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谷氨酸增加大鼠海马脑片可溶性淀粉样前体蛋白的释放
目的观察兴奋性神经递质谷氨酸对于可溶性淀粉样前体蛋白(sAPP)释放的影响.方法雄性SD大鼠断头取海马后,于0～4℃Krebs-Ringer液中快速振动切片,37℃预孵育后,置含谷氨酸或不含谷氨酸Krebs-Ringer液(对照)中孵育,于15 000g离心,取上清,用二辛可宁酸法测定总蛋白含量.以Western blot法测定,释放入孵育液中的sAPP.结果正常孵育的海马脑片能够分泌基础量的sAPP,谷氨酸刺激能够导致海马脑片释放sAPP增加,但没导致新蛋白的产生.结论谷氨酸在10-15～10-3mol*L-1浓度范围内,均能导致海马脑片分泌sAPP增加.
关键词： 谷氨酸 可溶性淀粉样前体蛋白 阿尔茨海默病 海马脑片 Western blot -
谷氨酸对皮质与海马脑片sAPP释放促进作用的差异
目的观察谷氨酸对皮质与海马脑片可溶性淀粉样前体蛋白(sAPP)释放促进作用的差异.方法♂SD大鼠断头取皮质与海马后于0～4℃Krebs-Ringer液中快速振动切片,切片于37℃预孵育后置含50μmol·L-1的谷氨酸或不含谷氨酸Krebs-Ringer液(对照)中孵育后于15 000g离心取上清,应用二辛可宁酸法测定上清总蛋白含量;释放入孵育液中的sAPP以Western blot方法测定.结果 50μmol·L-1的谷氨酸作用于皮质与海马脑片后,其释放的sAPP均在97～116KD 之间,sAPP含量都非常低.而皮质中sAPP含量相对较高,且50μmol·L-1的谷氨酸对于其影响较影响海马大.结论 50μmol·L-1的谷氨酸促进sAPP的释放作用对皮质脑片的影响较其对海马脑片的影响显著.
关键词： 谷氨酸 可溶性淀粉样前体蛋白 皮质脑片 海马脑片 Western blot -
精氨酸增加大鼠海马脑片可溶性淀粉样前体蛋白的释放
目的:观察兴奋性神经递质精氨酸对于可溶性淀粉样前体蛋白(sAPP)释放的影响.方法:雄性SD大鼠断头取海马后于0～4℃Krebs-Ringer液中快速振动切片,切片于37℃预孵育后置含精氨酸或不含精氨酸Krebs-Ringer液(对照)中孵育后于1 5 000 g离心取上清液,应用二辛可宁酸法测定上清液总蛋白含量;释放入孵育液中的sAPP以West-ern blot方法测定.结果:正常孵育的海马脑片能够分泌基础量的sAPP,精氨酸刺激能够导致海马脑片释放sAPP增加,但是没有导致新蛋白的产生.结论:精氨酸在10-9～10 μmol/L浓度范围内,均能够导致海马脑片分泌sAPP增加.
关键词： 精氨酸 可溶性淀粉样前体蛋白 阿尔茨海默病 海马脑片 Western blot -
γ氨基丁酸抑制大鼠海马脑片可溶性淀粉样前体蛋白的释放
目的:观察γ氨基丁酸对可溶性淀粉样前体蛋白(sAPP)释放的影响.方法:雄性SD大鼠断头后取海马于0～4CKrebs-Ringer液中作快速振动切片,切片在37 C预孵育后,置于含或不含γ氨基丁酸Krebs-Ringer液中孵育后于15000×g离心15 min取上清,应用二辛可宁酸法测定上清总蛋白含量;释放入孵育液中的sAPP以Western印迹法测定.结果:正常孵育的海马脑片能够分泌基础量的sAPP,γ氨基丁酸(1. 0×109～1.0×103 μmol/L)可导致海马脑片释放sAPP减少,并且没有导致新蛋白的产生.结论:γ氨基丁酸在一定浓度范围内能够抑制海马脑片分泌sAPP.
关键词： γ氨基丁酸 可溶性淀粉样前体蛋白 阿尔茨海默病 海马 -
蛋白激酶C激动剂对可溶性淀粉样前体蛋白分泌的影响
目的观察蛋白激酶C(PKC)激动剂(2S,5S)-(E,E)-8-(5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-2,4-pentadienoylamino)benzo(a)ctam(TPPB)在体外对淀粉样前体蛋白(APP)代谢的影响.方法用不同浓度的TPPB作用于PC12细胞3 h,Western blot检测其对细胞培养上清液内可溶性淀粉样前体蛋白(sAPPα)分泌和细胞内APP表达的影响;并观察加入PKC抑制剂GF109203-X后TPPB对细胞外sAPPα分泌的影响.结果0.1～10 μmol/L的TPPB可以使sAPPα分泌增加,而对细胞本身APP的表达无显著影响(P＞0.05);PKC抑制剂GF109203-X可以部分消除TPPB促进sAPPα分泌的作用.结论PKC激动剂TPPB可以使APP通过α分泌酶增加细胞对sAPPα的分泌,提示TPPB有可能对阿尔茨海默病具有潜在的治疗作用.
关键词： 阿尔茨海默病 蛋白激酶C 淀粉样前体蛋白 可溶性淀粉样前体蛋白 -
齐墩果酸对阿尔茨海默病模型大鼠海马区ADAM10、sAPPα及凋亡相关蛋白bax和bcl-2表达的影响
目的 观察齐墩果酸对阿尔茨海默病模型大鼠海马区α分泌酶(ADAM10)、可溶性淀粉样前体蛋白(sAPPα),以及凋亡相关蛋白bax、bal-2表达的影响,初步探讨齐墩果酸治疗AD可能性作用机制.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组和齐墩果酸组.除假手术组外其他两组采用右侧侧脑室注射聚集态β-淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)片段,造模成功后齐墩果酸组按照20mg·kg-1予以齐墩果酸灌胃,假手术组和模型组予同体积蒸馏水灌胃,灌胃1次/d,连续4周.采用Western bolt检测大鼠海马区ADAM10、sAPPα、bax、bcl-2蛋白的表达.结果 与假手术组相比,模型组海马区ADAM10、sAPPα、bcl-2蛋白表达显著下降,差异具有统计学意义(P ＜0.05);bax表达量显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);与模型组相比,齐墩果酸组大鼠海马区ADAM10、sAPPα、bcl-2蛋白表达显著增加,差异具有统计学意义(P ＜0.05);bax表达显著下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 补肾中药女贞子有效成分齐墩果酸可通过促进AD模型大鼠海马区ADAM10、sAPPα、bcl-2蛋白的表达,抑制bax蛋白的表达进而达到神经保护的作用.
关键词： 阿尔茨海默病 齐墩果酸 α分泌酶 可溶性淀粉样前体蛋白 凋亡相关蛋白
