14d双标阳性的细胞数明显减少(P＜0.05);高压氧组在伤后7d及14 d双标阳性的细胞数明显增多(P＜0.05).结论 高压氧能促进内源性神经干细胞增殖分化,Notch信号阻断剂抑制了内源性神经干细胞增殖分化.
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Notch信号转导通路与糖尿病肾病的关系
糖尿病肾病(DN)是糖尿病常见微血管病变之一,高糖状态、高血压、免疫炎性反应等因素均可导致肾功能减退,加速DN的发生和发展.Notch信号转导通路作为在进化上高度保守的信号系统,可通过调节细胞间的相互作用,影响细胞、组织及器官的分化和发育.研究表明,在DN中Notch信号转导通路明显活化,并通过影响血管生成和胰腺内分泌及外分泌细胞发生、介导肾小球功能损伤和足细胞凋亡、促进肾小管间质损伤和纤维化进展,影响DN的进展.阻断Notch通路可能成为DN治疗的新靶点.
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非酸反流与Barrett食管发生机制研究进展
Barrett食管与胃食管反流性疾病密切相关,反流包括酸反流和非酸反流.近年来关于非酸反流与Barrett食管的关系受到越来越多的重视,其中,胆汁在反流性食管炎、Barrett食管及其并发食管腺癌的发生发展过程中起重要作用,尤其与BE和食管腺癌的发生密切相关.胆汁反流可通过活化法尼酯衍生物受体(famesoidX receptor,FXR)-尾型相关同源盒转录因子-2(caudal-related homeodomain transcription factor-2,CDX2)通路,以及通过Notch通路与CDX2信号的串话效应调控食管上皮细胞肠化生.因此,如何从胆汁酸的作用机制来深入研究以防止Barrett食管和食管腺癌的发生,是临床研究值得关注的问题.
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POSTN蛋白对老年大鼠膝胫骨平台软骨细胞增殖的影响
目的 探讨POSTN蛋白对老年大鼠膝胫骨平台软骨细胞增殖的影响.方法 体外分离培养20月龄SD雌性大鼠膝胫骨平台软骨细胞至第3代,分为3组:培养液注射POSTN蛋白组、注射PBS组、注射抗POSTN蛋白组,使用EDU检测软骨细胞增殖率.分别于24、48、72 h观测各组软骨细胞增殖情况,同时使用免疫组织化学技术观测软骨细胞中Notch1蛋白表达情况;20月龄SD大鼠30只,随机分为3组:注射POSTN蛋白组、注射PBS组、注射抗POSTN蛋白组.分别于1、3、5d连续向一侧膝关节腔注射3次相关试剂,并在1d时关节腔注射EDU,2周后处死大鼠取膝胫骨平台,观测软骨细胞增殖情况.组间比较使用单因素方差分析.结果 24 h时体外培养细胞增殖率3组间差异有统计学意义(F=27.32,P=0.017),注射POSTN蛋白组[(23±8)％]和PBS组[(21±10)％]细胞增殖率较抗POSTN蛋白组[(16±5)％]高(P=0.003,P=0.011);48 h时体外培养细胞增殖率3组间差异有统计学意义(F=35.34,P＜0.01),注射POSTN蛋白组细胞[(36±11)％]增殖率较其他2组[(22±6)％、(18±6)％]高(P=0.021,P＜0.01);72 h体外培养细胞增殖率3组间差异有统计学意义(F=52.62,P＜0.01),注射POSTN蛋白组细胞增殖率[(56±17)％]较注射PBS组[(31±8)％]、抗POSTN蛋白组[(26±7)％]高(P=0.007,P＜0.01),注射PBS组较注射抗POSTN蛋白组高(P＜0.01);Notch1蛋白在注射POSTN蛋白组软骨细胞表达多,在抗POSTN蛋白组少.大鼠膝内侧胫骨平台软骨细胞2周增殖率3组间差异有统计学意义(F=26.72,P＜0.01),关节腔注射POSTN蛋白组[(36±14)％]细胞增殖率较注射PBS组[(19±7)％]、注射抗POSTN蛋白组[(10±4)％]高(P=0.003,P＜0.01),注射PBS组较注射抗POSTN蛋白组细胞增殖率高(P=0.031).结论 POSTN蛋白可以促进老年大鼠膝胫骨平台软骨细胞的增殖,而抗POSTN蛋白可以减缓软骨细胞的增殖;POSTN蛋白可能通过激活Notch信号通路来促进软骨细胞的增殖.
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Notch信号通路和miR-21在周围神经损伤修复中的交互作用机制
背景:神经损伤修复是外科临床和基础研究的主要热点之一.小间隙套管治疗周围神经损伤的作用在前期研究中已经得到证实,但详细机制未能明确.同时Notch信号通路和微小RNA系统逐渐成为该领域的潜在热点,但二者的相关作用尚未得到明确报道证实.目的:观察携带骨髓间充质干细胞的小间隙套管对周围神经损伤的治疗作用,探究Notch信号通路和miR-21在治疗过程中的相互作用关系.方法:体内实验中制造SD大鼠喉返神经8 mm缺损模型,分为假手术组、小间隙组和小间隙+骨髓间充质干细胞组,治疗后测定电生理结果,Western blot测定Notch信号通路和微小RNA表达情况.体外实验中在小间隙套管内培养骨髓间充质干细胞并行神经元方向诱导,通过改变Notch/miR21表达情况,检测神经标记物的表达情况,分析骨髓间充质干细胞活性变化.结果与结论:神经染色和肌电图结果均确认了骨髓间充质干细胞的治疗效果.在骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中,Notch信号表达明显增强,miR-21表达明显上扬.通过进一步调控两因素表达发现,人为激活Notch信号或使miR-21过表达后骨髓间充质干细胞向神经分化的能力明显增强,抑制Notch信号后,骨髓间充质干细胞神经分化能力减弱,同时miR-21的促进作用失效.发现Notch信号通路和miR-21为骨髓间充质干细胞联合小间隙套接治疗周围神经损伤可能的重要促进机制,其中Notch信号通路具有更高级别的促进或抑制作用等级.
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佐剂关节炎大鼠肺功能与Treg、Notch信号通路的关系
目的:观察佐剂关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠肺功能、外周血调节性T细胞(Treg)及肺组织Notch通路变化.方法:将20只SD大鼠随机分为正常对照组(NC)和模型对照组(MC),每组10只;向MC组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml致炎,复制成AA模型;致炎18天后,观察两组大鼠足跖肿胀度(E)、关节炎指数(AI)、肺功能、肺组织形态学变化,采用流式细胞术检测外周血Treg,PT-PCR法检测肺组织Notch受体及配体表达.结果:AA大鼠E、AI、1秒内平均呼气流量(FEV1/FVC%)、肺组织Notch3、Notch4及Delta1的表达明显升高;75%肺活量的大呼气流量(FEF75)、用力大呼气流量(PEF)、肺动态顺应性(Cldyn)降低,外周血CD4+CD25+Treg、肺组织Notch1、Jagged1、Jagged2的表达水平显著降低(P <0.01或P <0.05).相关分析显示,肺功能参数FVC、FEF75与CD4+CD25+Treg呈正相关,FEF50、MMF与Jagged1、Notch1呈正相关;FEF25、FEF50、PEF与Delta1、Notch3、Notch4呈负相关(P <0.01或P <0.05).结论:AA大鼠发生关节炎症同时,出现肺功能、Treg降低及Notch通路的变化;肺功能与Treg、Notch受体/配体呈高度相关性,提示Treg和Notch通路可能参与肺功能降低的过程.
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转录因子SOX9与肿瘤发生的关联
SOX9是与性别决定密切相关的转录因子,属于SOX基因家族的一员,可维持从胚胎期开始机体多种生命活动的正常运转.SOX9表达异常可引起一系列生理紊乱,并与肿瘤的发生密切相关.本文对SOX9在不同生理病理条件下的表达情况,与microRNA的相互作用以及可能参与的潜在的多种调节通路进行综述,以期为SOX9在疾病特别是肿瘤发生发展中的作用研究提供新的信息.
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小胶质细胞的培养及鉴定
目的:获得高纯度培养原代小胶质细胞的方法并检测Notch信号通路相关分子在小胶质细胞的表达情况.方法:取胎鼠利用反复机械振摇纯化分离小胶质细胞;利用流式细胞仪,根据CD11b及MHCⅡ的表达水平对分离的小胶质细胞纯度进行鉴定;利用qPCR及琼脂糖凝胶电泳检测小胶质细胞中Notch通路相关分子的表达情况.结果:利用5只胎鼠采取反复机械振摇的方法可较稳定的获得1.1×106个的小胶质细胞,流式细胞术结果显示细胞纯度高达97.77%,并在小胶质细胞中检测到Notch相关分子的表达.结论:利用胎鼠反复机械振摇法可以获得较高纯度及产量的小胶质细胞,小胶质细胞表达Notch信号通路.
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GST-hDSL重组蛋白的原核表达纯化及对人造血祖细胞的扩增作用
目的:原核表达DSL与谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白并研究观察GST-hDSL对人脐带血CD34+造血祖细胞的体外扩增作用.方法:将人DSL cDNA的蛋白编码序列克隆入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌DH5α中诱导表达融合蛋白,用DEAE阴离子交换柱纯化目的蛋白.然后分离、纯化脐带血CD34+造血祖细胞,不加细胞因子或加入SCF(干细胞生长因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬细胞集落刺激因子,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),经过14天的培养,检测GST-hDSL对细胞总数、CD34+细胞百分率、以及集落形成的影响.结果:当SCF和GM-CSF存在时,GST-hDSL组的CD34+细胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)数以及高增值潜能集落(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)数分别是时照组的1.9、1.2、5.3倍.结论:当与SCF和GM-CSF联合作用时,重组GST-hDSL蛋白对造血祖细胞具有扩增作用.
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通过RAW264.7细胞系初步研究破骨细胞中Notch1对RANKL-RANK系统的影响
目的·探索细胞核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)/核因子κB受体激活蛋白(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)系统及Notch通路间的交互调控机制.方法·通过RANKL(35 ng/L)刺激RAW264.7小鼠破骨细胞前体细胞系,用real-time PCR、Western blotting检测Notch通路关键分子的表达水平.小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术抑制Notch通路中Notch1、Dll1和Dl13分子的表达,检测上述分子抑制后Rank mRNA和蛋白表达的变化.结果·RANKL刺激引起Notch1、Jagged1、Jagged2的表达降低,Dll4的表达升高.RANKL抑制Notch通路下游分子Hes1、Hey1的表达.通过siRNA技术,Notch1、Dll1和Dll3 mRNA的表达分别下调71％ (P=0.000)、53％ (P=0.015)和70％ (P=0.000).Notch1表达抑制后,Rank mRNA和蛋白的表达均增加(P=0.003,P=0.000).结论·Notch1对RANKL-RANK系统的潜在调节机制,可能在破骨细胞相关的溶骨活动中发挥重要作用.
关键词： 破骨细胞 溶骨 Notch通路 RANKL-RANK系统 -
VEGF通路和Notch通路在肿瘤血管生成中的相互作用及靶向药物的研发
综述VEGF通路和Notch通路在肿瘤血管生成中的作用,重点阐述两者的相互作用在肿瘤血管形成中的意义,并概述以这两条信号通路为靶点的抗肿瘤药物研发现状.
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血管紧张素Ⅱ对足细胞Notch通路及Nephrin表达的影响
目的：探讨血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)刺激小鼠足细胞对Notch通路、Nephrin表达的影响。方法 AngⅡ刺激小鼠足细胞并给予缬沙坦干预，采用免疫荧光化学、Western blot、Real-time PCR 方法检测 Notch1、Notch 胞内域1( NICD1)、Hes1、Nephrin的表达情况。结果 AngⅡ呈时间依赖性增加足细胞Notch1、NICD1、Hes1表达，抑制 Nephrin 表达( P <0．01)；缬沙坦可抑制 AngⅡ对 Notch 通路的活化，增加Nephrin的表达( P<0．01)。结论 AngⅡ通过激活 Notch通路降低足细胞Nephrin表达。
