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糖尿病前期及初诊2型糖尿病患者血清活性维生素D3水平变化及意义
目的：研究活性维生素D3水平与胰岛素抵抗的关系，探讨糖尿病前期及2型糖尿病患者血清活性维生素D3水平的变化及意义。方法选择正常对照42例，糖尿病前期患者40例，初诊2型糖尿病患者42例，用酶联免疫分析法（ELISA法）测定血清1，25（OH）2 D3水平，用HOMR-β、HOMR-IR估测胰岛分泌功能和胰岛素敏感性，分析血清活性维生素D3水平变化。结果与正常对照组比较，糖尿病前期组及初诊2型糖尿病组1，25（OH）2 D3水平均显著下降（P<0.05），与糖尿病前期组比较，初诊2型糖尿病组血清1，25（OH）2 D3水平显著下降（P<0.05）。相关分析显示，1，25（OH）2 D3与HOMR-β呈正相关（r=0.601，P=0.000），与HOMR-IR无明显相关（r=-0.128，P=0.245）。结论糖尿病前期及初诊2型糖尿病患者存在1，25（OH）2 D3缺乏，其缺乏程度与病程进展有关。初诊2型糖尿病患者低水平的1，25（OH）2 D3影响胰岛β细胞分泌功能。
关键词： 1 25(OH)2 D3 糖尿病前期 2型糖尿病 胰岛素分泌 -
1a，25（OH）2 D3对心肌细胞生物钟基因表达的影响
目的：探讨1a，25（OH）2 D3对心肌细胞生物钟基因 Bmal1 mRNA、Per2 mRNA 和 Rev-erba mRNA表达的影响。方法分离培养7日龄 SD 大鼠乳鼠心肌细胞，并用免疫荧光法鉴定。原代心肌细胞培养72 h后，设置1a，25（OH）2 D35个终浓度梯度即0 nmol／L、1 nmol／L、10 nmol／L、50 nmol／L 和100 nmol／L 处理心肌细胞2 h，然后提取细胞 RNA，实时荧光定量 PCR（RT-PCR）检测生物钟基因（Bmal1、Per2、Rev-erba）表达量变化，以确定1a，25（OH）2 D3佳处理浓度。再将培养72 h 的原代心肌细胞分为3组，对照组：无血清培养基培养；血清休克组：含体积分数50％马血清的 DMEM培养2 h；1a，25（OH）2 D3处理组：佳1a，25（OH）2 D3浓度培养2 h。分别于7个时间点（0 h、4 h、8 h、12 h、16 h、20 h、24 h）收集细胞，提取细胞总 RNA，再采用 RT-PCR 分析心肌细胞生物钟基因（Bmal1，Per2，Rev-erba）的转录水平。结果1a，25（OH）2 D3培养浓度为50 nmol／L 时， Bmal1 mRNA 表达水平高，Per2和 Rev-erba mRNA 表达水平低。与对照组相比，1a，25（OH）2 D3处理组和血清休克组均引起心肌细胞 Bmal1、Per2和 Rev-erba 基因呈日周期的节律振荡，且 Bmal1和 Per2的表达模式呈相反的时相表达，在12 h 时 Bmal1的表达量出现在波峰，而 Per2的表达量出现在波谷。Rev-erba 的表达变化趋势在8 h 开始上升，在12～16 h 出现高表达量。结论1a，25（OH）2 D3可影响心肌细胞生物钟基因 Bmal1、Per2和 Rev-erba mRNA 表达。
关键词： 1A 25(OH)2 D3 心肌细胞 生物钟 生物钟基因 -
1,25二羟维生素D3对胆管癌细胞系QBC939增殖和凋亡的影响
目的 探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2 D3]对胆管癌细胞系QBC939的体外增殖及凋亡的影响.方法 将不同浓度的1,25(OH)2 D3与胆管癌细胞系QBC939共同培养,采用MTT法测定细胞增殖能力、显微镜观察细胞形态学的改变、流式细胞仪检测细胞周期与凋亡、免疫细胞化学观察bcl-2的表达.结果 0.1～0.5μmol/L的1,25(OH)2 D3对胆管癌细胞QBC939有抑制作用,呈剂量依赖性.经1,25(OH)2 D3作用72h后细胞G1期比例升高,S期比例下降,其中0.5μmol/L组细胞G1期由(50.3±1.0)%上升至(65.5±3.2)%,S期由(39.4±0.5)%下降至(23.6±0.7)%;并且可诱导细胞产生凋亡,0.5μmol/L组作用后细胞凋亡率由0.5%上升至24.6%;bcl-2的表达下调.结论 1,25(OH)2 D3能抑制胆管癌细胞系QBC939增殖并诱导细胞凋亡,其引起凋亡的机制可能与下调bcl-2的表达相关.
关键词： 1 25(OH)2 D3 胆管癌细胞 细胞周期 细胞凋亡 -
1，25（OH）2 D3对糖尿病视网膜病变患者单个核细胞增殖与分泌细胞因子的影响
目的：探讨体外1，25（OH）2 D3对糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy，DR）单个核（Peripheral Blood Mononuclear Cells，PBMCs）细胞增殖和分泌细胞因子的影响。方法选择维吾尔族增殖期 DR 患者20例（PDR 组），非增殖期 DR 患者24例（NPDR 组）、正常对照22例（NC 组），分离受试者外周血 PBMCs 细胞，体外1，25（OH）2 D3刺激后用 CCK8法检测细胞增殖；分离 PBMCs 后加入抗 CD3／CD28抗体活化，加或不加1，25（OH）2 D3培养，收集细胞培养上清并使用 Cytometric Bead Array 技术检测上清中细胞因子的水平。结果1，25（OH）2 D3能显著抑制 DR 患者和正常对照的 PBMCs 细胞增殖，差异有统计学意义（P ＜0．05），并且1，25（OH）2 D3能抑制 DR 患者和正常对照的 PBMCs 分泌 IL-17A、IFN-γ和 IL-6因子，差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论1，25（OH）2 D3作为一种免疫调节剂，对 DR 患者免疫细胞的增殖和相关细胞因子的分泌具有抑制作用。
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新疆维吾尔族糖尿病视网膜病变患者血清中1，25（OH）2 D3浓度及 Th 细胞相关细胞因子表达水平的测定
目的：观察新疆维吾尔族糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy，DR）患者血清中1，25（OH）2 D3和细胞因子表达水平差异。方法收集维吾尔族 DR 患者和健康人外周血，采用 ELISA 法检测血清1，25（OH）2 D3浓度，采用 Cytometric Bead Array 技术检测血清细胞因子水平。结果DR 增殖期患者的血清1，25（OH）2 D3与非增殖期和正常对照相比减少，DR 增殖期患者血清 IFN-γ与非增殖期和正常对照相比减少，DR 增殖期患者血清IL-6与正常对照相比增加，差异均有统计学意义（P ＜0．05）。结论DR 的发病与免疫反应激活有关，血清中低水平表达1，25（OH）2 D3可能是 DR 的危险因素。
关键词： 血清 1 25(OH)2 D3 糖尿病视网膜病变 细胞因子
