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阿帕替尼对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响研究
目的 研究阿帕替尼对人肝癌HepG2细胞增殖和迁移能力的影响.方法 将人肝癌HepG2细胞对数生长期的细胞分成对照组和实验组.对照组不予任何处理,实验组分别给予0.01,0.05,0.1,0.5,1.0,5.0,10.0,20.0μmol·L-1的阿帕替尼处理,并测定细胞生长抑制率、移行愈合率,测定细胞内P53、caspase-3和caspase-8的表达情况.结果 实验组细胞生长抑制率分别为(17.11±0.83)％,(27.54±1.02)％,(33.84±0.92)％,(37.43±1.13)％,(41.29±1.87)％,(46.68±1.36)％,(53.42±2.03)％,(70.44±2.58)％,随着药物浓度增加而增强.0.05,0.1 μmol· L-l的阿帕替尼移行愈合率分别为(45.50±4.30)％和(37.50±3.43)％,与对照组的(84.60±6.88)％比较,差异有统计学意义(P＜0.01).2.1μmol·L-1阿帕替尼组P53为(112.31±6.53)％,caspase-3为(137.93±10.01)％,caspase-8为(104.63±3.89)％,4.2μmol·L-1阿帕替尼组P53为(147.69±9.67)％,caspase-3为(306.89±20.15)％,caspase-8(139.09±8.82)％ (P ＜0.01).结论 阿帕替尼可以抑制人HepG2肝癌细胞后肿瘤细胞的生长和迁移愈合,其机制可能是上调了P53、caspase-3和caspase-8的表达.
关键词： 肝癌细胞系HepG2 阿帕替尼 抑制作用 -
Twist1与Bcl-2协同促进肝癌细胞EMT过程中的miRNA表达谱变化
目的:为研究Twist1和Bcl-2协同诱导上皮间充质转变(EMT)发生直接相关的microRNA(miRNA)提供线索.方法:构建Twist1和Bcl-2表达质粒,单独转染或共转染获得过表达Bcl-2、过表达Twist1和共同过表达Twist 1/Bcl-2肝癌细胞模型,在此基础上结合miRNA芯片分析单独过表达或共过表达Twist 1/Bcl-2可引发的miRNA表达谱变化.结果:共过表达Twistl/Bcl-2可引起肝癌细胞多个miRNA发生明显表达变化,数据结果差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:Bcl-2与Twist1协同作用可引起广泛的miRNA发生明显的表达变化进而调控多个下游靶基因活性,从而改变肿瘤的多种生物学行为.
关键词： miRNA芯片 肝癌细胞系HepG2 Twist1 Bcl-2 -
Aes对肝癌细胞恶性生物学行为的影响
背景与目的:Aes(amino-terminal enhancer of split,Aes)是一种能够与转录因子结合调节转录活性的蛋白,以往的研究显示其在发育过程中起重要作用,近期研究发现Aes可参与结肠癌转移.本研究旨在观察外源Aes在肝癌细胞中的定位以及其对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法:构建pEGFPAes表达载体,并通过LipofectamineTM2000将其转入Aes低表达的肝癌细胞系HepG2中,蛋白质印迹法(Westernblot)检测外源Aes的表达,荧光显微镜观察pEGFP-Aes在细胞中的定位,应用细胞计数盒(Cell CountingKit)-8检测转染Aes后细胞增殖活力变化;划痕实验检测转染前后细胞迁移能力的变化;Transwell实验检测Aes对细胞侵袭能力的影响.结果:Aes在HepG2中表达较低,将Aes转入肝癌细胞系HepG2,Aes在细胞核和细胞质中都有表达,并且在细胞核中形成点状浓积,Aes对肝癌细胞HepG2的增殖无显著影响,但能抑制HepG2的侵袭和迁移能力(P<0.05).结论:Aes对肝癌细胞恶性表型的影响主要是抑制其侵袭和迁移能力.
关键词： AES 肝癌细胞系HepG2 侵袭 迁移 -
乳糖脂修饰苦参碱脂质体的肝靶向性和体外抑瘤作用研究
目的:制备乳糖酰磷脂酰乙醇胺修饰的苦参碱脂质体(Lactosaminated matrine liposomes,LML),考察其在小鼠体内的肝靶向性,并研究其对人肝癌细胞系HepG2细胞的体外抑制作用.方法:采用逆向蒸发-短时超声法制备苦参碱脂质体Matrineliposomes,ML),合成乳糖酰磷脂酰乙醇胺并用其修饰苦参碱脂质体得到乳糖脂苦参碱脂质体.考察其包封率及粒径,应用反相高效液相色谱法测定小鼠体内各组织中的苦参碱含量,通过MTT法检测LML对人肝癌细胞系HepG2的体外抑制作用.结果:LML形态均匀,粒径分布范围为80～150 nm,包封率为48.1%.与苦参碱溶液(Matrine solution,M-sol)相比,普通苦参碱脂质体及乳糖脂苦参碱脂质体的体内循环时间明显延长,且乳糖脂苦参碱脂质体的肝脏药-时曲线下面积(Area undercurve,AUC)值相对于苦参碱脂质体和苦参碱溶液具有显著性差异(P<0.05) . LML组中的肝脏相对于其它脏器的靶向效率(Targeting effi-ciency,Te)值均大于1,是脾脏的2.7倍,是肺脏的3倍,是肾脏的6.6倍,是心脏的8.5倍,具有显著性差异(P<0.01)>MTT法分析发现,当浓度为0.5 mg/ml时,LML、ML及M-sol对人肝癌HepG2细胞的杀伤率分别为51.97%、31.89%和28.34%,前一组与后两组之间有显著差异(P<0.05).结论:本研究制备的乳糖脂苦参碱脂质体具有较好的体内肝靶向性和体外抑瘤作用,有望成为一种新型靶向抗肝癌药物.
关键词： 乳糖酰磷脂酰乙醇胺 苦参碱 脂质体 肝靶向性 肝癌细胞系HepG2
