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孕妇及新生儿成骨细胞功能状况40例临床分析
骨钙蛋白是仅有成骨细胞分泌的一种非胶原蛋白,是骨组织中含量多的蛋白质之一[1].它主要沉积在骨组织的间质细胞外,小部分可释放入血,可从外周血检测.目前认为,检测外周血骨钙蛋白水平,能准确反映成骨细胞的功能状况.孕妇及其新生儿的骨代谢状况一直是人们关注的问题.选择合适的指标反映孕妇及其新生儿成骨细胞功能,对保障孕妇及其新生儿的骨健康具有重要意义.本研究以骨钙蛋白为检测指标,对40例孕妇及其新生儿进行了测定,现报告如下.
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甲亢患者血清BGP水平变化
骨钙素(BGP)是由成骨细胞产生和分泌的一种非胶原蛋白,具有骨代谢调节激素的作用,对骨生长代谢有重要意义.甲状腺机能亢进症(甲亢)的典型表现为高代谢征候群,常伴有骨代谢异常.作者观察了甲亢患者治疗前、后血清BGP水平及甲状腺功能的相互关系.
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Podocan在牛骨骼肌卫星细胞中的作用及调控
目的::细胞外基质( ECM)在细胞发育,组织修复,调控细胞增殖、分化、粘附和迁移方面具有十分重要的作用。小的富含亮氨酸的重复蛋白( SLRP )家族属于细胞外基质中的一类重要的非胶原蛋白。Podocan,是一个大约由600个氨基酸组成的分泌蛋白,属于SLRP家族中的第五亚类蛋白。 Podocan在肾脏、心脏、肝脏、胰腺和血管的平滑肌细胞中均有表达,其对平滑肌细胞的迁移和增殖具有负调控作用,可以调节内膜的增生。本实验室在前期研究工作中通过对牛骨胳肌卫星细胞增殖分化过程的高通量测序结果表明, Podocan在牛骨胳肌卫星细胞中具有一定的表达,随着卫星细胞的分化,其表达量呈显著增加,推测其能够参与牛骨胳肌卫星细胞的分化,与牛肌肉的发育和成熟具有密切关系。方法:本研究以体外培养的牛骨胳肌卫星细胞为实验材料,以2%马血清分别诱导细胞分化2 d、3 d、4 d和5 d。收集细胞,采用荧光定量RT-PCR和Western Blot的方法分别检测不同分化程度的牛骨胳肌卫星细胞中Podocan mRNA和蛋白的表达水平。通过免疫荧光染色的方法检测Podocan在细胞中的表达定位。此外,本研究构建Podocan的过表达载体以及shRNA干扰和CRISPR干扰载体,以脂质体2000的方法转染骨骼肌卫星细胞,分别实现Podocan的过表达和抑制,以荧光定量RT-PCR和Western Blot的方法检测Podocan的过表达和抑制效果,同时检测骨骼肌卫星细胞分化的标志基因MyoG ( Myogenin )和MyHC ( Myosin Heavy Chian )的mRNA和蛋白表达水平变化。结果:随着牛骨骼肌卫星细胞分化的进行,Podocan的mRNA和蛋白表达量显著增加,免疫荧光定位结果显示其主要分布在成熟的在肌管的细胞中,而未分化的细胞其表达量较低。 Podocan的过表达和抑制载体能够显著增加或抑制其在牛骨骼肌卫星细胞中的表达量,且MyoG和MyHC mRNA和蛋白表达水平的检测结果显示,Podocan的表达增加和抑制能够促进或减少骨骼肌卫星细胞分化的程度。结论:Podocan在牛骨骼肌卫星细胞的分化过程中具有重要的调控作用,其促进肌肉分化的分子机制深入探索能够为肌肉生长发育机理的研究及提高肌肉产量的肉牛生产提供帮助。
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病毒性心肌炎心肌组织中骨桥蛋白表达的研究
病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是常见的心血管疾病之一,近年来发病呈上升趋势.研究表明大量的单个核细胞(T、NK、MΦ等)在局部浸润及其造成的后续免疫损伤在VMC的发病中占有重要的地位[1].骨桥蛋白(OPN)是一种基质功能性非胶原蛋白.已证实OPN在炎症浸润、细胞免疫、组织修复、血管重塑、细胞凋亡等方面扮演着重要角色[2-4].为此,我们以柯萨奇病毒B3(CVB,)感染BALB/c小鼠制作VMC模型,通过实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析CVB3感染后0、4、7、9、14和21 d OPN的表达水平,分析其表达与炎症细胞浸润的关系,为VMC发病机制的研究提供依据.
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龈沟液中骨钙素含量与牙周炎的关系
多年来,人们一直在寻找对牙周疾病状况进行更有效更准确判断的标志.骨钙素是矿化组织中丰富的非胶原蛋白,一些研究结果表明骨钙素水平反映骨组织的转换,是代表骨代谢瞬间变化的一个灵敏的、特异的生化指标.牙槽骨病变是牙周炎的重要特征之一,特定位点龈沟液骨钙素的水平可能反映局部牙槽骨的变化.我们采用放射免疫分析法检测龈沟液中骨钙素的含量,以期发现它与牙周炎及牙槽骨病理变化的联系,并对不同类型牙周炎患者龈沟液中骨钙素的含量进行比较.
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骨唾蛋白及骨桥素在修复性牙本质形成中免疫组化定位的实验
骨唾蛋白(bone sialoprotein, BSP)和骨桥素(osteopontin, OPN)是矿化组织中重要的非胶原蛋白,两者都属于唾蛋白,有许多相似的物理化学性质,分别在矿化起始及成熟中发挥作用.我们通过免疫组化的方法,短期动态观察了BSP和OPN在修复性牙本质形成中时间、空间上的表达,以期进一步了解这两种蛋白在修复性牙本质形成中的作用.
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早期根龋再矿化调节的研究进展
早期根龋的再矿化具有较为复杂的机制,多种体内、体外相关因素参与了其中调控.本文对根龋基质中非胶原蛋白、胶原蛋白、残余矿物质、牙骨质结构以及体外因素氟等影响早期根龋再矿化研究进展,作一综述.
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骨钙素及运动对其水平的影响
骨钙素(osteocalcin)又称ν—羧基谷氨酸蛋白(bone ν—carboxyglutamic acid-containing protein,BGP)或骨依赖维生素K蛋白(bone vitamin K dependent protein)。它首先由Hauschka从鸡骨(1975年)、Price从小牛骨(1976年)中分离提取,并鉴定了该物质的化学结构,取名为骨钙素。本文仅就骨钙素的一般研究新进展及运动对其水平的影响作一综述。1 骨钙素的生物化学性质 骨钙素是由活跃的成熟成骨细胞所分泌的一种非胶原蛋白[1],是成骨细胞分化的后表型的标志[2,3]。它由49个氨基酸组成,其分子量为5.6kda-6.5kda[4,5],含有3个ν-羧基谷氨酸片段(分别在17,21,和24位上),是一种钙结合氨基酸[6]。3种基因编码骨钙素,其中骨钙素基因1(OG1)和骨钙素基因2(OG2)仅由成骨细胞所表达,骨钙素相关基因(ORG)在肾中被表达[7]。新合成的骨钙素必须依赖维生素K的翻译后修饰,引起特异谷氨酸片段的ν-羧基化,才具有生物活性,在人类仅仅在片段17位上被羧基化[8]。骨钙素结构有两个主要特征:(1)“谷氨酸螺旋”,一种紧密的Ca2+-依赖α-螺旋构像,很方便地吸附到羟磷灰石上;(2)C端β-折叠,与细胞受体及细胞外蛋白具有潜在的联系[9]。
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实验性氟暴露对成骨细胞成骨功能表达的影响
我国不仅地方性氟病流行区域广,患者多,工业氟暴露对工人健康的影响也较明显.过量的氟摄入可引起全身骨及其他组织损害[1].其异常改变与氟中毒导致骨形成及骨矿化异常有关,但其机制尚不清楚.我们拟通过离体SD大鼠成骨细胞培养,研究过量氟对成骨细胞成骨活性的影响,从而在细胞学水平了解氟骨症的机制.碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)是成熟成骨细胞合成和分泌的两种主要的非胶原蛋白,代表成骨细胞活性状态,是检测骨形成的指标.因此,我们通过成骨细胞ALP活力及细胞培养液中OC水平测定,了解氟过量对骨形成过程的影响.
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血清软骨寡聚基质蛋白检测对类风湿关节炎软骨损伤价值的研究
本研究的软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)是新近发现的软骨代谢标志物[1],它是一种细胞外基质,属于凝血栓蛋白家族(TSP),其作为软骨非胶原蛋白的主要成分,与关节软骨关系密切,是一种能反映骨与软骨破坏的敏感的血清学标记.国内相关研究较少.本研究分析COMP血清水平与RA的疾病活动度、骨损伤等临床指标的相关性,从而探讨COMP与RA的临床表现及预后的关系,为指导临床工作及预测RA预后提供依据.
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骨钙素单克隆抗体的制备及其ELISA方法的建立
骨钙素(Osteocalcin)又称γ-羧基谷氨酸蛋白(bone γ-carboxyglutamic acid protein,BGP),是一种钙离子结合蛋白,是骨基质中主要的非胶原蛋白,分子量约5210~5889Da,循环骨钙素水平的变化与骨的更新密切相关,可作为骨代谢的特异性标志[1].
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骨质疏松症患者血清骨钙素与血脂的相关性分析
骨钙素(Osteocalcin)是由成骨细胞合成与分泌的一种特异性非胶原蛋白,血清中骨钙素水平是骨转换和骨形成的特殊标志,对骨质疏松具有诊断意义.
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骨肉瘤分类和分子生物学研究进展
骨肉瘤是严重危害儿童和青少年健康骨原发常见的恶性肿瘤.自从分类化疗(systematic chemotherapy)应用于骨肉瘤,骨肉瘤病人预后大大提高以来,人们对骨肉瘤的分类和生物学产生了浓厚兴趣.
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软骨来源的纤连蛋白
纤连蛋白(Fibronectin,FN)是一种多功能的非胶原蛋白,属于细胞粘附分子家族中一些整合蛋白的配体.FN具有粘附功能,可调节细胞的增殖和分化,影响细胞的形态,维持器官的整体,并与胚胎发育及多种疾病相关[1].
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骨唾液酸蛋白与前列腺癌骨转移研究进展
骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)是一种酸性磷酸化糖蛋白,属于骨组织的非胶原蛋白,参与骨细胞外基质和骨质代谢,血清BSP浓度可反映破骨细胞活性和骨吸收现象.自1994年首次在乳腺癌细胞中发现BSP表达后,BSP就引起癌症研究者注意,随后在其他易发生骨转移的癌细胞中也确定有BSP的表达,而从BSP的组织局限性特征来分析,它在癌细胞中的表达与肿瘤的骨转移有关.本文简要综述BSP表达调控及其与前列腺癌骨转移的研究进展.
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鼠矿化组织中非胶原蛋白的提取和层析分离
目的:提取小鼠矿化组织中的基质蛋白,用离子交换层析法分离非胶原蛋白,并进行初步分析.方法:取新生小鼠的颅盖骨和成年鼠的股骨,用盐酸胍和EDTA提取基质蛋白,采用Mono Q HR 离子交换柱层析,4%-16% SDS-PAGE梯度胶电泳,Stains-All染色结合银染鉴定蛋白质,抗骨唾蛋白(bone sialoprotein,BSP)抗体,抗骨桥素(osteopontin,OPN)抗体进行免疫印迹.结果:用Mono Q HR 离子交换柱能够有效地分离出矿化组织的非胶原蛋白,Stains-All硝酸银染色和免疫印迹显示出不同组份的蛋白质提取分析情况.结论:对矿化组织中的非胶原蛋白的初步提取、分离可以采用Mono Q HR 离子交换柱层析,采用银染结合Stains-All染色、免疫印迹检测和鉴定各种非胶原蛋白.
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牙本质陶瓷粉、TGF-β、NCPs及复合材料直接盖髓后对牙髓细胞的促进作用
目的:观察牙本质陶瓷粉(ceramic dentin powder,CDP)、复合转化生长因子(transforming growth factors-TGF-β1);复合非胶原蛋白(noncollagenous proteins,NCPs)及全复合后对修复性牙本质形成的作用.方法:用SD大鼠牙作直接盖髓实验,并用组织学方法评价每组材料对修复性牙本质形成的效果.结果:各组材料在不同时间对修复性牙本质促进作用不同,实验组的作用明显优于对照组,实验组之间未见明显差异.结论:TGF-β1、NCPs对大鼠牙髓组织修复有明显的促进作用.
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骨钙素与牙槽骨变化
骨钙素(osteocalin)也叫γ-羧基谷氨酸蛋白,是代表骨代谢瞬间变化的一种灵敏、特异、准确而简便的生化指标.血清骨钙素放射性免疫方法测定已广泛用于骨病、骨代谢疾病和内分泌疾病的临床诊断、预后观察及基础研究中,并具有重要意义.近年来骨钙素亦被引入到口腔医学研究领域,用来反映牙槽骨的变化.本文就骨钙素的结构、生理功能及其与牙槽骨吸收和牙槽骨形成的关系作一综述.1 骨钙素的结构和生理功能骨钙素主要存在于骨组织和牙本质中,约占骨总蛋白含量的1~2%.它是矿化组织中含量为丰富的非胶原蛋白,分子量为5800道尔顿,由49个氨基酸组成,其中有三个(17、21和24位)是依赖于维生素K的γ-羧基谷氨酸,这是骨钙素特异地与羟磷灰石结合并发生骨沉积的基础.骨钙素由成骨细胞合成和分泌,约50%沉积于骨基质,50%进入血循环[1,2].虽然骨钙素在骨代谢中确切的生理功能尚不清楚,但一般认为其主要作用是维持骨的正常矿化速率,抑制异常羟基磷灰石的形成,抑制生长软骨的矿化速度[3].在骨代谢过程中,当骨吸收和骨形成相偶联时,骨钙素为骨转换的标志;当两者失偶联时,骨钙素为骨形成的一项特异性指标[4].因此有学者认为,伴有骨转换或骨形成增加者,血清骨钙素水平升高;不伴骨代谢改变者,血清骨钙素在正常范围;骨转换和骨形成低下者,血清骨钙素含量降低[5].近来也有研究表明骨钙素可以激活前破骨细胞,而且在维生素D3的作用下形成能抑制成骨细胞胶原合成的浓度,加速诱导骨吸收细胞的分化[6],促进骨吸收[7].
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不同诱导条件对人牙囊细胞合成非胶原蛋白的影响
目的探讨釉基质蛋白(enamelmatrix proteins,EMPs)、骨形成蛋白-2(bone morphogenetic pgotein-2,BMP-2)作用下对牙囊细胞合成非胶原蛋白的影响.方法酶消化联合组织块法获得人牙囊细胞,用100 mg/L的EMPs、100μg/L的BMP-2对人牙囊细胞进行诱导,显微镜下逐日观察细胞形态变化,并在3 d、7d两个不同时间点利用免疫组化方法和图像分析技术检测和分析细胞骨涎蛋白、骨桥蛋白表达的变化.结果100 mg/L的EMPs、100μg/L的BMp-2对牙囊细胞均具有上调骨涎蛋白、骨桥蛋白的作用,呈时间依赖性.结论EMPs、BMP-2可使牙囊细胞表型向成骨、成牙骨质样细胞分化.
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纤维内仿生矿化机制研究进展
天然骨组织是人体高度矿化的硬组织,主要由有机质(Ⅰ型胶原及非胶原蛋白)和纳米羟基磷灰石无机矿物以7级分级有序排列的方式相互作用而形成.纤维内矿化胶原是骨组织的基本结构单元,并成为其优异的机械学性能和生物学性能的纳米结构基础.因此,如何模拟骨组织的纤维内矿化模式并探明其形成机理是仿生矿化领域研究的热点问题.本文阐述近年来纤维内仿生矿化研究方面的进展,并就目前主流的纤维内仿生矿化机制进行分析,以期为高活性的人工骨再生修复材料的构建提供理论依据,为对生物矿化本质的揭示提供线索.