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  • 骨唾蛋白及骨桥素在修复性牙本质形成中免疫组化定位的实验

    作者:张旗;樊明文;边专;陈智;朱奇

    骨唾蛋白(bone sialoprotein, BSP)和骨桥素(osteopontin, OPN)是矿化组织中重要的非胶原蛋白,两者都属于唾蛋白,有许多相似的物理化学性质,分别在矿化起始及成熟中发挥作用.我们通过免疫组化的方法,短期动态观察了BSP和OPN在修复性牙本质形成中时间、空间上的表达,以期进一步了解这两种蛋白在修复性牙本质形成中的作用.

  • 鼠矿化组织中非胶原蛋白的提取和层析分离

    作者:聂敏;边专;樊明文;王茜;Marie-Louise Olesson;Mikael Wendel

    目的:提取小鼠矿化组织中的基质蛋白,用离子交换层析法分离非胶原蛋白,并进行初步分析.方法:取新生小鼠的颅盖骨和成年鼠的股骨,用盐酸胍和EDTA提取基质蛋白,采用Mono Q HR 离子交换柱层析,4%-16% SDS-PAGE梯度胶电泳,Stains-All染色结合银染鉴定蛋白质,抗骨唾蛋白(bone sialoprotein,BSP)抗体,抗骨桥素(osteopontin,OPN)抗体进行免疫印迹.结果:用Mono Q HR 离子交换柱能够有效地分离出矿化组织的非胶原蛋白,Stains-All硝酸银染色和免疫印迹显示出不同组份的蛋白质提取分析情况.结论:对矿化组织中的非胶原蛋白的初步提取、分离可以采用Mono Q HR 离子交换柱层析,采用银染结合Stains-All染色、免疫印迹检测和鉴定各种非胶原蛋白.

  • 牙周韧带细胞体外矿化的研究——骨唾蛋白与骨桥素在矿化过程中的表达

    作者:王燕;汪说之;樊明文;李纾

    目的:研究骨唾蛋白与骨桥素在体外培养的人牙周韧带细胞矿化过程中的表达.方法:体外培养的人牙周韧带细胞,经地塞米松矿化液诱导,分别于不同的时间在相差显微镜下观察其矿化结节的形成,采用免疫细胞化学的方法观察骨唾蛋白与骨桥素的表达情况.结果:矿化培养1周细胞呈复层生长,骨桥素呈阳性染色;两周细胞密集呈结节状,骨唾蛋白与骨桥素均为阳性,胞浆染成黄褐色;3周出现矿化结节,矿化以后骨唾蛋白与骨桥素保持稳定表达.结论:牙周韧带细胞在适当的条件下可以向成骨细胞表型分化,表达矿化相关蛋白,形成矿化结节.

  • 骨唾蛋白和骨连接蛋白在正常年轻恒牙及龋患牙中分布的研究

    作者:张旗;樊明文;边专;李俊;黄欣

    目的:旨在研究骨唾蛋白(bone sialoprotein, BSP)和骨连接蛋白(osteonectin, ON)在正常年轻恒牙和龋患牙中的表达,以了解这两种蛋白在牙本质形成过程中的作用.方法:制备5μm厚连续切片,用于BSP和ON的免疫组化定位研究,并通过图像分析,将这两种蛋白在牙髓中央和牙髓周围组织的表达强度进行比较.结果:BSP和ON均在正常恒牙的成牙本质细胞及前期牙本质中表达,且在牙髓中央和牙髓周围组织的表达强度有显著性差异,在龋患牙中BSP牙髓外层着色依然显著高于中央区,且BSP抗体在第2、3期牙本质交界处呈强阳性反应.ON则在龋患牙中普遍表达,在第3期牙本质中表达不明显.结论:BSP和ON可能参与第2期牙本质的形成.第3期牙本质形成可能与BSP有关,与ON无关.

  • 矿化相关蛋白在牙周组织中的分布及意义

    作者:王燕;杨丕山;汪说之

    目的:研究矿化相关蛋白在牙周组织中的分布并探讨其意义.方法:取正常成年杂种狗第二磨牙及其牙周组织,利用免疫组化SP法对矿化相关蛋白在牙周组织中的表达进行定位研究.结果:骨桥素OPN在牙周韧带基质及细胞中表达阳性,牙龈结缔组织中表达弱阳性,牙槽骨中邻近牙周韧带的部位表达阳性,其余部位及牙骨质中表达阴性;骨钙素OC在牙周韧带中表达阳性,牙龈结缔组织中表达弱阳性,牙槽骨中染色较弱且不均匀,牙骨质中表达阴性;骨唾蛋白BSP在牙周韧带中表达阳性,牙槽骨中染色集中在哈佛氏管周围,牙骨质和牙龈表达阴性.结论:矿化相关蛋白在牙周韧带基质及细胞中阳性表达,提示牙周韧带细胞在矿化组织的形成与再生中具有重要作用;矿化相关蛋白在牙周韧带细胞和牙龈成纤维细胞中的不同表达可作为鉴别牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞的标志.

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