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Caveolin-1对喉鳞状细胞癌抑制作用的体内外研究
目的 探讨caveolin-1对喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞生长的影响.方法 通过脂质体法转染喉鳞癌细胞株Hep-2细胞,筛选出稳定高表达caveolin-1的克隆,并用实时定量逆转录-聚合酶链反应和免疫印迹法鉴定;用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞的体外增殖能力;免疫印迹法检测细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、磷酸化EGFR、细胞外信号调节激酶1、2(extracellular signal-regulated kinase,Erk1、2)、磷酸化Erk1、2,caveolin-1蛋白的表达;免疫共沉淀法检测caveolin-1和EGFR的结合情况;转染后的细胞接种至裸鼠皮下,观察肿瘤的生长情况,裸鼠移植瘤中caveolin-1、磷酸化EGFR、磷酸化Erk1、2的蛋白表达用免疫组织化学法检测.结果 成功筛选到稳定高表达caveolin-1的克隆;与对照组相比,转染后的细胞体外增殖能力明显减弱;细胞接种到裸鼠皮下,未转染组和转染空载组中裸鼠均形成肿瘤(100%,4/4),稳定转染caveolin-1的Hep-2-CAV1-2组中裸鼠未形成实体肿瘤(0%,0/4),Hep-2-CAV1-3组中4只裸鼠中只有3只形成肿瘤(75%,3/4),但肿瘤生长缓慢,终生成肿瘤的重量与未转染组相比明显减小(t=3.05,P＜0.05);免疫共沉淀显示caveolin-1与EGFR在Hep-2细胞中是结合的;免疫印迹法和免疫组织化学法发现转染caveolin-1后细胞中EGFR和Erk1、2的磷酸化水平降低.结论 caveolin-1能够抑制喉鳞状细胞癌细胞株Hep-2的生长,抑制EGFR-MAPK信号通路可能与其抑癌作用相关.
