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腺样囊性癌细胞凋亡抗原负载的树突状细胞诱导抗肿瘤效应的体外研究
目的 探讨负载腮腺腺样囊性癌细胞凋亡肿瘤抗原的树突状细胞,诱导淋巴细胞介导的免疫反应,观察其体外杀伤腺样囊性癌细胞的细胞毒性效应.方法 外周血单核细胞,在粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor GM-CSF) +白细胞介素-4(Interleukin-4 IL-4)的诱导下体外培养,用凋亡肿瘤细胞抗原冲击后,流式细胞仪检测树突状细胞抗原负载前后CD1a、CD83表达量的变化.采用MTT比色法检测同种混合淋巴细胞反应和诱导细胞毒性T细胞(Cytotoxic T lymphocyte CTL)反应.结果 凋亡肿瘤抗原刺激后,CD83 表达急剧增加(P＜0. 01),而CD1a表达量下调(P＜0.01).负荷凋亡肿瘤抗原树突状细胞体外诱导出明显的细胞毒性反应,并刺激同种T淋巴细胞增殖.结论 GM-CSF + IL-4 诱导的单核细胞来源的树突状细胞 ,能在体外摄取凋亡肿瘤抗原而进一步成熟,通过激活淋巴细胞杀伤癌细胞.
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负载凋亡肿瘤细胞的树突状细胞对喉癌细胞的杀伤作用
目的 探讨凋亡肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞(DC)对喉癌细胞杀伤作用的影响.方法 用细胞因子重组人白细胞介素4(rhIL-4)、重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)与肿瘤坏死因子α(rhTNF-α)体外诱导扩增人外周血单个核来源的DC,6d后将DC分为凋亡组、冻融组和未处理组;各组细胞继续培养4h后,分别采用流式细胞术检测DC表面分子的表达、ELISA法检测干扰素γ(IFN-γ)的水平、MTF法评估各组DC刺激细胞毒性T淋巴细胞(CTL)增殖的能力及诱导CTL的杀伤活性.结果 与其余各组相比,凋亡组DC表面分子与IFN-y的表达明显增加(P＜0.05),CTL的增殖能力与杀伤活性增强(P＜0.05).结论 凋亡肿瘤细胞可以促进DC的分化与成熟,并能使DC产生高效而特异性的抗喉癌免疫应答.
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吞噬凋亡肿瘤细胞的树突细胞疫苗抗肿瘤效果观察
目的:研究吞噬凋亡肿瘤细胞的树突细胞疫苗的抗肿瘤效果,以确定一种有效的树突细胞疫苗.方法:由黑色素瘤细胞(BLb-10)生成凋亡细胞,树突细胞(DC)与凋亡肿瘤细胞培育后,收集和提纯吞噬凋亡肿瘤细胞的树突细胞,再对其表型变化及抗肿瘤效果进行检测,并与加肿瘤细胞肽(mTRP2)的树突细胞的结果比较.结果:吞噬凋亡肿瘤细胞后,DC更加成熟.表现出促炎症细胞因子(IL-1,IL-6,TNF-α,IFN-γ和GM-CSF),趋化因子(MIP-1,MIP-1和MIP-2),细胞表面分子(MHC-Ⅱ,CD11b CD40和CD86)以及某些趋化因子受体(CCR7)表达增加而某些趋化因子受体(CCR2和CCR5)表达减少.吞噬了凋亡黑色素瘤细胞的树突细胞疫苗能(i)更强地刺激体外T细胞增生,(ii)诱导体内Th1型免疫反应而导致更有效的肿瘤特导细胞毒CD8+细胞介导的免疫,和(iii)防止了免疫鼠肺肿瘤转移,而加肿瘤细胞肽的树突细胞疫苗只能减少免疫鼠的肺肿瘤转移.结论:吞噬凋亡黑色素瘤细胞的树突细胞疫苗为癌细胞疫苗研究提供了新的途径.
