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miR-221对结核分枝杆菌感染巨噬细胞后炎性因子表达的影响
目的 探讨microRNA-221(miR-221)对结核分枝杆菌感染巨噬细胞后炎症因子水平的影响.方法 用qRT-PCR检测结核分枝杆菌感染后巨噬细胞中miR-221的表达;用miR-221模拟物和miR-221抑制物转染结核分枝杆菌感染的巨噬细胞,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法和Griess法分别检测炎症因子表达和NO分泌;双荧光素酶报告基因、qRT-PCR和Western blot法检测miR-221和Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)的靶向关系.结果 miR-221在结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中低表达;miR-221模拟物上调巨噬细胞miR-221的表达水平,抑制巨噬细胞肿瘤坏死因子d(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和NO的分泌;miR-221抑制物下调巨噬细胞miR-221的表达水平,促进巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和NO的分泌;miR-221可作用于ROCK1的3′UTR,并抑制其表达(P＜0.05).结论 miR-221通过靶向抑制ROCK1的表达抑制结核分枝杆菌感染巨噬细胞后的炎症因子的表达.
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Rho相关蛋白激酶1在胶质瘤组织的表达及其临床意义
目的 探讨Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)在胶质瘤组织的表达及临床意义.方法 采用Western blot检测ROCK1在脑胶质瘤蛋白表达水平,以乘积极限法(Kaplan-Meier)分析ROCK1与脑胶质瘤患者临床特征的关系;以小干扰RNA(siRNA)抑制人神经胶质细胞瘤U251的ROCK1的表达,Transwell迁移实验测定U251细胞迁移侵袭能力,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测U251细胞增殖能力.结果 免疫印迹结果表明ROCK1在脑胶质瘤组织中高表达.ROCK1的表达与胶质瘤患者性别、年龄和肿瘤大小无明显相关(P＞0.05),而ROCK1表达与世界卫生组织(WHO)胶质瘤分级明显相关(P＜0.05).Kaplan-Meier分析显示ROCK1高表达组为13.00±2.04,ROCK1低表达组为25.00±6.98,ROCK1高表达ROCK1的患者预后较差(P＜0.01).Transwell迁移实验结果显示si-ROCK1组跨膜的细胞数量减少45％ ～ 50％,表明ROCK1促进肿瘤细胞侵袭;CCK-8法结果显示si-ROCK1组比对照组减少约56个克隆细胞,表明ROCK1促进胶质瘤细胞增殖.结论 ROCK1在胶质瘤患者中高表达,与胶质瘤发生、发展和转移明显相关.
关键词： Rho相关蛋白激酶1 胶质瘤 侵袭 增殖
