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NorA多药耐药外排泵抑制剂研究进展
目的 综述了NorA多药耐药外排泵的生物学特征及其抑制剂的研究进展.方法 以近几年国内外有代表性的论文为依据,进行分析、整理和归纳.结果 与结论NorA泵是由NorA蛋白介导的多药耐药外排泵,受多种调节因素的调控,可以外排多种化学结构不相关的底物,是金黄色葡萄球菌为代表的多种细菌耐药的主要原因之一.因此,研究NorA外排泵的外排机制,开发其有效抑制剂对克服细菌多药耐药性具有重要意义.
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穿心莲和水飞蓟抑制MRSA41577外排系统的作用机制
目的：研究穿心莲和水飞蓟抑制MRSA41577外排系统的作用机制。方法通过荧光分光光度法检测穿心莲和水飞蓟为MRSA41577外排系统的抑制剂；通过PCR的方法检测MRSA41577的norA外排基因；通过RT－PCR的方法检测穿心莲和水飞蓟对外排基因norA表达量的影响。结果穿心莲和水飞蓟处理MRSA41577后，环丙沙星在菌体内的的蓄积量随着药物处理时间的增加而增加，当药物处理菌体12 min后，与对照组相比，菌体内环丙沙星蓄积量分别增加49％和76％（ P＜0．05），其作用效果优于阳性对照利血平。 MRSA41577菌株内含有norA外排基因。穿心莲和水飞蓟能降低norA基因表达量，与对照组相比，norA 的相对表达量分别降低了35％和42％（P＜0．05）。结论穿心莲和水飞蓟抑制MRSA41577外排系统的作用机制是通过减少norA 外排基因的表达量，进而抑制外排蛋白的合成，阻止药物的外排使菌体重新恢复对药物的敏感性。
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 外排系统 NorA 作用机制 -
国内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因特征 Meta 分析
目的：采用 Meta 分析，综合评价中国耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐消毒剂基因特征。方法计算机检索中国知网（CNKI）、万方医学网、PubMed、EMbase 等数据库，查找中国 MRSA 耐消毒剂基因特征的相关文献，按照统一的纳入与排除标准筛选文献后，采用 R 3．1．1软件、RevMan 5．3软件进行 Meta 分析。结果共纳入42篇文献，我国16个省（直辖市）的2671株 MRSA 耐消毒剂基因情况。Meta 分析结果显示：qacA／B、qacC、qacJ 和norA 基因的合并检出率分别为28．03％（95％CI ：20．03％～36．48％）、8．94％（95％CI ：1．27％～ 22．49％）、17．74％（95％CI ：2．25％～43．39％）和17．90％（95％CI ：0．00％～76．38％）。qacEΔ1、qacG、qacH 的检出率均为0。中国淮河以南、以北地区 qacA／B 基因的合并检出率分别为27．12％（95％ CI ：19．03％～36．06％）和30．14％（95％CI ：13．11％～50．63％），南北地区差异无统计学意义（Z ＝0．59，P ＞0．05）。东部、中部、西部经济区域的qacA／B基因的合并检出率分别为29．95％（95％CI ：21．85％～38．73％）、22．65％（95％ CI ：10．08％～38．47％）和26．94％（95％CI ：3．78％～60．95％），组间差异均无统计学意义（P ＞0．05）。医院获得性 MRSA 与社区获得性 MRSA qacA／B 基因检出率比较，差异无统计学意义[OR 及95％CI 为0．69（0．14～3．31），P ＝0．64]。MRSA qacA／B 基因检出率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）[OR 及95％CI 为4．99（3．53～7．06），P ＜0．01]。结论中国MRSA 耐消毒剂基因检出率高，MRSA 耐消毒剂基因是一个常见且严重的问题，应加强耐消毒剂基因的监测，合理使用消毒剂。
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多药耐药膜蛋白NorA在大肠埃希菌中过量表达及转运功能研究
目的 研究膜转运蛋白NorA的转运机制以及抑制剂对其转运机制的影响.方法 将NorA重组表达在大肠埃希菌中,采用微孔板法测定表达菌株对于数种奎诺酮类抗生素的小抑菌浓度;后通过对比NorA过量表达菌株与对照组在诺氟沙星和/或NorA抑制剂胡麻碱存在时的生长情况,对其转运功能以及抑制剂对转运功能的阻碍进行研究;后将在大肠埃希菌中过量表达的NorA采用去污剂进行分离纯化.结果 NorA表达菌株对于诺氟沙星和环丙沙星的小抑菌浓度明显降低,但对司氟沙星的敏感度不变.NorA抑制剂胡麻碱的存在可显著阻断NorA的转运功能.NorA在大肠埃希菌中被成功表达纯化,产量可达到0.5~1 mg/L培养物,且纯度可达90%.这为治疗由于NorA过量表达导致的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染治疗提供了借鉴意义,同时为今后对NorA的功能研究奠定了基础.结论 NorA的表达可导致细菌对奎诺酮类抗生素的耐药,但其抑制剂胡麻碱可阻断NorA的转运功能.
