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实验性变应性鼻炎胸腺组织中重组激活基因-1的表达及测序
目的 探讨重组激活基因-1(recombinationactivating gene 1,RAG1)在变应性鼻炎(allergicrhinitis,AR)发病机制中的作用及其糖皮质激素对RAG1表达的影响.方法 建立AR大鼠模型后,记录各组喷嚏平均次数差异及被动皮肤过敏源试验情况,对各组大鼠外周血清IgE水平变化进行观察,检测各组胸腺组织中RAG1的表达水平,并对其DNA序列进行分析.结果 AR组喷嚏平均次数较正常对照组和地塞米松(dexamethasone,DEX)干预组显著增多(P<0.05),并且皮肤过敏源试验阳性率为90%,对照组及DEX干预组全部表现为阴性;AR组IgE水平显著高于正常对照组和DEX干预组(P<0.05);RAG1在3组大鼠胸腺中均见有表达,其逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chainreaction,RT-PCR)半定量结果在正常对照组显著低于鼻炎组和DEX干预组;DNA测序未发现RAG1有突变发生.结论 RAG1的高表达与AR的发病密切相关,胸腺中RAG1基因的DNA序列在AR的发病过程中具有保守性.地塞米松不影响RAG1基因的表达,RAG1是一个较高层面的免疫调节基因.
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重组活化基因1缺陷鼠和正常小鼠急性细菌性鼻窦炎模型的比较研究
目的 探讨C57BL/6J-重组活化基因1(recombinant active gene 1, Rag1)敲除鼠(简称Rag1小鼠)和C57BL/6(C57)小鼠急性细菌性鼻窦炎的自然感染过程及二者之间的差别.方法 Rag1缺乏鼠和C57小鼠各10只,采用鼻孔内接种肺炎链球菌T59,另外4只接种大豆肉汤作对照.分别于接种2 d(各2只)、5 d(各4只)、10 d(各2只)、14 d(各2只)处死动物,对照组于第5天处死.处死前作鼻腔灌洗培养,头颅石蜡包埋,连续切片,Luna染色,计算机辅助光镜观察,计算窦腔内中性粒细胞集落所占窦腔的百分率和每平方毫米窦腔黏膜中浸润的多形核白细胞数.结果接种5 d Rag1小鼠和C57小鼠窦腔感染均达到高峰,窦腔中白细胞集落和黏膜中白细胞数均明显高于对照组(P<0.05),10 d后C57小鼠窦腔感染逐渐减轻,14 d后基本控制,而Rag1小鼠感染持续存在,与C57比较差异有显著性(P<0.05),14 d后鼻灌洗液中仍培养出肺炎链球菌.结论采用肺炎链球菌T59鼻内接种法成功地诱导出Rag1和C57 2种小鼠急性鼻窦炎,肺炎链球菌在C57小鼠鼻腔鼻窦内的感染可被完全、自主、快速控制,但Rag1小鼠则不能完全控制这种感染,并有演变成慢性炎症的倾向,提示T和B淋巴细胞依赖性免疫功能在清除细菌感染中起着关键的作用,基因敲除鼠可作为研究鼻窦炎学病理生理学的工具.
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慢性牙周炎状态下牙龈卟啉单胞菌rag-1基因的表达变化
目的:分析不同牙周炎症状态下牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonal gingivalis,P.gingivalis)rag-1基因mRNA的表达规律.方法:收集150例慢性牙周炎患者的龈下菌斑,PCR法检测P.gingivalis和rag-1基因.对P.gingivalis rag-1基因阳性的菌斑样本,采用RT-PCR法检测rag-1 mRNA的表达水平,并比较不同炎症状态下的表达差异.应用SPSS11.0软件包对数据进行配对t检验和秩相关检验.结果:轻度组、中度组和重度组的rag-1基因mRNA的相对表达水平分别为1.19±0.06、0.46±0.05和2.22±0.10(P<0.05).结论:rag-1基因的mRNA表达水平随着牙周组织破坏程度及炎症状态的不同而改变.
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RAG-1在小鼠胚胎脑发育中的表达
目的:观察小鼠脑组织正常发育期间重组激活基因1(RAG-1)表达的时序变化,并对其进行组织定位.方法:分别取孕11 d、13 d、15 d、17 d、19 d,新生(P0)和成年的小鼠脑组织,提取总RNA,用RT-PCR观察RAG-1表达的时序变化;同时,经冠状切面制作各组脑组织的连续冰冻切片,进行RAG-1免疫组织化学染色.结果:RAG-1自小鼠胚胎11 d开始出现少量表达,以后表达逐渐增加,19 d到达高峰,RT-PCR显示结果与免疫组化结果基本一致.RAG-1蛋白主要表达在发育过程中的杏仁核、下丘脑、丘脑、海马等区域,大脑皮质的表达逐渐出现于室管膜层、中间层、室管膜下层和皮质板层.结论:在小鼠胚胎脑发育期间,RAG-1表达时序和脑发育一致,而且表达高于成年鼠.
