首页 > 文献资料
-
YAP1在人肺腺癌细胞厄洛替尼耐药中的作用
目的：探讨Yes相关蛋白1（YAP1）基因在肺腺癌耐厄洛替尼（ER）中的作用及可能机制。方法在PC-9细胞与耐ER PC-9细胞（ PC-9／ER）中，实时荧光定量PCR（ RT-qPCR）检测YAP1 mRNA表达；Western印迹与间接免疫荧光分别检测YAP1蛋白表达与定位。以 YAP1抑制剂维替泊芬（ VP）作用PC-9／ER细胞后，比较处理前后YAP1 mRNA和蛋白表达改变、Yap1下游AKT、p-AKT分子表达变化、Cell Counting Kit 8（ CCK-8）法计算PC-9／ER耐药指数改变。结果 PC-9／ER耐药指数为99．80±25．81；与PC-9细胞相比较，YAP1 mRNA和YAP1蛋白在PC-9／ER中表达增高；VP抑制效率为（50．96±5．86）％，同时下调了下游AKT、p-AKT蛋白的表达；PC-9／ER细胞的ER半数抑制浓度（IC50）由（11．10±2．72）降低为（1．47±0．32）μmol／L（P＝0．024），耐药指数降为原来的1／8。结论 YAP1介导耐ER肺腺癌的作用机制可能是通过PI3K／AKT信号通路，YAP1可能成为肺癌治疗的靶标。
-
miR-200a抑制YAP1基因表达对肺癌细胞增殖的影响
目的:研究微小RNA-200a(miR-200a)对肺癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制.方法:采用Real-time PCR检测15例非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织、人肺癌细胞株(A549、NCI-H520、SK-MES-1)及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表达水平.用CCK-8法检测miR-200a对A549肺癌细胞增殖活性的影响.通过生物信息学方法预测miR-200a可能的靶基因,双荧光素酶报告基因实验结合Real-time PCR和Western blot验证miR-200a对靶基因YAP1的调控作用.CCK-8法检测下调靶基因YAP1对A549肺癌细胞株增殖活性的影响.结果:miR-200a在非小细胞肺癌组织和肺癌细胞系中表达明显降低(P<0.01).上调miR-200a表达后明显抑制A549肺癌细胞的增殖活力(P<0.01).双荧光素酶报告基因显示miR-200a可以直接作用于靶基因YAP1的3'-UTR区域抑制荧光素酶活性(P<0.01),Real-time PCR和Western blot检测显示上调miR-200a的表达能够明显下调A549肺癌细胞YAP1 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01).CCK-8法显示下调YAP1的表达能够明显抑制A549肺癌细胞的增殖活性(P<0.01).结论:miR-200a通过靶向作用于YAP1基因来抑制肺癌细胞的增殖,从而在肺癌中发挥抑癌基因的功能.
-
YAP1在肿瘤生长中的双向调控作用及其临床应用前景
Hippo信号通路的主要功能是调控细胞生长、增殖和凋亡;YAP1是其下游的重要分子,主要负责细胞的增殖和转移.YAP1过表达与肿瘤演进和较差的预后高度相关.近年有文献报道YAP1在一部分肿瘤中(如乳腺癌)可能抑制肿瘤生长,诱导肿瘤凋亡.因此,YAP1在人类肿瘤中具有抑癌和促癌的双向作用,作用方式取决于组织类型.该文将对现阶段有关YAP1促癌和抑癌的功能研究进展作一综述,进一步探讨YAP1在肿瘤患者预后及治疗中的意义.
-
YAP1和β-catenin 在大肠癌中的表达及相关性研究
目的：探讨Yes相关蛋白1（ Yes-associated protein 1， YAP1）和β-连环蛋白（β-catenin）在大肠癌组织中的表达及其与肠癌患者临床病理因素间的关系。方法应用免疫组织化学Envision二步法检测YAP1和β-catenin在99例人大肠癌组织及30例正常肠黏膜组织中的表达状况。结果YAP1蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率为56.57％（56／99），显著高于正常肠黏膜组织16.67％（5／30）（χ2＝14.704，P ＜0.01）；β-catenin 蛋白在大肠癌组织中的异位（细胞质／核）表达率为51.52％（51／99），明显高于正常肠黏膜组织0％（0／30）（χ2＝25.559，P＜0.01）。 YAP1蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床Duke′s分期均无关；β-catenin蛋白的细胞核表达与大肠癌的分化程度及浸润深度相关（χ2＝6.641、4.229，P＜0.05）；β-catenin蛋白的细胞质表达水平与大肠癌的分化程度相关（χ2＝6.761，P＜0.05）；β-catenin蛋白的细胞膜表达水平与临床病理因素均无关。β-catenin蛋白细胞质、细胞核的表达与YAP1细胞核、细胞质／核的表达呈正相关性（ P＜0.05）；β-catenin蛋白细胞核表达与YAP1细胞质的表达呈正相关性（P＜0.05）。结论 YAP1和β-catenin在大肠癌的发生发展中均具有重要作用，β-catenin细胞的核表达可能有助于大肠癌的预后判断。
-
YAP1基因在脓毒血症大鼠中表达的实验研究
目的:探索HIPPO信号通路中的Yes相关蛋白1(YAP1)基因在脓毒血症大鼠中的表达情况.方法:18只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、脓毒血症组,每组6只,通过盲肠结扎穿孔术构建大鼠脓毒血症模型;采用免疫组化、实时定量逆转录聚合酶联反应(qRT-PCR)、Western Blot技术检测YAP1基因的表达情况.结果:建模48 h后,与正常组和假手术组相比,脓毒血症组大鼠肝脏组织中YAP1基因及蛋白表达水平增加(P＜0.05).结论:HIP-PO信号通路可能参与脓毒血症发生发展的过程.
-
Yap1蛋白在前列腺癌中的表达及其临床病理学意义
目的 探讨Yap1蛋白在前列腺癌中的表达及临床病理学意义.方法 应用免疫组织化学方法检测Yap1在35例前列腺癌组织和16例良性前列腺增生组织中的表达,用平均吸光度值(积分吸光度/面积,IA/area)代表阳性细胞的表达水平；并探讨Yap1与前列腺癌临床病理参数之间的关系.结果 Yap1在良性前列腺增生组的表达水平(IA/area =0.1867 ±0.0753)明显高于前列腺癌组(IA/area=0.0782 ±0.0614),两组差异有统计学意义(P＜0.01,F=16.942)；Yap1蛋白主要表达在细胞质.Yap1蛋白表达程度与前列腺癌的Gleason评分无明显相关(P＞0.05),但Yapl在Gleason 7分组(IA/area =0.0548±0.0441)的表达强度高于Gleason 9分组(IA/area=0.1296±0.0957) (P ＜0.05).结论 前列腺癌中Yap1蛋白低表达可能与前列腺的发生、发展有关.
-
YAP1小干扰RNA对舌鳞状细胞癌生物学特性的影响
目的:探讨小分子RNA干扰(siRNA) YAP1基因对舌鳞状细胞癌生物学特性的影响.方法:培养人舌癌SCC-4细胞,根据转染物不同,分为siRNA-YAP1组、siRNA-对照序列组和空白对照组,实时荧光定量PCR技术检测各组细胞中YAP1基因表达,Western blot法检测各组细胞中YAP1蛋白表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞技术检测各组细胞凋亡情况,划痕实验检测各组细胞迁移能力,Transwell法检测各组细胞侵袭能力.结果:与siRNA-对照序列组和空白对照组比较,siRNA-YAP1组细胞中YAP1 mRNA和蛋白相对表达量均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与siRNA-对照序列组和空白对照组比较,siRNA-YAP1组细胞24 h、48 h、72 h、96 h时A值均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与siRNA-对照序列组和空白对照组比较,siR-NA-YAP1组细胞凋亡率均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与siRNA-对照序列组和空白对照组比较,siR-NA-YAP1组细胞划痕愈合率降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与siRNA-对照序列组和空白对照组比较,siRNA-YAP1组侵袭细胞数减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:特异性沉默人舌癌SCC-4细胞中YAP1基因可抑制细胞增殖,加速细胞凋亡,减少细胞迁移和侵袭能力.
-
miR-590-5p通过靶向抑制YAP1的表达抑制A375恶性黑素瘤细胞侵袭和迁移
目的 探索miR-590-5p在A375恶性黑素瘤细胞中的表达及其对A375细胞侵袭和迁移能力的影响和机制.方法 应用实时定量PCR技术检测A375细胞与人正常黑素细胞中miR-590-5p的表达水平;应用TranswellTM实验和划痕实验检测miR-590-5p对A375细胞侵袭和迁移的影响;应用荧光素酶报告基因实验明确yes相关蛋白(YAP1)是否为miR-590-5p的直接靶分子;应用实时定量PCR及Western blot法检测miR-590-5p对YAP1表达水平的影响.结果 miR-590-5p在A375细胞中的表达水平显著低于正常黑素细胞;与对照(miR-590-5p-NC)组相比,miR-590-5p mimcs组细胞侵袭和迁移能力均受到显著抑制;YAP1为miR-590-5p的直接靶分子;与miR-590-5p-NC组相比,miR-590-5p mimcs组细胞中YAP1 mRNA及蛋白的表达均受到抑制.结论 miR-590-5p在A375细胞中低表达,并通过靶向抑制YAP1的表达调控A375细胞的侵袭和迁移能力.
关键词： miR-590-5P YAP1 侵袭 迁移 恶性黑素瘤 -
MST1与YAP1在食管疾病中的表达及意义
目的 探讨哺乳动物绝育20样激酶1 (MST1)、Yes相关蛋白1(YAP1)在不同类型食管疾病中的表达、临床意义及两者之间的关系.方法 应用免疫组织化学染色方法,检测MST1、YAP1在食管炎、BARRETT食管、食管不典型增生及食管癌组织中的表达.结果 MST1、YAP1在食管炎、BARRETT食管、食管不典型增生及食管癌组织中的表达差异有显著性(x2 =41.938、60.255,P＜0.05).MST1、YAP1在食管癌中表达与病人性别、年龄无关(P＞0.05),而与组织分化程度及淋巴结转移有关(x 2 =5.683～9.038,P＜0.05).MST1与YAP1在食管癌组织的表达呈负相关(r=-0.451,P＜0.05).结论 MST1、YAP1可能在食管炎到食管癌的发病过程中起关键作用,可为食管癌的预防、治疗和预后判断提供新的靶点.
