首页 > 文献资料
-
有机离子转运体mRNA在人牙龈成纤维细胞上的表达
目的:检测有机阳离子转运家族及有机阴离子转运家族在人牙龈成纤维细胞的表达,并探讨其在人牙龈成纤维细胞主动转运中的作用.方法:采用RT-PCR法检测有机阳离子转运体家族成员OCT1-3,OCT6,OCTN1-2及有机阴离子转运体家族成员OAT1-4的mRNA在人牙龈成纤维细胞上的表达,其中检测OAT1-4时以人肾组织作阳性对照.结果:人牙龈成纤维细胞有OCT1、OCT2、OCTN1及OAT1-4mRNA的表达.结论:证实了人牙龈成纤维细胞存在有机阳离子转运体及有机阴离子转运体的推测.
-
内毒素脂多糖对药物转运体的影响研究进展
内毒素脂多糖是革兰阴性菌死亡解体后释放的致病因子,严重威胁人类健康.膜转运体与药物/毒物的药动学性质、体内的安全有效具有密切关系,而肠道、肝脏、肾脏及脑组织是体内转运体表达的主要场所.近年来研究发现,内毒素脂多糖会引起转运体的表达及功能的变化,进而引起药物/毒性物质在相关组织暴露变化,甚至引起肠道屏障损伤、肝肾毒性及中枢系统疾病的发生.因此研究内毒素脂多糖对药物转运体的影响具有极其重要的意义.本文针对内毒素脂多糖对药物转运体的影响展开调研,并对其对肠道、肝脏、肾脏及脑等器官转运体表达及功能的影响研究进展进行文献综述.
-
有机阴离子转运体研究的新进展
有机阴离子转运体(organic anion transporter,OAT)亚家族是溶质转运体22 (solute carrier 22,SLC22)家族中的重要组成部分,在包括肝脏、肾脏、脑及胎盘等在内的多种组织脏器中表达.因其能够介导许多常见药物(抗生素、抗病毒药、利尿药和非甾体类抗炎药)、毒素以及营养物质在机体内的排泄而受到了广泛的关注.近年来,在Oat1和Oat3基因敲除鼠的代谢组学和微阵列数据以及系统生物学的研究表明,OAT通路在处理肠道微生物代谢和肾脏疾病状态下发挥着非常重要的作用.核受体和其他转录因子会与Ⅰ相和Ⅱ相药物代谢酶结合并调节特定OATs的表达.“远端遥感和信号通路假说”表明,OATs能在许多组织中表达并且转运多种信号分子.一些OATs对于特定的信号分子,如环核苷酸、尿酸和前列腺素等还具有高度的选择性,因此可以有效的介导多种器官、组织及细胞间的信息交流.OATs在正常情况及急慢性病理条件下,在内外源物的转运中起到重要作用.
关键词： 有机阴离子转运体 信号通路 远端遥感和信号通路假说 -
有机阴离子转运体1和3在不同药性中药成分跨膜转运中的作用
目的 研究有机阴离子转运体1和3(OAT1、OAT3)在不同药性(苦、辛、酸、甘)中药成分的跨膜转运过程中的作用.方法 建立OAT1、OAT3过表达单克隆细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3),通过100 μmol·L-1不同药性成分对OAT1、OAT3介导放射性标记探针底物转运活性的影响,预测各药性成分对OAT1、OAT3的抑制作用;测定不同药性成分对OAT1、OAT3的抑制作用的半数抑制浓度(IC50);测定OAT1、OAT3过表达细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3)和空白对照(MDCK-Mock、S2-Mock)对不同药性中药成分的摄取情况,判断各药性成分是否为OAT1、OAT3的底物,从而预测OAT1、OAT3在不同药性成分跨膜转运中的作用.结果 100 μmol·L-1的辛味药和酸味药对OAT1和OAT3有较强的抑制作用,其中川陈皮素、没食子酸、原儿茶酸和β-甘草次酸对OAT1抑制作用的IC50分别是1.86,2.88,4.58和10.43 μmol·L-1;欧前胡素、没食子酸、原儿茶酸和β-甘草次酸对OAT3抑制作用的IC50分别是3.15,3.39,3.69和3.93 μmol·L-.与空白对照相比,OAT1转运体细胞对延胡索乙素、川陈皮素、欧前胡素和异欧前胡素具有较强的摄取能力;OAT3对延胡索乙素、原阿片碱、川陈皮素、欧前胡素和异欧前胡素具有较强的摄取能力.结论 多数辛味药为OAT1、OAT3的转运底物,因此OAT1、OAT3对多数辛味药具有较强的摄取能力;而多数的酸味药为OAT1、OAT3的抑制剂,能够抑制OAT1、OAT3对其他底物的转运活性.
-
板蓝根及所含靛蓝和靛玉红强烈抑制小鼠肾主要有机阴离子转运体Oat1，Oat2和Oat3
目的：探讨板蓝根颗粒剂( GRl)和饮片水煎剂( DRl)及其所含主要成分靛蓝和靛玉红对小鼠肾有机阴离子转运体( OAT)中3个主要亚型Oat1,Oat2和Oat3的影响。方法 NlH小鼠分别ig给予GRl 0.615和2.460 g·kg－1,DRl 1.6和6.4 g·kg－1(生药量),靛蓝0.008和0.640 mg·kg－1,靛玉红0.0192和1.5360 mg·kg－1,每组60只(雌雄对半),每天2次,连续5 d。同时设丙磺舒(0.05 g·kg－1)阳性对照组和两种溶媒〔纯水和0.5％羧甲纤维素钠( CMC-Na)水溶液〕对照组及糊精加蔗糖(各1.5 g·kg－1)添加剂组。后1次给予供试物后实施对-氨基马尿酸( PAH, iv,0.03 g·kg－1)清除实验,即在iv PAH后1.0,2.5,5.0,7.5,10.0和20.0 min 时每组分别各取10只小鼠(雌雄对半),安乐处死收集全血制备血清,并迅速摘取双肾,右肾进行组织匀浆后测定PAH蓄积量,左肾组织用于提取总mRNA。每组另取10只小鼠(雌雄各半),同样给药处理,按Nakakariya法做肾切片进行摄取PAH实验。用Kiguchi法测定血清和肾组织匀浆液中PAH浓度。以药动学软件( DAS 2.0)计算血清及肾组织中PAH的主要药动学参数。以实时定量PCR法测定小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3 mRNA表达。结果与纯水对照组比较,0.5％CMC-Na对照组各项检测指标均无显著差异。与两种溶媒对照组相比, GRl 2.460 g·kg－1,靛蓝0.640 mg·kg－1和靛玉红1.5360 mg·kg－1组消除半衰期( t1/2β)显著延长( P<0.05)；各供试物组分布容积( Vd )和清除率( Cl)均显著减少(P<0.01),曲线下面积(AUC0→20 min)均显著增加(P<0.01)；由采血时间段内各组肾组织中的PAH蓄积量所求得的AUC0→20 min显著大于同期对照组( P<0.05,P<0.01),且肾AUC0→20 min与血液AUC0→20 min的比值在各组间无显著差异。各剂量供试物均可使肾切片摄取PAH的量显著少于对照组( P<0.05,P<0.01)。与纯水/CMC对照组相比,GRl 2.460 g·kg－1,DRl 6.4 g·kg－1,靛蓝0.640 mg·kg－1,靛玉红1.5360 mg·kg－1组小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3 mRNA表达除靛玉红组Oat2 mRNA( P<0.05)、GRl组Oat3 mRNA( P<0.01)表达水平被显著上调外,其余均被显著下调( P<0.05,P<0.01)。结论 GRl、DRl、靛蓝、靛玉红在所用剂量下对小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3均有明显抑制作用,GRl和DRl的这种抑制作用可能主要来自其所含的靛蓝和靛玉红成分。
-
肉桂等八种中药对小鼠肾脏三种主要有机阴离子转运体的影响
目的:检测8种具有肾毒性的中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体(OATs)中3个主要亚型(Oat1,Oat2,Oat3)的影响.方法:肉桂等8种中药水煎剂(以高、低两个剂量)及纯水、丙磺舒(阳性对照)及羧甲基纤维素钠(CMC,丙磺舒溶媒)分别灌胃给NIH小鼠(每组雌雄各半),2次/d,连续5d.后一次给予供试品后1h所有受试鼠逐一经尾静脉注入对氨基马尿酸(para-aminohippuric acid,PAH,30 mg/kg),然后在1、2.5、5、7.5、10、15和20 min时从各组分别取10只鼠安乐处死收集全血并迅速摘取双肾.匀浆各左肾(以Folin-酚法定量蛋白浓度)后以文献法定量其中及血清中的PAH浓度,以药动学软件(DAS2.0)分析血中PAH的主要药动学参数:消除半衰期(t1/2β)、分布容积(Vd)、总清除率(CL)及药时曲线下面积(AUC0-20min);比较全部采血点中5个时间点(1、5、10、15、20 min)各组肾组织中的PAH蓄积量;从1 min采血点时的各组右肾提取总mRNA,以实时荧光定量PCR法比较各组小鼠肾脏中Oat1、Oat2、Oat3 mRNA的表达量.结果:与纯水组相比,益母草高剂量组,蜈蚣高、低剂量组的t1/2β显著延长(P ＜0.05,P＜0.01),其余各组无明显改变(P＞0.05).除细辛低剂量组和益母草低剂量组外所有其他供试物组的Vd、CL和AUC0-20min均发生显著变化:Vd变小(P＜0.01),CL变慢(P＜0.01),AUC0-20 min增大(P＜0.01).与纯水对照组相比,肾组织中的PAH蓄积量除冬虫夏草低剂量组、蜈蚣低剂量组外其余各组均显著升高(P ＜0.05,P＜0.01).与CMC组相比,丙磺舒组的mRNA表达量在Oat1、Oat3被显著上调(P ＜0.05,P＜0.01),而在Oat2被显著下调(P＜0.05);与纯水组相比,Oat1的mRNA表达水平在细辛、冬虫夏草、益母草、番泻叶、厚朴等各组被显著上调(P ＜0.05,P＜0.01),而在蜈蚣组则被显著下调(P＜0.05);肉桂、冬虫夏草、益母草、番泻叶、厚朴等各组的Oat2的mRNA表达量被显著上调(P＜0.01);肉桂、厚朴两组的Oat3的mRNA表达水平被显著上调(P＜0.01),而细辛、益母草、蜈蚣、苦参等组的Oat3的mRNA表达水平被显著下调(P ＜0.05,P＜0.01).结论:肉桂、细辛、益母草、番泻叶、苦参、厚朴、蜈蚣、冬虫夏草等8种肾毒性中药可能通过抑制有机阴离子转运体中的3个主要成员OAT1、OAT2、OAT3而导致肾损伤.
关键词： 肾毒性 中药 有机阴离子转运体 对氨基马尿酸清除试验 mRNA表达 -
齐多夫定在人胎盘中转运机制的研究进展
齐多夫定是阻断艾滋病母婴传播的一线用药,临床上疗效显著.该药虽暂无相关致畸报道,但其妊娠期用药的安全性仍存在争议.有研究表明齐多夫定可以透过胎盘,对胎儿潜在的毒性与胎儿曝露量呈正相关.目前已有文献报道胎盘中乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、有机阴离子转运体4(OAT4)及核苷转运体2(ENT2)转运蛋白可能参与齐多夫定的转运,但具体转运机制尚未完全明确.本文将对齐多夫定在人类胎盘中的转运机制的研究进展进行综述,以期为评价齐多夫定在妊娠期的安全应用提供参考.
-
肾脏有机阴离子转运体在尿酸转运中的作用研究进展
尿酸是嘌呤核苷酸类和游离碱基转化过程中的终酶产物,肾脏有机阴离子转运体在维持体内尿酸的重吸收与分泌之间的平衡有显著性意义.尿酸的重吸收和分泌失衡是导致高尿酸血症的主要原因.研究肾脏有机阴离子转运体在尿酸转运中的作用有重要意义.
-
高尿酸血症与相关基因关系的研究
近年来,国内外大量流行病学研究表明高尿酸血症/痛风的患病率正逐年升高,高尿酸血症不仅诱发痛风性关节炎、尿石症、尿酸性肾病,而且血尿酸水平升高与脂质代谢异常、肥胖等疾病密切相关,高尿酸血症/痛风已成为威胁人类健康的重要疾病.尿酸排泄减少和/或生成增加是原发性高尿酸血症的主要病因.
-
尿酸相关疾病及尿酸转运蛋白功能研究进展
尿酸是嘌呤代谢的产物,也是高尿酸血症(HUA)发生的物质基础.HUA是一种由嘌呤代谢紊乱导致的疾病,目前在全球范围内HUA的发病率越来越高.因此本文就HUA的物质基础——尿酸以及与其相关的转运蛋白的研究进展做一综述,以期加深对尿酸和HUA的认识.
-
多态变异对药物转运体活性影响及其临床意义
药物转运是药物反应个体差异及药物相互作用的重要环节.近年来,随着物质转运研究的深入,转运蛋白超家族成员正在不断增加.在已发现和命名的转运蛋白中,与药物转运有关的主要蛋白有ATP依赖性泵出转运体MDR1、有机阴离子转运蛋白(OATP).MDR1在胃肠道、肝脏和肾脏等组织广泛分布,影响药物的吸收、分布以及分泌排泄.MDR1基因的多态性影响其表达和功能,改变底物药物体内过程.有机阴离子转运蛋白在肝脏等组织特异表达,调节药物的分泌排出,其遗传多态性是相关药物异常反应的重要原因.
-
缩泉丸和真武汤对小鼠肾脏有机阴离子转运体Oat1和Oat3的影响
目的：初步检测缩泉丸和真武汤对小鼠肾脏有机阴离子转运体（Oats）中的2个主要亚型（Oat1，Oat3）的影响。方法以缩泉丸和真武汤及方中各药水煎剂、丙磺舒、氢氯噻嗪给NIH小鼠灌胃，每天2次，连续5 d，另设纯水对照组。末次给药后所有受试鼠逐一经尾静脉注入对氨基马尿酸（para-aminohippuric acid， PAH）30 mg·kg-1，然后在1，2.5，5，7.5，10，15，20 min时分别从各组各取10只小鼠处死收集全血，并迅速摘取双肾，测定血清及肾匀浆液中的PAH浓度，以药动学软件（DAS2.0）求出血清及肾组织匀浆液中PAH的主要药动学参数：消除半衰期（t1/2β），分布容积（Vd），清除率（CL）和药-时曲线下面积（AUC0-20 min）；从各组右肾提取总mRNA，以实时荧光定量PCR法比较小鼠肾脏中Oat1、Oat3 mRNA的表达量。另从各组各取10只小鼠，末次给药后1 h，断头处死后，取右肾做肾切片摄取PAH试验。结果与纯水对照组比较，真武汤组、茯苓组t1/2β显著延长（P<0.01），缩泉丸、乌药、附子各组t1/2β显著缩短（P<0.05，P<0.01）；缩泉丸、益智仁、山药、真武汤、白芍、生姜、茯苓各组Vd显著降低（P<0.05，P<0.01），附子组Vd升高（P<0.01）；缩泉丸、山药、真武汤、白术、生姜、茯苓各组CL均显著降低（P<0.05，P<0.01）；除益智仁、白芍、茯苓各组AUC0-20 min无显著变化外（P跃0.05），其他供试物组均显著增大（P<0.01）。各供试物组肾脏与血清AUC0-20 min比值均在0.247~0.475之间，与纯水对照组相似；肾切片摄取PAH试验显示，与纯水对照组比较，缩泉丸、乌药、山药、真武汤、白术、白芍、附子、生姜、茯苓各组摄取PAH量明显降低（P<0.05，P<0.01）。与纯水对照组比较，益智仁组、附子组小鼠肾脏Oat1 mRNA表达水平显著上调（P<0.01），而缩泉丸组、真武汤组Oat1 mRNA表达水平则显著下调（P<0.01）；缩泉丸、益智仁、附子各组小鼠肾脏Oat3 mRNA表达水平显著上调（P<0.01），而真武汤组Oat3 mRNA表达水平则显著下调（P<0.01）。结论缩泉丸及其君药益智仁、真武汤及其君药附子可能通过影响有机阴离子转运体的2个主要成员Oat1，Oat3的表达导致肾脏损伤。
-
10种肾毒性中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体的影响
目的：研究10种肾毒性中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体（Oats）中3个主要亚型（Oat1、Oat2、Oat3）的影响。方法：1840只SPF级NIH小鼠随机分为正常对照（等容纯水）组，丙磺舒（30 mg/kg）组，羧甲基纤维素钠（CMC-Na）组与白头翁、延胡索、草乌、川乌、独活、皂角刺、虎杖、甘遂、侧柏叶、木香水煎剂高、低剂量组，ig给药，bid，连续5 d。末次给药1 h后，尾iv给予对氨基马尿酸（PAH，30 mg/kg），测定小鼠肾脏匀浆中PAH药动学参数与在1、5、10、15、20 min时间点的肾组织中PAH的蓄积量。用DAS 2.0分析软件计算血中PAH的药动学参数。分组与给药同上，末次给药1 h后制作肾切片置于PAH-buffer中，测定肾切片PAH摄取量。结果：与正常对照组比较，延胡索高剂量组，草乌高、低剂量组，独活高剂量组，虎杖高、低剂量组，侧柏叶高剂量组t1/2β升高；10种中药高、低剂量组Vd均降低；除独活低剂量组、皂角刺低剂量组、甘遂低剂量组外，其余用药组的CL均降低、AUC0-20 min均升高，差异均具有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。与正常对照组比较，白头翁高剂量组，延胡索高剂量组，草乌高剂量组，川乌高、低剂量组，独活高、低剂量组，皂角刺高、低剂量组，虎杖高、低剂量组，甘遂高、低剂量组，侧柏叶高、低剂量组，木香高、低剂量组小鼠肾组织PAH蓄积量增加，差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。与正常对照组比较，延胡索高剂量组，草乌高、低剂量组，皂角高、低剂量组，甘遂高剂量组，侧柏叶高、低剂量组，木香高剂量组小鼠肾切片PAH摄取量减少，差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。结论：10种肾毒性中药可能通过抑制有机阴离子转运体Oat1、Oat2、Oat3而导致肾损伤。
-
淫羊藿苷对大鼠肝药物代谢Ⅱ相酶和药物转运体的影响
目的 揭示淫羊藿苷(icariin,ICA)对大鼠药物代谢Ⅱ相酶和药物转运体的影响,并比较月龄差异.方法 6月龄和18月龄SD雄性大鼠随机分为6月龄大鼠生理盐水组(6NS)和ICA组(6ICA),18月龄大鼠生理盐水组(18NS)和ICA组(18ICA),每组8只,灌胃ICA (60mg·kg-1) 4w后取肝脏,钙沉淀法提取肝微粒体,BCA法测定微粒体蛋白浓度.比色法测定谷胱甘肽-S转移酶(glutathione S - transferase,GSTs)活性；紫外分光光度法测定尿苷-5'-二磷酸葡醛酰转移酶(uridine 5’-diphosphate glucuronosyl transferase,UGTs)活性；ELISA法测定有机阴离子转运多肽2(organic anion transporting polypeptide 2,Oatp2)和有机阴离子转运体2(organic anion transporter2,OAT2)含量Real-Time RT-PCR检测UGT1 A6、UGT2B7、GST-π、OAT2和Oatp2 mRNA表达.结果 ICA(60mg·kg -)明显增加Oatp2和OAT2含量,上调OAT2和Oatp2 mRNA的表达,但未见明显月龄差异；对GSTs和UGTs活性以及UGT1A6、UGT2B7、GST-π mRNA的表达未见明显影响.结论 ICA对大鼠肝组织OAT2和Oatp2具有诱导作用,该作用未见明显月龄差异,对GSTs和UGTs无明显影响.
-
影响胆红素代谢的基因多态性研究
目的 探讨尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT1A1)基因启动子TATA和G71A、有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)基因A388G和T521C以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因G1376T多态性与胆红素代谢的关联性.方法 选择2012年6月至2013年9月我院新生儿科收治的足月新生儿,根据纳入标准将高胆红素血症患儿列为病例组,无黄疸患儿为对照组.采用常规方法提取DNA,用聚合酶链反应(PCR)方法扩增,琼脂糖凝胶电泳鉴定产物,PCR产物进行DNA测序.结果 病例组150例,对照组50例.病例组UGT1A1 Gly71Arg突变频率为30％,对照组为12％,差异有统计学意义(P＜0.05);病例组OATP1B1 T521C基因突变频率为8％,对照组为2％,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组未发现OATP1B1 A388G基因变异纯合子,病例组等位基因突变频率为26％,对照组为23％,两组差异无统计学意义(P＞0.05);病例组UGT1A1TATA等位基因突变频率为4％,对照组为2％,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).本次检测仅发现1例G6PD基因G1376T突变.结论 本地区部分原因不明的新生儿高胆红素血症患儿胆红素代谢与UGT1A1TATA、OATP1B1 A388G多态性无相关性,而与UGT1A1 Gly71Arg、OATP1B1 T521C多态性相关,并且与UGT1A1 Gly71Arg关系更密切.
-
小檗碱对有机阴离子转运体抑制作用及双向跨膜转运研究
目的 研究小檗碱对有机阴离子转运体(OATs)的抑制作用及其双向跨膜转运情况.方法 应用由转染试剂Lipo 3 000介导的动物细胞转基因方法、经筛选得到人有机阴离子转运体OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7和URAT1高表达单克隆细胞株;以野生型(WT)细胞为对照组,用各转运体放射性同位素标记底物和抑制剂验证其转运活性;观察1 00 μmol/L小檗碱对各转运体的抑制作用,并测定小檗碱对URATI转运活性的半数抑制浓度(IC50).通过Caco-2细胞模型研究小檗碱的双向跨膜转运情况.结果 100 μmol/L小檗碱使OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7和URAT1相对转运活性分别下降至(70.48±4.23)％、(69.13±1.28)％、(72.12±3.28)％、(79.77±6.49)％、(69.51±5.99)％、(38.4±2.67)％;小檗碱对URAT1抑制作用的IC50为13.6 μmol/L;在50和100 μmol/L浓度下,小檗碱在顶侧(AP侧)-基底侧(BL侧)方向的跨膜渗透率Papp (A-B)分别为0.28×10-6 cnm/s和0.40×10-6 cm/s,其相对应的外排率分别为3.18和3.15.结论 小檗碱对URAT1的抑制作用较强,对OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7抑制作用相对较弱,小檗碱是一些外排蛋白的底物,为预测小檗碱可能发生的药物-药物相互作用、解释生物利用度低提供了理论依据.
