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龙血竭栓的制备和质量标准研究
目的:制备龙血竭栓并建立其质量标准.方法:采用薄层色谱法对栓剂中的龙血竭进行鉴别,采用紫外分光光度法对栓剂中的龙血竭进行鉴别.采用高效液相色谱法测定栓剂中的龙血素B的含量.结果:龙血素B的平均回收率为97.18%,RSD为0.92%,在13.536μg/ml～31.584μg/ml之间线性关系良好,y=34235x + 19154,R=0.9999.结论:该方法重现性好,专属性强,可控制龙血竭栓的质量.
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龙血素对肝星状细胞的影响
目的:观察龙血素A/B对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖及各种物质表达的影响.方法:将HSC分为3组:空白对照组、细胞对照组、药物干预组.用MTT法观察龙血素A/B对HSC-T6增殖的影响,并检测细胞上清中透明质酸酶(hyaluronidase,HA)、层粘连蛋白(hyaluronidase,LN)、Ⅳ型胶原(collegen type Ⅳ,Ⅳ-C)的含量.采用Real time-PCR检测HSC经龙血素A/B处理前后血管内皮生长因子(blood vessel endothelium,VEGF165)和低氧诱导因子(histoplasma tissue inhibitory factor,HIF-1)mRNA表达的影响.结果:HSC的抑制率均随龙血素A/B的浓度增高而增高,且龙血素A的IC50约为0.3 μg/μL,龙血素B的IC50约为0.1μg/μL;与正常对照组相比,药物干预组的HA、LN、Ⅳ-C含量降低(31.10±4.32 vs 43.05±4.96,441.28±25.38 vs302.98±29.59,17.96±3.00 vs 25,23±4.96,均P＜0.05); VEGF和HIF-1 2-△△ct值明显降低,且龙血素B组较龙血素A明显.结论:龙血素A/B均可抑制HSC的增值,龙血素A抑制较龙血素B明显;其还可下调HSC中HA、LN、Ⅳ-C及VEGF165和HIF-1 mRNA的表达,龙血素B较龙血素A下调效果明显.
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龙血素B对实验性肝纤维化的干预作用及机制研究
肝纤维化是各种慢性肝病发展至肝硬化过程中关键的一环~([1]).而在亚洲特别是在我国,因肝炎病毒和(或)化学损伤,特别是酗酒导致肝细胞损伤引起的慢性肝病十分常见~([2]),目前认为肝硬化是不可逆的,肝纤维化尚存在可逆性~([3-4]).本实验通过构建大鼠实验性肝纤维化模型,探讨龙血竭主要有效成分龙血素B对肝纤维化干预的作用及可能机制.
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HPLC法测定颈痛舒贴膏中人参皂苷Rg1、Rb1以及龙血素A、B的含量
目的:建立HPLC法测定颈痛舒贴膏中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、龙血素A、龙血素B的含量.方法:采用Diamonsil C18柱(200 mm× 4.6 mm,5μm),以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为203 nm,流速为1.0mL/min,柱温为30℃测量人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量;采用Diamonsil C18(150 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-1％冰醋酸(34∶66),体积流量为1.2 mL/min,柱温为40℃,检测波长为280 nm测量龙血素A、龙血素B的含量.结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、龙血素A、龙血素B线性范围分别为0.286～1.43、0.097～0.485、0.019 52～0.146 4、0.015 04～0.112 8μg;平均回收率分别为98.62％、96.72％、99.95％、96.53％,RSD分别为1.74％、1.88％、1.09％、0.776％.结论:建立的方法简便、重复性好,可用于颈痛舒贴膏中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、龙血素A、龙血素B的含量测定.
