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丹酚酸B及二甲酯在人肝微粒体中代谢稳定性研究及代谢产物鉴定
目的:对比丹酚酸B(SAB)和丹酚酸B二甲酯(DMB)在人肝微粒体中的代谢稳定性,并鉴定DMB的代谢产物.方法:应用体外人肝微粒体孵育体系,采用HPLC-MS/MS法测定两者的剩余浓度,考察SAB和DMB的代谢稳定性,并鉴定代谢产物.结果:SAB在人肝微粒体孵育中不代谢;DMB在人肝微粒体和空白孵育液中各得到了4个代谢产物,其中有2个产物相同.结论:SAB在人肝微粒体中稳定;DMB在人肝微粒体和空白孵育液中均不稳定,且人肝微粒体中的代谢速率比空白孵育液快,代谢主要途径为酯键水解.
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汉坦病毒核蛋白核心区域高效表达及产物鉴定
汉坦病毒是引起肾综合征出血热(HFRS)的主要病毒,汉坦病毒的基因由 L、M、S 三个片段构成,分别编码病毒RNA聚合酶, 囊膜核蛋白G1和G2及核衣壳蛋白(简称核蛋白,Nucleocapsid Protein, NP).
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如何防止PCR室的污染
进行PCR 操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现.1.合理分隔实验室:将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行,特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其它步骤严格分开.好能划分:①标本处理区;②PCR反应液制备区;③PCR循环扩增区;④PCR产物鉴定区.其实验用品及吸样枪应专用.实验前应将实验室用紫外线消毒以破坏残留的DNA或RNA.