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  • 恶性肿瘤术后DC联合CIK治疗的临床观察

    作者:高岱清;刘淑贞;赵鹏;徐珞

    目的:研究树突状细胞(DC)和细胞因子活化的杀伤细胞(CIK)联合治疗对各种恶性肿瘤术后预防复发和进一步治疗的临床疗效及不良反应,阐明细胞免疫治疗作为肿瘤术后化疗的替代方案的可行性.方法:15例恶性肿瘤术后患者中,13例经CT检查无肿瘤复发,1例肝脏肿瘤转移,1例肝脏有囊肿.患者采用IL-2 10×105U/d静脉滴入5 d.96 h后采集患者外周血6~8 L,(3~6)×109核细胞.细胞贴壁分离,在含有DC、IL-4、GM-CSF和相应肺癌抗原的无血清培养液培养8 d,经静脉注入(32±15.3)×107DC细胞.未贴壁的悬浮细胞加入含有细胞因子培养液培养,诱导生成CIK细胞,皮下注射,1次/周,共注射3次[(87±35.6)×108 CIK细胞].周期结束后1个月复查,每隔3个月复查1次.结果:经DC+CIK治疗后,15例中有14例无肿瘤复发或病情加重,其中1例出现肿瘤原位复发并病情加重,但15例患者均存活.临床症状显示,13例患者自感临床症状有明显改善.不良反应观察显示,13例出现1~2次发热,体温37.5~40.2℃.结论:DC+CIK治疗有预防肿瘤复发的疗效,且效率高、不良反应小,是一种有效的肿瘤术后预防性治疗方案.

  • DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼对肝癌细胞体内外的杀伤效应

    作者:李卿;王新利;王杨;隋承光

    目的:观察DC、CIK共培养细胞(DC-CIK)联合索拉菲尼(sorafenib)对肝癌细胞BEL-7402的体内外杀伤效应.方法:取健康人外周血单个核细胞,加入不同细胞因子促进DC及CIK细胞成熟并混合共培养.CCK8试剂盒检测DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼对BEL-7402细胞的体外杀伤效应,Annexin V-FITC试剂盒检测两者联合对肝癌细胞凋亡率的影响.用肝癌细胞BEL-7402建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为生理盐水对照组、索拉菲尼组、DC-CIK组、DC-CIK+索拉菲尼组,观察它们对裸鼠移植瘤生长的抑制作用.结果:联合组对肝癌细胞的杀伤率及诱导凋亡率均明显高于各单独治疗组,联合组杀伤率高达(75.24±1.91)%,是DC-CIK组的1.8倍,是索拉菲尼单药组的2.1倍(P<0.01);联合组诱导肝癌细胞凋亡率达(78.32±2.54)%,与单独治疗组相比差异有统计学意义(P<0.05).体内实验表明,DC-CIK+索拉菲尼组可明显抑制裸鼠BEL-7402移植瘤的生长,抑制率为(83.37±0.16)%,与单独治疗组相比差异有显著统计学意义(P<0.01).结论:DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼在体内、外可显著抑制肝癌细胞的生长,分子靶向治疗联合细胞免疫治疗可能成为肝癌综合治疗的方法之一.

  • CIK细胞联合埃克替尼对肺腺癌细胞系的体外抑制效应

    作者:丁艳琦;江蓓蕾;鲍扬漪

    目的 观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)疗法和盐酸埃克替尼(Icotinib)对肺腺癌PC9细胞和A549细胞的体外杀伤效应.方法 以PC9和A549分别为靶细胞,将实验分为4组:CIK细胞单独组、Icotinib单药组、CIK细胞+Icotinib联合组和空白对照组.用噻唑蓝(MTT)法检测Icotinib对两种靶细胞的半数抑制浓度(IC50);细胞计数(CCK8)试剂盒以及细胞凋亡检测(Annexin V-FITC)试剂盒联合流式细胞仪检测CIK细胞和Icotinib分别及联合对PC9细胞和A549细胞的生长抑制和促凋亡作用.结果 ①Icotinib对PC9及A549细胞作用48 h后的IC50值分别为:(0.21±0.03)、(4.79±0.74) μmol/L;②CCK8杀伤和Annexin V-FITC凋亡实验可观察:CIK细胞与Icotinib联合应用对靶细胞的体外杀伤作用均明显高于CIK细胞单独组和Icotinib单药组.靶细胞为PC9细胞时,CIK细胞+Icotinib联合组的杀伤率可达(65.85±1.44)%;靶细胞为A549细胞时,CIK细胞+ Icotinib联合组的杀伤率可达(52.92±1.57)%.结论 CIK细胞疗法联合分子靶向药物在体外可有效抑制肺癌细胞的生长,分子靶向治疗和细胞免疫疗法为临床上肺癌的综合治疗提供可行性.

  • CIK细胞联合表柔比星对肝癌的体内外杀伤作用研究

    作者:隋承光;李卿;蒋涛;王杨;傅立叶

    目的 研究CIK细胞联合表柔比星对肝癌细胞BEL-7402的体内外杀伤效应.方法 取健康人外周血单个核细胞,经IFN-γ、IL-1、IL-2、抗CD3单抗诱导CIK细胞成熟,流式细胞仪检测培养第1、7、14 d的CIK细胞表型.Cell Counting Kit-8试剂盒(CCK-8)检测CIK细胞、表柔比星及两者联合对肝癌细胞BEL-7402的体外杀伤效应.用肝癌细胞BEL-7402建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为生理盐水对照组、CIK治疗组、表柔比星组、CIK联合表柔比星治疗组(联合组),观察它们对裸鼠移植瘤生长的抑制作用.结果 CIK细胞经多种细胞因子诱导培养后,CD_3~+CD_(56)~+细胞比例明显上升,14 d时CD_3~+CD_(56)~+细胞比例达(46.83±2.53)%,与第1天比差异有显著性(P<0.01),细胞量扩增了近1 000倍.联合组对肝癌细胞的杀伤率明显高于各单独治疗组,差异有显著性(P<0.05).体内实验表明,CIK细胞联合表柔比星可明显抑制裸鼠肝癌细胞种植瘤的生长且无明显副作用.结论 细胞因子活化杀伤细胞疗法联合化疗能显著抑制体内外肝癌细胞BEL-7402的生长,为肝癌的生物化疗提供了实验室依据.

  • 索拉菲尼联合细胞因子活化的杀伤细胞对肝癌的杀伤效应研究

    作者:李卿;王新利;隋天博;蒋涛;隋承光

    目的 探讨索拉菲尼联合细胞因子活化的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)对肝癌细胞的体外杀伤效应.方法 取健康人外周血单个核细胞,经IFN-γ、IL-1、IL-2和抗CD_3单抗诱导CIK细胞成熟,流式细胞仪检测培养第1、7、14天的CIK细胞表型.Cell Counting Kit-8试剂盒(CCK-8)检测索拉菲尼、CIK细胞及两者联合对肝癌细胞BEL-7402的体外杀伤效应,并用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测肝癌细胞的凋亡率.结果 CIK细胞经多种细胞因子诱导培养后,CD_3+CD_(56)~+细胞比例明显上升,14d时CD_3~+CD_(56)~+ 细胞比例达(46.83±2.53)%,与第1天比差异有显著性(P<0.01),细胞量扩增了近1 000倍.索拉菲尼和CIK细胞在适当浓度及效靶比联合应用时表现出杀伤活性增强(P<0.01).索拉菲尼联合CIK细胞诱导的肝癌细胞BEL-7402凋亡率达(70.56±2.58)%,明显高于索拉菲尼组(45.38±1.76)%和CIK组(52.18±8.63)%(P<0.05).结论 索拉菲尼与细胞因子活化杀伤细胞疗法联合应用能明显增强对肝癌细胞的体外杀伤效应.

  • DC-CIK细胞协同索拉菲尼对肝癌细胞的杀伤作用

    作者:张丹;何剪太

    目的:观察DC-CIK共培养细胞(DC-CIK)联合索拉菲尼( sorafenib)对肝癌细胞BEL-7402的体外杀伤效应.方法:取健康人外周血单个核细胞,加入不同细胞因子促进DC及CIK细胞成熟后混合共培养.MTT法检测用药后BEL-7402细胞增殖的情况CCK8试剂盒检测DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼对BEL-7402细胞的体外杀伤效应,Annexin V-F ITC试剂盒检测两者联合对肝癌细胞凋亡率的影响.结果:索拉菲尼与DC-CIK细胞联合在一定浓度及效靶比时表现出对肝癌细胞的抑制作用明显增强,其中以索拉菲尼20.8 μmol/L联合DC-CIK效靶比40:1时杀伤率高,达(72.24 4-2.42)%,是DC-CIK组的1.8倍,是索拉菲尼单药组的2.13倍,是CIK 组的1.6倍(P<0.01).索拉菲尼与DC-CIK细胞联合组诱导肝癌细胞凋亡率高,达(77.36±1.92%(P<0.05).结论:DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼在体外可显著抑制肝癌细胞的生长,分子靶向治疗联合细胞免疫治疗可能成为肝癌综合治疗的方法之一.

  • 来那度胺增强细胞因子诱导的杀伤细胞杀伤效应的研究

    作者:胡凯;王艳芳;王晶;克晓燕

    目的 探讨来那度胺调节细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞对淋巴瘤细胞的杀伤效应.方法 取健康志愿者外周血单个核细胞,经过干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、抗CD3单抗诱导CIK细胞增殖,并对培养不同时间CIK细胞用不同浓度来那度胺进行处理.流式细胞术检测CD3+CD56+细胞比例;酶联免疫吸附(ELISA)法检测粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、INF-γ及肿瘤坏死因子α( TNF-α)的分泌水平;用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测来那度胺作用后的CIK细胞及未处理的CIK细胞对3种淋巴瘤细胞株的体外杀伤效应.结果 CIK细胞在多种细胞因子诱导下,CD3+CD56+细胞比例明显增加,0.2 ~ 5.0μmol/L的来那度胺对其扩增分化没有影响(P>0.05).来那度胺作用下CIK细胞分泌GM-CSF、INF-γ、TNF-α水平有显著提高(P<0.05).在1.0 μmol/L来那度胺作用下CIK细胞对淋巴瘤细胞的杀伤效力明显高于未经来那度胺处理的CIK细胞[(42.53 +2.19)%比(15.5±3.82)%;(44.78±4.86)%比(29.94±6.33)%;(54.71±5.31)%比(37.43±9.75)%].结论 在来那度胺作用下,CIK细胞分泌功能和对3种淋巴瘤细胞的杀伤效应均有显著增强.

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