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抗大鼠HSP70蛋白单克隆抗体的制备及特性研究
目的 制备大鼠HSP70蛋白单克隆抗体并对其性质进行研究.方法 利用PCR技术扩增大鼠全长hsp70,插入表达质粒pET-28a,pMAL-c2x,诱导表达,采用亲和层析纯化融合蛋白;用HIS-HSP70融合蛋白免疫BALB/c小鼠,杂交瘤技术制备大鼠HSP70单克隆抗体;采用Western印迹和免疫组化方法对抗体性质进行鉴定,ELISA方法确定抗体的表型.结果 亲和层析纯化HIS-HSP70蛋白纯度在97.6%,获得6株可稳定分泌抗HSP70 mAb的杂交瘤细胞系;抗体的亚类均是IgG1 类κ链的.Western印迹结果显示6株单抗均能识别天然的大鼠HSP70蛋白;免疫组化结果显示3株抗体可以识别组织的HSP70蛋白.结论 成功获得6株有活性HSP70单克隆抗体,可以识别HSP70蛋白不同表位,为进一步研究HSP70单克隆抗体在疾病中的作用奠定基础.
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中药天疱疮颗粒对天疱疮抗体亚类调控的研究
目的:研究中药天疱疮颗粒对天疱疮抗体亚类的调控作用.方法:使用ELISA方法检测寻常型和红斑型天疱疮患者治疗前、西药组和中药+西药组治疗后血清中天疱疮抗体亚类水平.结果:寻常型天疱疮患者治疗后西药组与治疗前天疱疮抗体亚类水平比较IgG1升高,IgG2、IgG3、IgG4降低;西药+中药组与治疗前天疱疮抗体水平比较IgG1升高,IgG2、IgG3、IgG4降低;西药+中药组与西药组比较IgG4降低辐度较大.红斑型天疱疮患者治疗后西药组与治疗前天疱疮抗体亚类水平比较IgG1、IgG2升高,IgG3、IgG4降低;西药+中药组与治疗前天疱疮抗体水平比较IgG1、IgG2,IgG3升高,IgG4降低;西药+中药组与西药组比较IgG1、IgG3升高,IgG2、IgG4降低;西药+中药组与西药组比较IgG4降低辐度较大.结论:西药+中药比单纯西药治疗寻常型和红斑型天疱疮患者疗效更好.
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全反式维甲酸对基因免疫应签的调节作用(摘要)
目的研究全反式维甲酸(ATRA)对TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的特异性细胞免疫与体液免疫应答的调节作用.方法肌肉注射重组质粒TR421-hCGβDNA(每只鼠50 μ/100μl)初次免疫小鼠,以灌胃的方式给予ATRA,并以灌溶剂和TR421质粒免疫为对照;3周与6周后经同样的方式加强免疫各组小鼠,采用ELISA方法对基因免疫小鼠血清中IgG抗体水平进行动态观察,分析小鼠血清中IgG抗体亚类;3H-TdR掺入法测定特异性细胞增殖和细胞杀伤功能.结果ELISA结果表明,TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生较高的抗hCGβ抗体水平,ATRA增强TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的抗hCGβ特异性IgG抗体水平并且伴随IgG2a/IgG1显著性降低;TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生较强的淋巴细胞增殖活性和CTL活性,ATRA抑制TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的特异性细胞增殖和细胞杀伤功能.结论ATRA促进基因免疫诱生的TH2免疫应答,抑制TH1型免疫应答,为改变基因免疫诱生的特异性免疫应答类型提供了一条新的途径.
