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中药靛玉红对膀胱癌细胞株的生长抑制作用观察
目的 探讨靛玉红对膀胱癌细胞株的生长抑制作用.方法 体外持续传代培养已加有不同浓度靛玉红的膀胱癌细胞株30d,记录各组各代细胞的增殖周期;MTT法测定不同浓度不同作用时间的靛玉红对细胞株的生长抑制作用.结果 不同浓度的靛玉红均能抑制细胞株生长,并呈明显的量效关系和时间依赖性.结论 靛玉红能够明显抑制膀胱癌细胞株增殖,且具有量效关系和时间依赖性.
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靛玉红对膀胱癌Scaber细胞株体外生长抑制的研究
目的:体外持续传代培养膀胱癌Scaber细胞株.方法 用RT-PCR法及琼脂糖凝胶电泳检测不同浓度不同作用时间的靛玉红作用于Scaher细胞株时,对Oct-4、Sox-2基因表达的影响.结果 1、5、10μmol/L的靛玉红均能抑制scaber细胞株生长,并呈明显的量效关系和时间依赖性:靛玉红能够抑制Oct-4、Sox-2基因的表达.结论 靛玉红能够明显抑制膀胱癌Scaber细胞株增殖,其机制可能与Oct-4、Sox-2基因表达下调有关.
关键词： 靛玉红 膀胱癌 Oct-4、Sox-2基因 -
不同药物配伍与不同基质对甘石青黛膏经皮吸收的影响
目的 建立甘石青黛膏透皮实验中靛蓝及靛玉红的测定方法,考察甘石青黛膏全方与拆方,以及不同基质下靛蓝及靛玉红的体外经皮渗透行为,探讨不同药物配伍与不同基质对其透皮效果的影响.方法 采用Franz扩散池,以离体鼠皮为屏障,用高效液相色谱法测定接受液中靛蓝及靛玉红的量;考察全方与拆方、凡士林基质以及橄榄油基质下靛蓝及靛玉红的透皮特性.结果 全方组的透皮速率和累计渗透量均大于拆方组,且差异有统计学意义(P<0.05);橄榄油基质对软膏中靛蓝的渗透效果较凡士林基质明显,而二者对靛玉红的影响没用显著性差异.结论 不同药物配伍与不同基质对甘石青黛膏中靛蓝及靛玉红的透皮吸收均有影响.
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复方贯众感冒滴鼻液的提取工艺研究
目的 优选复方贯众感冒滴鼻液提取工艺的佳条件.方法 以靛玉红含量为考察指标,运用L9(34)正交试验设计,考察加水量、提取时间、提取次数等因素对提取工艺的影响.结果 提取时间和提取次数对检测指标均有显著影响,加水倍数为不显著因数.实验结果表明,以加水量为药材的10倍量,煎煮时间1.5 h,提取2次为该制剂的佳提取工艺.结论 正交实验的终确定方法简便、实用、经济,符合工业化生产的要求.
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减味锡类散栓剂质量标准研究
目的:建立减味锡类散栓剂的质量标准.方法:采用TLC法对制剂中的青黛、牛黄、冰片进行定性鉴别.用HPLC对制剂中的靛玉红进行含量测定.色谱柱为SinoChrom ODS-AP C18(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相为甲醇-1%醋酸水溶液(81∶ 19),流速0.8 mL· min-1,检测波长288 nm,柱温为室温.结果:定性鉴别薄层色谱特征明显.靛玉红在0.2～10.8mg·L-1线性关系良好(r =0.999 5),平均回收率为100.95%( RSD l.12%,n=6).结论:该方法简单、准确、重复性好,可作为减味锡类散栓的质量控制方法.
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靛玉红体外透皮研究
目的:研究靛玉红在不同接受液和促渗剂条件下的体外透皮情况.方法:采用Franz透皮扩散池,以离体小鼠皮肤为透皮屏障,用高效液相色谱法检测不同接受液及渗透促进剂对靛玉红的累积透过量及透过率的影响.结果:不同接受液对靛玉红透过量的影响不同,其中40%乙醇生理盐水好,透过率为28.77%;不同促渗剂对靛玉红透过量的影响不同,其中5%冰片促渗效果好,透过率为50.23%.结论:以40%乙醇生理盐水为接受液,冰片为促渗剂,靛玉红的体外渗透效果好.
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升血小板片质量标准
目的:建立升血小板片的质量标准.方法:采用TLC鉴别青黛、连翘、牡丹皮,以靛玉红为定量指标,通过RP-HPLC测定靛玉红含量,采用Discovery C18色谱柱(4.6 mm ×200 mm,5μm),流动相甲醇-0.1 mol·L-1乙酸铵溶液-乙酸(80∶20∶1),检测波长290 nm.结果:TLC鉴别表明阴性对照均无干扰；靛玉红线性范围0.010 95～0.394 2 μg(r =0.999 8),平均加样回收率97.4％,RSD 0.7％.结论:建立的质量标准方法简便、准确,可用于升血小板片的质量控制.
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正交试验法优选板翘解毒颗粒提取工艺
目的:优选板翘解毒颗粒的提取工艺.方法:以连翘苷和靛玉红的含量为指标,选取溶媒用量、提取次数、提取时间为影响因素,采用L9(34)正交试验法优选板翘解毒颗粒的提取工艺.结果:优选的提取工艺为10倍量水加热回流提取3次,每次2h.结论:该优选工艺提取率高、稳定性好.
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HPLC法测定升血小板片中靛玉红的含量
目的:应用高效液相色谱法测定升血小板片中靛玉红的含量,控制该制剂的质量.方法:采用HPIC法,色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(53:47),检测波长290 nm.结果:靛玉红线性范围(0.3028～3.028)μg,平均加样回收率为97.4%,RSD=0.7%(n=6).结论:该法操作简便易行、准确,可用于升血小板片的质量控制.
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复方瓜子金新老工艺提取物的抗炎作用比较研究
复方瓜子金由瓜子金、大青叶、紫花地丁、野菊花、海金沙等中草药组成的复方制剂.具有清热利喉、散结止痛、祛痰止咳的功效.临床用于急慢性咽喉炎及上呼吸道感染,有良好的疗效.但复方瓜子金原工艺为水提醇沉法,提取物浸膏量大、色黑,制剂较为困难.我们采用大孔吸附树脂分离纯化技术对复方瓜子金水提液进行了分离精制,以总黄酮、总皂苷、靛玉红为分离指标.精制物的浸膏量为原工艺浸膏量的三分之二、靛玉红的回收率为98.29%,解决了色黑和制剂困难的问题.现将复方瓜子金新老工艺提取物的抗炎作用的比较研究报道如下.
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薄层扫描法测定小儿止泻口服液中靛玉红的含量
小儿止泻口服液是由白术、大青叶、乌梅、甘草等中药制成的复方制剂,具有健脾和胃,消积止泻之功效.并已由国家卫生部批准进行二期临床试验.大青叶为本品中的主要药物,其主要有效成分为靛玉红.关于靛玉红的含量测定方法有紫外分光光度法和薄层扫描法[1].我们以本品中的主药大青叶中的有效成分靛玉红为指标,监测药品的质量.实验方法如下:
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基于“蛋白质相互作用网络-分子对接技术-体外实验”三维模式分析青黛对慢性粒细胞白血病的作用机制
目的:在慢性粒细胞白血病(CML)蛋白质相互作用网络构建与分子对接技术指导体外实验模式构建下,探讨青黛干预CML K562细胞的有效分子学机制.方法:使用在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)筛选CML相关基因,String 10.0用于进一步文本挖掘并构建CML可视化蛋白质相互作用网络,将互作数据读入Cytoscape 3.4.0,通过插件CentiScaPe 2.1实现网络拓扑分析;青黛活性小分子物质从第三方数据库获取,Chemoffice 8.0与Sybyl 8.1对其再构建、优化,得到青黛小分子配体结构库,通过Surflex-Dock模块与受体靶点进行分子对接,打分后得到关键靶标.随后针对其进行实验验证,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测空白组(无药血清)与试验组(10％,20％和30％含药血清)在24,48,72 h时对K562细胞的增殖抑制率,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测两面神激酶(JAK)2蛋白的表达情况.结果:构建了由425个节点(蛋白质)和2 799条边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键靶标JAK2.研究表明青黛能抑制K562细胞的增殖并能降低JAK2蛋白的表达.结论:CML是一个受多基因调控的复杂疾病,JAK2很可能是其关键节点,而青黛的有效成分靛玉红可通过降低JAK2的表达来干预K562细胞增殖.
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复方大青叶合剂中的靛玉红、绿原酸含量测定方法的研究
复方大青叶合剂用于感冒发热、头痛、咽喉红肿等病症,是临床常用的抗感冒药,已被收载于部颁标准中药保护品种第一册.其有效成分靛玉红、绿原酸的含量是卫生部质量标准鉴别项下重要的质控指标,直接影响药品的质量.我国虽建立了较完善的药品质量标准,但部没有建立其含量测定的方法,使得制剂质量控制手段不全,难以鉴定药品的真伪、优劣.本方法采用薄层层析-紫外分光光度法对复方大青叶合剂中靛玉红、绿原酸的含量进行测定.该研究设计周密,准确灵敏,简便易行.技术报告如下.
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青黛的质量分析
青黛为爵床科植物马蓝Baphicacanthus CUsia (Nees)Bremek.、蓼科植物蓼蓝Po1ygonnum tinctonrium Ait.或十字花科植物菘蓝Isati s indigotica Fort.的叶或茎叶经加工制得的干燥粉末或团块.其主要成分都含有靛蓝和靛玉红.我们对北京地区4家饮片厂(A厂的批号 90004074、90024208;B厂的批号000918、000929;C厂的批号000829、000924、001014;D厂的批号 000915、000505、000723)生产的青黛,按<中国药典>2000年版(一部)方法进行检验,结果报道如下.1 鉴别1.1 性状、理化鉴别及检查(见表1)1.2 薄层色谱鉴别
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多指标优选清肠温中颗粒中黄连、三七、青黛的醇提工艺
目的 优选清肠温中颗粒中黄连、三七、青黛的佳醇提工艺.方法 以黄连生物碱、三七皂苷和靛玉红的提取率为指标,采用正交试验考察乙醇提取工艺,采用单因素试验考察离心工艺和浓缩干燥工艺.结果 优选的工艺为:黄连、三七、青黛3味药加10倍量60％乙醇,加热回流提取3次,每次1.5 h,提取液过滤,滤液5000 r/min离心10 min或7000 r/min离心5 min,所得离心液80℃以下减压回收乙醇,浓缩成相对密度为1.15～1.30 (60℃)的稠浸膏,50℃以下减压干燥,粉碎成细粉.结论 本研究确定的工艺稳定性好,合理可行,可为工业化生产提供参考.
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超细珠黄凝胶质量标准研究
目的 建立超细珠黄凝胶的质量标准.方法 采用薄层色谱法鉴别靛玉红、胆酸、龙脑;采用高效液相色谱法测定制剂中靛玉红和胆酸的含量.结果 薄层斑点清晰,重现性好.含量测定靛玉红平均回收率为100.3%,RSD＝2.1%;胆酸平均回收率为98.9%,RSD＝1.8%.结论 方法简便、准确,可用于超细珠黄凝胶的质量控制.
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紫外分光光度法测定抗病感口服液中靛玉红的含量
目的 建立紫外分光光度法(UV)测定抗病感口服液中靛玉红含量的方法.方法 采用Helios Gamma紫外-可见分光光度计,以靛蓝、靛玉红对照品分别制成2～8 μg/mL的氯仿溶液,按处方比例配制无板蓝根阴性空白溶液,在500～700 nm波长处分别测定.结果 靛玉红在540.0 nm处有大吸收,靛蓝在634.5 nm处有大吸收,在0.20～1.40 μg/mL范围内呈良好线性关系(r=0.999 4),平均回收率为99.05%,RSD=0.87%(n=6).结论 本方法操作简便,结果准确,可用于抗病感口服液的质量控制.
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抗毒口服液中靛玉红定量方法的研究
目的:建立测定抗毒口服液中靛玉红的含量方法.方法:采用薄层扫描法对抗毒口服液中靛玉红进行定量测定.结果:靛玉红加样回收率为97.4%,RSD为2.08%.结论:本法可作为该制剂质量标准的定量方法.
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水分胁迫对菘蓝生长发育和有效成分积累的影响
目的:研究不同水分对菘蓝生长发育和主要有效成分的影响.方法:采用室外盆栽水分胁迫试验方法,对水分胁迫条件下菘蓝需水规律、叶绿素含量、蒸腾速率、光合速率、生物量指标以及有效成分靛玉红积累进行了研究.结果:水分胁迫程度增加,需水量、叶绿素含量降低,蒸腾速率、光合作用和生物量均降低,但水分利用效率提高.结论:菘蓝需水的关键时期是7月,严重水分胁迫和水分过多都不利于靛玉红含量积累,中度水分胁迫能促进根部靛玉红含量积累,大青叶7月为佳采收期,板蓝根10月采收较适宜.当田间大持水量为45%～70%,菘蓝的产量与质量可以兼优.
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大青叶化学成分研究
目的:研究大青叶乙醇总提取物中的化学成分.方法:应用各种柱色谱方法对其提取物进行化学成分分离,并应用化学方法和现代波谱分析方法鉴定所分离得到的化学成分.结果:从大青叶乙醇总提取物中分离得到3个化合物,经鉴定为吲哚类化合物靛玉红(indirubin)、喹唑酮类化合物色胺酮(tryptanthrin)及焦谷氨酸(L-pyroglutamic acid).结论:焦谷氨酸为首次从菘蓝属植物中分离得到,色胺酮系从该植物叶中首次分离得到.
