首页 > 文献资料
-
酵母三杂交系统的研究进展
蛋白质与RNA分子之间的相互作用为生命活动的重要基础.由于蛋白质和RNA分子结合方式的复杂性,局限了蛋白质和RNA相互作用的研究.随着酵母三杂交系统的出现,蛋白质-RNA相互作用的研究也将步入一个新的时期.本文着重介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、局限性及其改进,假阳性结果的对策,并展望了该系统进一步的发展.
关键词： 酵母三杂交系统 蛋白质-RNA相互作用 进展 -
从放线菌发酵液中高通量筛选端粒酶抑制剂
目的 从2 000多株放线菌发酵液中高通量筛选特异性端粒酶抑制剂.方法 经对持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型即3株酵母菌PCR验证后,将其接种于含3-AT、组氨酸缺乏的酵母培养液,然后分别调整其菌液浓度和筛选样品剂量,以备高通量筛选.将酵母菌液移于96孔板,加入待测样品,振摇培养并定时经多功能微孔板分析仪进行定量分析,选取抑菌率大于0.45的样品进行复筛.结果 经验证所持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型均可用于下一步的筛选,并选取酵母菌液OD_(595nm) 0.04做为起始筛选浓度,选取放线菌发酵液剂量为5 ml,通过对放线菌发酵液进行初筛和复筛,发现了14株放线菌发酵液的抑菌效率超过0.45.结论 该研究首次高通量筛选端粒酶抑制剂,方法简便快捷,筛选结果稳定可靠,并筛选到14株放线菌发酵液可能具有抗肿瘤活性,为进一步研究和开发抗肿瘤新药奠定基础.
-
酵母三杂交系统:一种在真核细胞水平研究RNA-蛋白质相互作用的有效方法
RNA-蛋白质之间的相互作用是真核细胞RNA在细胞内执行其功能的基础,这种相互作用在基因表达的多个水平上均发挥着重要的调控作用.要研究RNA对基因表达的调控就必须对RNA-蛋白质之间相互作用的方式进行研究.本文介绍的酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)是一种近年来在酵母双杂交系统的基础上发展而来的,可用于鉴定先前未知的,在自然界中存在且具有生物学意义的RNA-蛋白质相互作用的实验方法.该方法提供了一个在真核细胞内研究RNA-蛋白质相互作用的技术平台.它可以根据酵母细胞所表现出的简单表型及易于辨别的酶反应,对体内复杂环境中发生的RNA-蛋白质的相互作用进行遗传学分析.
关键词： 酵母三杂交系统 RNA-蛋白质相互作用
