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从中缝背核向内耳的多巴胺能投射
目的 探讨中缝背核至内耳的传出神经通路.方法 选择耳廓反射灵敏,体重2～3 kg没有中耳疾病的健康猫11只,分为实验组(8只)和对照组(3只).经内耳注射逆行示踪剂霍乱毒素亚型B,7 d后处死,脑干连续切片,免疫荧光染色,获得中缝背核区内逆行荧光标记后,将组织分成4组,分别用兔抗-酪氨酸羟化酶、兔抗-5-羟色胺、兔抗-γ-氨基丁酸和兔抗-多巴胺-β-羟化酶对中缝背核区内神经细胞进行免疫荧光标记研究.结果 ①沿着脑桥的尾端(耳蜗核水平)向中脑的嘴侧观察连续切片,可见霍乱毒素亚型B红色荧光标记细胞主要分布在脑干中线周围的背侧区域即中缝背核区域;②将上述组织切片用抗酪氨酸羟化酶、5-羟色胺、γ-氨基丁酸和多巴胺-β-羟化酶 4种荧光抗体进行第2次标记后,发现在中缝背核区域内均分布有上述4种神经元,其中酪氨酸羟化酶标记神经元和经内耳至中缝背核区的逆行标记全部为双标记荧光细胞,5-羟色胺、γ-氨基丁酸和多巴胺-β-羟化酶均为单标记.由此提示,中缝背核向内耳传出投射与酪氨酸羟化酶标记神经元有关.结论 中缝背核和内耳之间存在传出神经联系;这一投射可能主要是多巴胺能投射.
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大鼠传出前庭神经元与传入前庭神经核的神经联系
目的阐明传出前庭神经元与传入前庭神经核的神经联系.方法将辣根过氧化物酶注射到大鼠面神经膝内侧传出前庭神经元区,经过48 h的逆行轴突运输后用组织化学的方法在脑干中显示被标记的神经元.结果在双侧前庭神经内侧核及外侧核中均发现辣根过氧化物酶阳性标记细胞,以注射示踪剂同侧前庭神经内侧核数量多.结论传出前庭神经元与前庭神经核问存在神经联系,本试验的结果提示前庭神经系统中可能存在前庭传入-传出反馈调节机制.
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大鼠颈上交感神经节细胞的急性分离及电生理学特性的鉴定
目的 建立大鼠颈上交感神经节细胞的急性方分离法并鉴定其电生理学特性.方法 SD大鼠,雌雄不拘,5～12d龄,断头后,急性分离大鼠的颈上交感神经节,经酶解消化法获得颈上交感神经节细胞.采用全细胞膜片钳技术,于钳制电位-60 mV下,加入100μmol/L乙酰胆碱,记录乙酰胆碱受体电流.采用碳纤维电极技术,于钳制电位760 mV下,加入65 mmol/LKCl,检测儿茶酚胺类物质分泌活动.结果 分离出表面光滑、遮光性较好的颈上交感神经节细胞,并记录到乙酰胆碱受体电流和儿茶酚胺类物质的分泌.结论 急性分离大鼠颈上交感神经节细胞的方法可获得适于膜片钳实验的细胞.
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实验性不同类型大鼠臂丛根性损伤后脊髓运动神经元存活情况观察
目的研究臂丛神经根性切断伤与根性撕脱伤后脊髓前角运动神经元的存活情况。方法对76只健康成年SD大鼠,按手术先后顺序分成臂丛神经根性切断伤组和根性撕脱伤组,两组按术后9个不同的时间组取材,每组4只大鼠,共72只大鼠。另外4只为正常对照组。取出脊髓标本后,观察颈髓前角运动神经元数目的变化。结果臂丛神经根性切断伤后,各时间组的脊髓前角运动神经元数目和术前无明显变化;而根性撕脱伤组于术后1周其神经元数目开始减少,术后2周时神经元数目比正常对照组减少30 %,术后6周时减少70 %。撕脱伤组与切断伤组相比,损伤1周后,各时间组的差异均有显著性意义(χ2 = 3.922 ～ 17.21, P < 0.01)。结论臂丛神经根性切断伤其脊髓运动神经元和术前比无明显变化,而臂丛神经根性撕脱伤后其脊髓运动神经元有死亡,死亡速度快,死亡程度高。
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儿茶素对SD大鼠卡那霉素耳神经毒性保护作用的形态学研究
目的:动态观察卡那霉素(kanamycin,KM)中毒及应用儿茶素(catechin,CC)后耳蜗传出神经元及毛细胞的形态学改变,探讨氨基糖甙类抗生素(aminoglycoside antibiotics, AmAn)耳毒性中儿茶素对耳蜗传出神经元和毛细胞的保护作用.方法:将38只SD雄性大鼠随机分成4组:①卡那霉素组(KM组)10只,500 mg*(kg*d)-1,②儿茶素灌胃组(CC组)10只,800 mg*(kg*d)-1,③KM+CC组(KC组-儿茶素保护组)10只,④生理盐水对照组10只.电镜动态观察耳蜗传出神经纤维末梢及毛细胞亚细胞结构的改变及采用全耳蜗铺片改良的乙酰胆碱酯酶染色法观察耳蜗传出神经纤维及末梢的数量.结果:电镜显示儿茶素保护组传出神经元及毛细胞损伤较未保护组明显减轻,儿茶素组和生理盐水组无损伤表现.乙酰胆碱酯酶组化染色示KM组耳蜗传出神经数量较KC组及其他对照组明显减少(P<0.05), 儿茶素保护组与儿茶素组及正常对照组比较无明显差异(P>0.05).结论:儿茶素对氨基糖甙类抗生素耳蜗神经元毒性具有保护作用.
