首页 > 文献资料
-
羧甲基壳聚糖逆转骨肉瘤MG-63/ADM细胞耐药性的研究
目的 观察羧甲基壳聚糖(CMC)逆转人骨肉瘤耐药细胞株MG-63/ADM的耐药作用并初步探讨其机制.方法 体外培养建立入骨肉瘤耐药MG-63/ADM细胞株,MTT检测其耐药性;用不同浓度(50、100、200 μmol/L)CMC+阿霉素2.0 μg/mL作用于骨肉瘤MG-63/ADM细胞24、48、72 h后,采用MTT法测各组细胞生长抑制率;采用Western blot方法检测不同浓度CMC处理后MG-63/ADM细胞P糖原蛋白(P-gp)及胞核中核转录因子-κBP65(NF-κP65)的表达水平.结果 MTT结果显示MG-63/ADM细胞株对阿霉素(ADM)明显耐药,IC50为(1.97±0.56)μg/mL,耐药指数为11.35;CMC联合ADM 2.0 μg/mL能明显抑制MG-63/ADM细胞的增殖,且其抑制作用与CMC呈时间和剂量依赖性(P＜0.01).Western blot检测结果显示,MG-63/ADM细胞组较MG-63细胞组P-gp的表达水平明显升高(P＜0.05),且用不同浓度CMC处理的MG-63/ADM细胞组P-gp表达均明显低于MG-63/ADM细胞组(不加药物)(P＜ 0.05);MG-63/ADM细胞组较MG-63细胞组NF-κB P65的表达水平明显升高(P＜0.05),且不同浓度CMC处理的MG-63/ADM细胞组胞核NF-κB P65表达明显低于MG-63/ADM细胞组(不加药物)(P＜0.05).结论 CMC可部分逆转MG-63/ADM细胞的耐药现象的作用,其机制可能与通过抑制NF-κB信号通路激活而抑制P-gp表达相关.
-
苦参碱和顺铂联合应用对人骨肉瘤细胞株MG-63增殖抑制作用的研究
[目的]观察苦参碱和顺铂单药及联合应用对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖的抑制作用.[方法]采用MTT法(四甲基偶氮唑蓝比色法),利用中效原理判断药物联合应用的效应.[结果]苦参碱与顺铂联合应用对骨肉瘤细胞株MG-53细胞增殖抑制作用加强,低浓度(≤1.0mg/ml)苦参碱与顺铂联合应用时两者为拮抗作用,>1.5mg/ml苦参碱与顺铂合用时为相加作用.在苦参碱浓度>2.0mg/ml联合用药的抑制率接近95%.顺铂以20 μg/ml的浓度作用于MG-63细胞48h,增殖抑制率是86.7%,而顺铂以5 μg/ml的浓度与2mg/ml的占参碱联合作用48h,增殖抑制率是92.6%,说明苦参碱和顺铂联用可使顺铂在小剂量时即有较好的杀伤作用.[结论]苦参碱和顺铂联合应用可使顺铂在小剂量时有较好的作用,从而避免了顺铂的毒副作用.
-
人成骨肉瘤MG-63细胞株和正常成人成骨细胞MMP及TIMP的表达
骨重建(bone remodeling)由按一定时序交替进行的骨吸收和骨形成组成，是骨吸收与骨形成不断交替进行的过程。骨吸收包括骨基质的降解，其中由成骨细胞和破骨细胞产生的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)起着重要的作用［1］。基质金属蛋白酶抑制因子(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase, TIMP)能够特异性地抑制MMP的功能，MMP和TIMP之间的平衡状况调控着骨基质降解的速度和数量［1］。骨组织表面覆盖一层由成骨细胞和未矿化的I型胶原等骨基质构成的屏障，阻止破骨细胞活化和与矿化骨基质接触，抑制骨吸收；而成骨细胞分泌的MMP可降解未矿化的I型胶原等骨基质，激活破骨细胞，启动骨吸收［2］。因此，研究成骨细胞MMP及其特异性抑制因子TIMP的表达与调控对了解骨吸收及骨基质的降解机制有重要意义。有资料报道，人成骨肉瘤MG-63细胞株可作为具有成骨细胞表型特征的成骨细胞模型［3］，本文观察了MG-63细胞和正常成人成骨细胞(normal human osteoblast, hOB)MMP和TIMP的表达，旨在探讨骨吸收及骨基质的降解机制。
关键词： MG-63细胞株 成骨细胞 基质金属蛋白酶* 基质金属蛋白酶抑制因子 -
三氧化二砷诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的实验研究
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用.方法:用MTT法、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳等方法观察As2O3诱导MG-63细胞凋亡的作用.结果:As2O3可有效地抑制MG-63细胞增殖,随着药物浓度增高其抑制作用增强,且细胞出现典型的凋亡变化.DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯形条形.透射电镜下可见细胞核仁消失,染色质浓缩聚集于核膜下.结论:As2O3可诱导骨肉瘤细胞凋亡,其作用机制有待进一步探讨.
-
孕激素对MG-63细胞株孕激素受体和c-fos、c-jun的影响
目的 观察18-甲左炔诺孕酮对人成骨肉瘤MG-63细胞株增殖、孕激素受体和c-fos、c-jun表达的影响.方法 用不同浓度18-甲左炔诺孕酮干预MG-63细胞株,以不合左炔诺孕酮的MEM培养液作对照,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR测定孕激素受体(PR)、c-fos、c-jun mRNA表达,Western Blot和免疫组化法测定PR、c-fos、c-jun蛋白质的表达.结果 与对照组比较,10-10 mol/L、10-8 mol/L和10-6 mol/L左炔诺孕酮分别增加MG-63细胞增殖达7.72%、24.36%和36.54%(P＜0.01或P＜0.05).干预24 h后,MG-63细胞中PRA、PRB mRNA和蛋白质表达无明显变化(P＞0.05).干预2 h后,左炔诺孕酮增加MG-63细胞中c-fos、c-jun mRNA和蛋白质表达(P＜0.01或P＜0.05),呈剂量依赖性.结论 孕激素可能通过增加c-fos、c-jun的表达来促进MG-63细胞增殖.
-
二膦酸盐对人骨肉瘤细胞诱导凋亡作用的实验研究
目的：探讨二膦酸盐对人骨肉瘤细胞的诱导凋亡作用及其可能的作用机制。方法将人骨肉瘤M G‐63细胞株培养、传代后将细胞分为两组：二膦酸盐400μg／m L干预组、生理盐水空白对照组，孵育72 h后，对两组人骨肉瘤M G‐63细胞株行免疫荧光检测，观察两组细胞中凋亡因子Caspase‐3、Fas的表达；行流式细胞术检测，观察两组细胞的细胞凋亡率。结果二膦酸盐作用于人骨肉瘤MG‐63细胞株72 h后，免疫荧光检测结果可见二膦酸盐400μg／mL干预组细胞中凋亡因子Caspase‐3、Fas大量表达，而生理盐水空白对照组几乎见不到凋亡因子Caspase‐3、Fas的表达；流式细胞术检测结果观察到二膦酸盐400μg／mL干预组细胞的细胞凋亡率为54．00％，远大于生理盐水空白对照组的细胞凋亡率3．10％，差异有统计学意义（ P＜0．05），存在明显的诱导凋亡现象。结论二膦酸盐对体外人骨肉瘤M G‐63细胞株存在很强的诱导凋亡作用。
