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不同区域淡色库蚊对杀虫剂的抗性检验研究
目的:了解金华市城区、郊区、农村和山区四个不同区域淡色库蚊对6种常用杀虫剂的抗药性水平,为研究蚊虫抗性产生机制及科学合理使用杀虫剂提供依据.方法:采用药液浸渍法,测定4龄期幼虫半数致死浓度(LC<'50>).结果:金华市各区域淡色库蚊对氯菊酯抗性倍数高,均大于10倍,属中抗以上水平;对仲丁威和胺菊酯的抗性倍数较低,均小于4倍,属低抗水平.四个区域中,农村淡色库蚊对各种杀虫剂的抗性高,其中对氯菊酯、高效氯氰菊酯和溴氰菊酯的抗性倍数均大于10倍.金华市不同区域间自然种群的抗性比较差别无统计学意义(F=0.583,P=0.678);自然种群对不同杀虫剂间抗性发展水平表现不一致,经方差分析差别有统计学意义(F=9.136,P=0.000).结论:金华市淡色库蚊对6种常用杀虫剂产生了不同程度的抗性,对氯菊酯高,对胺菊酯、仲丁威普遍敏感,应加强对菊酯类杀虫剂的抗性监测及科学合理使用.
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全自动酶标仪测定淡色库蚊抗药性应用研究
[目的]根据蚊虫抗性产生的生化机制,利用生化检测法讨论蚊虫体内酯酶与抗性的关系,测定非特异性酯酶(Non-specific esterase,NSE)活性以判断其抗药性,探讨检测蚊虫抗药性敏感快速的检测方法.[方法]分别以α-乙酸萘酯和β-乙酸萘酯为底物,固蓝B盐为显色剂,用酶标板测定蚊虫NSE的活性,在酶标仪上读取OD值,同时用生物测试法检测LC50作为对照.[结果]现场品系淡色库蚊NSE活力均高于敏感品系,与生物测试结果相一致.[结论]使用全自动酶标仪可以快速测定淡色库蚊体内NSE活性,简单易行,可以作为一种淡色库蚊抗药性检测方法,以便推广应用.
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金华市淡色库蚊抗药性相关基因特征研究
目的 了解金华市淡色库蚊对杀虫剂的抗性基因,分析蚊虫抗性形成的机制,为蚊虫防制提供依据.方法 采用PCR技术检测,利用Vector序列分析软件进行比对分析.结果 金华市淡色库蚊现场品系与敏感品系抗性相关基因中vssc基因序列差异较大,序列相似度仅有84.1％;Est-2基因、ace1基因和cyp6f1基因序列分别存在4个、2个和1个核苷酸的差异;NYD-GBE、NYD-MLC2基因序列无差异.通过将发生点突变的基因序列翻译成氨基酸序列再进行比对发现,Est-2基因、ace1基因和cypf1基因的点突变均为无意突变,不会导致氨基酸序列变化.结论 本研究中检测的6个基因片段中,金华市淡色库蚊现场与敏感品系的氨基酸序列完全相同.
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郑州市须水镇城区淡色库蚊种群调查
淡色库蚊是我国城乡常见的蚊种，它不但吸食人血，妨碍人们的工作和休息，而且还传播乙型脑炎、疟疾、登革热等多种传染病［1-2］，对人类的危害很大。该蚊种群数量主要与当地温度、湿度、时间、空间等环境条件的变化关系密切［3-5］。为了解和掌握近年来郑州地区淡色库蚊种群动态变化规律，便于控制和消灭该蚊，保障人民身体健康，作者于2007年至2010年的6～9月在郑州须水镇城区对淡色库蚊进行了详细的调查研究，结果如下。
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诱蚊诱卵器与BGS-TRAP捕蚊器应用效果研究
[目的]有效评价诱蚊诱卵器与BGS-TRAP捕蚊器的现场应用效果,探索适合于登革热媒介蚊虫白纹伊蚊及开封地区优势蚊种淡色库蚊的监测方法.[方法]在2017年4月至11月蚊数量高峰季节,选择苗圃、猪圈、居民小区、学校、单位等绿化地带,用BGS-TRAP捕蚊器和诱蚊诱卵器同步比较诱蚊效果.[结果]在现场BGS-TRAP捕蚊器主要捕获蚊种为淡色库蚊和白蚊伊蚊,符合成蚊密度的季节消长特征.开封地区的优势蚊种为淡色库蚊,在6月份密度达到高峰,而白纹伊蚊在4月份出现,数量逐渐上升,在9月份达到高峰,而后逐渐下降,淡色库蚊成蚊捕获量明显高于白纹伊蚊.诱蚊诱卵器主要收集到的是白纹伊蚊的卵和幼虫,对成蚊的诱捕效果较差.诱蚊阳性率5月份为5％,以后诱蚊阳性率逐渐上升,在9月份达到高值36％,然后逐渐下降,11月份降为0％,白蚊伊蚊的诱蚊阳性率与成蚊捕获数量变化趋势一致.[结论]现场试验初步证明,BGS-TRAP捕蚊器对成蚊的诱捕效果较好,诱蚊诱卵器对白纹伊蚊虫卵的捕获效果较好.
关键词： 诱蚊诱卵器 BGS-TRAP捕蚊器 白纹伊蚊 淡色库蚊 -
济宁城区淡色库蚊对常用杀虫剂的抗性研究
目的 研究山东省济宁市城区淡色库蚊对常用杀虫剂的抗药性,为城市媒介蚊虫的防治提供参考依据.方法 在媒介蚊虫流行季节,采集城区淡色库蚊幼虫,利用幼虫浸渍法,测定淡色库蚊对常用杀虫剂的LC50,计算淡色库蚊幼虫对常用杀虫剂的抗性指数.结果 淡色库蚊幼虫对残杀威、敌敌畏、三氯杀虫酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯的LC50分别为1.240 45、0.473 88、2.153 26、0.048 09、0.040 56 ppm,与敏感品系比较,济宁城区淡色库蚊对残杀威、敌敌畏、三氯杀虫酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯的抗性指数分别为10.93、4.97、10.16、200.38、337.98.结论 济宁市城区淡色库蚊对常用杀虫剂均已产生抗药性,其中对菊酯类杀虫剂的抗性水平高,为延缓媒介蚊虫抗药性的发展,应轮换使用杀虫剂或选择微生物制剂防治蚊幼虫.
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植物粗提物对淡色库蚊幼虫的生物活性
目的 筛选对淡色库蚊有生物活性的植物资源,为植物源农药的开发研制提供理论依据.方法 分别利用水、乙醇和丙酮3种溶剂提取植物的有效成分,测定不同溶剂植物粗提物对淡色库蚊幼虫的生物活性,挑选12种效果好的植物,进一步研究其乙醇提取物对淡色库蚊幼虫的毒杀效果.结果 55种供试植物中有43种植物对淡色库蚊幼虫有生物活性,12种植物的乙醇提取物24 h对淡色库蚊幼虫的LC50＜3 mg/ml,其中7种植物的LC50＜1mg/ml.结论 自然界中对淡色库蚊有生物活性的植物种类多,为植物源农药的开发研制提供了资源.
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铁反应元件结合蛋白2基因在抗性及敏感品系淡色库蚊中表达量的分析
目的 进行不同品系的蚊中铁反应元件结合蛋白2(IREBP2)基因表达量的分析.方法 根据二维电泳获得的肽段序列,设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在抗性及敏感品系蚊的表达水平差异.结果 成功扩增淡色库蚊IREBP2基因的片段,荧光定量PCR表明IREBP2基因在抗性品系中的表达量是敏感品系的10.27倍.结论 淡色库蚊的IREBP2基因可做为新的抗性检测及治理的基因靶标.
关键词： 淡色库蚊 铁反应元件结合蛋白2 荧光定量PCR -
淡色库蚊性别差异表达cDNA文库的构建和分析
目的 为探讨媒介与病原、媒介与宿主的相互作用,建立传播疾病的淡色库蚊性别差异表达cDNA文库,从而筛选阻断疾病传播的疫苗候选分子.方法 以淡色库蚊雌蚊成蚊为检测方(Tester)、雄蚊成蚊为驱动方(Driver),进行正向抑制性消减杂交;以雄蚊成蚊为Tester、雌蚊成蚊为Driver,进行反向抑制性消减杂交.将获得的正向抑制性消减杂交产物克隆入pGEM-T easy vector,并以菌液PCR扩增鉴定插入片段.随机抽取100个阳性克隆进行DNA序列分析.并将所得ESTs序列进行在线BLAST分析.结果 从100个阳性克隆中测得98个ESTs序列,在测定的序列中与已知基因具有同源性的有57个,其余41个ESTs与已知基因不具有同源性.结论 抑制性消减杂交技术建立雌蚊特异性基因文库,发现了淡色库蚊雌蚊新的ESTs序列,为性别相关基因的功能及性别调控,探讨媒介与病原、媒介与宿主的相互作用及其筛选传播阻断疫苗候选分子的研究奠定了基础.
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淡色库蚊酯酶B1探针制备、测序及现场抗性检测
目的 制备淡色库蚊酯酶B1探针,应用于现场抗性检测.方法 设计酯酶B1上下游引物,5’端地高辛标记,PCR法制备DNA探针及测序,斑点杂交检测各现场蚊虫抗性.结果 找出合适的区分抗性与敏感品系的探针浓度,使抗性与敏感品系杂交点的阳性率有差别.应用酯酶BI探针检测各个现场蚊虫,唐口种群的杂交阳性率为31％,微山种群的杂交阳性率为34％,滕州种群的杂交阳性率为48％.结论 应用酯酶B1探针能够检测各现场蚊虫抗性水平.该方法灵敏度高,特异性强,简便实用,为媒介昆虫有机磷杀虫剂抗性分子生物学检测的实用性研究打下了基础.
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淡色库蚊幼虫对三氯杀虫酯和残杀威敏感性观察
目的 探讨淡色库蚊幼虫不同发育阶段对杀虫剂的敏感性变化,为科学合理地进行蚊虫化学防治提供依据.方法 参照WHO生物测定方法测定淡色库蚊敏感品系、抗三氯杀虫酯品系、抗残杀威品系Ⅰ～Ⅳ幼虫的抗药性.结果 淡色库蚊抗三氯杀虫酯品系Ⅰ龄、Ⅱ龄、Ⅲ龄、Ⅳ龄幼虫的抗性指数依次为4.35、11.84、16.43、17.28;抗残杀威品系Ⅰ龄、Ⅱ龄、Ⅲ龄、Ⅳ龄幼虫的抗性指数依次为2.39、6.26、9.58、11.21.结论 蚊幼虫随着个体发育对杀虫剂的敏感性水平逐渐降低,在蚊虫化学防治中应选择敏感的低龄阶段施药.
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淡色库蚊抗残杀威品系及抗DDVP品系抗性发展研究
目的 探讨淡色库蚊残杀成抗性品系对几种化学杀虫剂的抗性发展及交互抗性,为合理使用杀虫剂提供依据.方法 采用WHO标准生物测试法,计算LC50、回归方程及抗性指数.结果 经过43代的选育,抗残杀威品系的抗性达11.21倍.在21代时,对残杀威、DDVP、氯氰菊酯、三氯杀虫酯、溴氰菊酯的抗性倍数分别是9.54、2.68、7.00、1.74、1.70倍;到第30代时,分别是11.34、2.85、8.07、2.00、1.80倍;到39代时,对残杀威抗性为11.78倍.对DDVP、氯氰菊酯的抗性分别为3.35倍、9.71倍.经过43代的选育,抗DDVP品系的抗性达12.17倍,在21代时,对DDVP、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯的抗性倍数分别是6.55、4.16、43.27、0.70倍;到第30代时.分别是8.17、4.74、52.48、0.75倍;到39代时,对DDVP的抗性为10.37倍,对残杀威、氯氰菊酯的抗性分别为6.96倍、160.43倍.结论 长期使用一种杀虫剂易产生抗性,亦对其他杀虫剂产生交互抗性,用药时应注意种类的选择.
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三种抗性品系淡色库蚊对五种杀虫剂的交互抗性
目的 了解淡色库蚊对化学杀虫剂的交互抗性,为合理有效地进行蚊虫化学防治提供依据.方法 采用WHO生物测定方法测定3种抗性品系淡色库蚊对5种杀虫剂的抗性.结果 DDVP抗性品系淡色库蚊抗性水平为8.38倍,对氯氰菊酯、三氯杀虫酯、残杀威和溴氰菊酯的抗性分别为52.50倍、7.61倍、4.74倍和0.75倍;残杀威抗性品系淡色库蚊抗性水平为11.34倍,对氯氰菊酯、DDVP、三氯杀虫酯和溴氰菊酯的抗性分别为8.08倍、2.85倍、2.00倍和1.80倍;氧氰菊酯抗性品系淡色库蚊抗性水平为243.00倍,对溴氰菊酯、三氯杀虫酯、残杀威和DDVP的抗性分别为28.90倍、17.28倍、1.49倍和1.38倍.结论 蚊虫对某种杀虫剂产生抗性后,可能对其它杀虫剂也产生不同的交互抗性,用药前应作抗性测定,注意选择药物品种和确定使用剂量.
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淡色库蚊DDVP抗性选育及交互抗性的实验研究
目的 探讨淡色库蚊DDVP抗性选育后抗性发展状况以及对3种化学杀虫剂的交互抗性,为合理使用杀虫剂提供依据.方法 采用WHO标准生物测试法计算LC50,回归方程和抗性指数.结果 经过43代的选育,抗DDVP品系的抗性达12.17倍,在21代时,对DDVP、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯的抗性倍数分别是6.55、4.16、43.27、0.70倍;到第30代时,分别是8.17、4.74、52.48、0.75倍;到39代时,对DDVP的抗性为10.37倍,对残杀威、氯氰菊酯的抗性分别为6.96倍、160.43倍.结论 长期使用一种杀虫剂易产生抗性,亦对其他杀虫剂产生交互抗性,用药时应注意种类的选择.
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山东省班氏丝虫病防治后期传播潜势的研究
目的探讨山东省班氏丝虫病达到基本消灭后期其传播流行的潜势. 方法在不采取防治措施的情况下,进行10年病原、蚊媒和血清学纵向研究. 结果班氏丝虫病微丝蚴(mf)率由1980年基本消灭第1年的0.31%,降至第10年的0.01%;蚊媒自然感染率在第1年的0.15%,到第9～10年时均降至0;人群丝虫抗体阳性率由第7年6.85%下降至第10年的1.56%.结论在基本消灭丝虫病后,当监测点mf率在0.17%～1.15%,残存mf血症者mf密度为1～50条/120μl时,在不采取防治措施的情况下,班氏丝虫病传播趋于阻断.
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常用杀虫剂配用氧化胡椒基丁醚杀灭淡色库蚊的研究
目的了解常用杀虫剂与增效剂氧化胡椒基丁醚(S1)混用对山东省三个不同地区现场淡色库蚊的毒力及增效作用. 方法采用WHO生物测试法,计算几种常用杀虫剂配用S1对淡色库蚊的LC50、回归方程及增效系数.结果残杀威+S1、氯氰菊酯+S1、DDVP+S1复配增效系数分别在2.23～8.02之间、2.53～5.76之间和2.39～10.14之间,显示出较好的增效作用. 结论当淡色库蚊产生抗药性后,采用杀虫剂与氧化胡椒基丁醚混用的方法,可以减少杀虫剂的使用剂量,取得较好防治效果.
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残杀威选育淡色库蚊抗药性研究
目的实验选育抗性品系的蚊虫,探讨抗药性的发生发展规律,为抗性媒蚊的防制研究提供依据.方法在实验室条件下,用残杀威以LC50的剂量处理Ⅳ龄幼虫,选育残杀威抗性品系.按照WHO生物测定法,测定抗残杀威品系对多种杀虫剂的敏感性. 结果选育到23代时,抗性比敏感品系增加11.12倍,之后抗性趋于稳定.通过测定发现残杀威抗性品系对其它化学杀虫剂有交互抗性.讨论使用杀虫剂可在短期内使蚊虫产生抗性,抗性水平增长较快,而且对作用机理相近的杀虫剂也产生交互抗性.
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残杀威与增效剂混用杀灭淡色库蚊幼虫效果观察
目的观察残杀威与增效剂复配对山东省不同地区现场淡色库蚊幼虫的杀虫效果,为保护和有效使用杀虫剂提供科学依据.方法采用WHO生物测试法.以残杀威与增效剂复配对山东滕州市、泰安市和济宁市唐口镇三现场淡色库蚊幼虫进行杀虫测试.并计算LC50、回归方程、增效系数.结果残杀威+S1增效系数在2.23～8.02之间,残杀威+S2增敦系数在2.19～9.49之间,残杀威+增效胺增效系数分别为 1.06～2.44之间,显示出较好的增效作用.结论当淡色库蚊对残杀威产生抗药性后,应用氨基甲酸酯类杀虫剂与增效剂混用的方法,能取得较好的防治效果,值得推广应用.
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敌敌畏抗性淡色库蚊酯酶B1、A2探针制备及应用
目的制备敌敌畏抗性品系淡色库蚊酯酶B1、A2探针,并应用于抗性品系及敏感品系的检测. 方法分别设计酯酶B1、A2上下游引物,5'端地高辛标记,PCR法制备DNA探针,分子杂交检测各个品系淡色库蚊. 结果摸索出合适的区分抗性与敏感品系的探针浓度,在该浓度下各品系杂交点的阳性率有差别.应用酯酶B1探针检测各品系蚊虫,抗敌敌畏品系的阳性率为40.0%,抗残杀威品系的阳性率为23.3%,抗氯氰菊酯品系的阳性率为18.3%,敏感品系的阳性率为11.7%;应用酯酶A2探针检测各品系蚊虫,抗敌敌畏品系的阳性率为43.3%,抗残杀威品系的阳性率为25.0%,抗氯氰菊酯品系的阳性率为21.7%,敏感品系的阳性率为15.0%. 结论应用酯酶B1、A2探针能够区分抗性品系,因此能够用于抗性的测定.从而为抗有机磷类杀虫剂媒介昆虫基因检测的实用性和抗性分子生物学机制的研究打下基础.
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山东省淡色库蚊抗药性调查及防制对策的研究
目的掌握山东省不同地区淡色库蚊对常用化学杀虫剂的抗性状况,为制定防治对策提供依据. 方法采用WHO生物测定法. 结果全省部分地区现场淡色库蚊对所测杀虫剂均产生了不同程度的抗药性,其抗性指数以氯氰菊酯高,达135.48倍,其次为溴氰氰菊酯、DDVP、DDT;不同地区淡色库蚊对不同的杀虫剂的抗性也有较大差异且在连续几年调查中均呈逐年增高趋势. 结论应加强蚊虫抗药性监测,并根据具体情况,采用适宜防蚊方法,合理的使用杀虫剂,预防或减缓淡色库蚊对杀虫剂抗性的产生和发展.
