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褪黑素对大鼠急性脊髓损伤内质网应激蛋白GADD153/CHOP表达的影响
目的 探讨褪黑素(MT)对急性脊髓损伤(ASCI)大鼠模型脊髓组织GADD153/CHOP表达的影响.方法 选取健康SD大鼠96只,随机分为生理盐水处理组(NS组)、乙醇处理组(ET组)及褪黑素治疗组(MT组)各32只.所有大鼠均以改良Allen法制备脊髓损伤模型;MT组在模型制备的基础上给予褪黑素治疗;ET组在模型制备的基础上给予5%乙醇处理;NS组在模型制备的基础上给予0.9%氯化钠溶液处理.分别于伤后3 h、1 d 、3 d、7 d时各取8只应用改良 Tarlov评分法评价其神经功能;Tarlov评分后处死,取受损节段脊髓行HE染色及免疫组化染色,观察形态学改变和CHOP表达的特点;并应用TUNEL方法检测神经细胞凋亡情况.其量的评定借助于麦克奥迪数码医学图像分析系统A(Motic.med 6.0)软件,结果分别用累积光密度(IOD)及细胞凋亡指数(AI)来表示.结果 所有实验大鼠脊髓组织均有不同程度出血、水肿、细胞凋亡及坏死.MT组Tarlov评分除3 h时间点外,其他各时间点Tarlov评分明显高于ET组及NS组,且差异有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01).MT组与ET、NS组不同时间点CHOP表达、细胞凋亡差异有统计学意义,表现为除3 h时间点外,其他各个时间点MT组CHOP表达及细胞凋亡均明显低于其余两组(P < 0.05).而ET、NS组之间各时间点CHOP表达、细胞凋亡比较,差异无统计学意义(P > 0.05).结论 MT可抑制CHOP表达,降低脊髓细胞凋亡指数,可能为其发挥急性脊髓损伤保护作用的重要机制之一.
关键词： 褪黑素 急性脊髓损伤 GADD153/CHOP 细胞凋亡 药物治疗 -
内质网应激相关蛋白GADD153/CHOP在系膜增生性肾炎肾组织中的表达及中药干预研究
目的:研究系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)大鼠肾脏组织内质网应激相关蛋白生长停滞及DNA损伤基因153 (GADD153) /C-EBP同源蛋白(CHOP)的表达、中药保肾颗粒对GADD153/CHOP表达的干预效果,探讨保肾颗粒治疗系膜增生性肾小球肾炎的作用机制.方法:大鼠随机分为中药组、对照组、模型组、空白组,中药组给予保肾颗粒、对照组给予雷公藤多甙片灌胃、空白组和模型组以等量生理盐水灌胃,连续14周.于造模后给药前1d及实验结束后,检测各组大鼠血清肌酐(SCr),TUNEL检测大鼠肾脏细胞凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)及Western blot法检测肾组织GADD153/CHOP的表达.结果:与模型组比较,对照组和中药组SCr均显著下降(P＜0.05).空白组肾组织细胞凋亡不明显,模型组有大量的肾组织细胞凋亡,中药组及对照组凋亡较轻.与模型组比较,中药组及对照组GADD153/CHOP及GADD153/CHOPmRNA表达水平下降(P＜0.05).结论:MsPGN大鼠肾组织GADD153/CHOP表达增高,提示内质网应激可能参与了肾脏损害;而保肾颗粒对MsPGN大鼠肾组织GADD153/CHOP过度表达有较好的抑制作用,且作用与雷公藤多甙片相当,是减轻肾脏损害的重要机制之一.
关键词： 系膜增生性肾小球肾炎 GADD153/CHOP 内质网应激 中药 保肾颗粒 雷公藤多甙片 正虚标实 肾虚 肾络 -
epoxomicin可诱发前列腺癌细胞内质网应激蛋白GADD153促进细胞凋亡
目的 探讨蛋白酶体抑制剂(epoxomicin,EPO)诱导前列腺癌DU145细胞凋亡及其与GADD153/CHOP的关系.方法 不同浓度的EPO处理DU145不同时间,MTS检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率情况;Real-timePCR检测内质网应激的相关分子GADD153、GRP78 mRNA以及Western blot方法检测GADD153、GRP78蛋白表达情况;转染GADD153siRNA从而沉默基因GADD153,通过基因转录水平及蛋白水平检测GADD153证实转染是否成功;转染GADD153后,通过MTS法及流式细胞仪技术检测细胞增殖情况及凋亡情况.结果 EPO抑制DU145细胞生长,并呈现剂量、时间依赖.处理组细胞凋亡率高于未处理组,高剂量组凋亡率高于低剂量组.EPO处理后GADD153,GRP78基因转录水平随时间逐渐升高,72 h为明显.GADD153、GRP78蛋白在EPO处理后不断增加,均在72 h增加到高,且低剂量与高剂量组在72 h差异有统计学意义(P＜0.05).转染GADD153siRNA后,GADD153基因转录水平及蛋白表达水平明显降低,其中GADD153siRNA 50 nmol/L为明显.沉默基因GADD153后,EPO处理DU145细胞,其细胞数目的减少部分被阻断,细胞凋亡部分被阻断.结论 蛋白酶体抑制剂epoxomicin能抑制DU145细胞生长,诱导凋亡,其机制可能与激活内质网应激,诱发内质网的相关分子GADD153表达有关.
关键词： 蛋白酶体抑制剂 GADD153/CHOP GRP78 内质网应激
