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端粒酶活性对SGC7901胃癌细胞活性的影响
目的 探讨端粒酶活性对SGC7901胃癌细胞活力的影响.方法 SGC7901细胞分组培养,其中对照组不施加处理因素,其余各组给予端粒酶抑制剂叠氮脱氧胸苷(AZT)即AZT-4、AZT-8及AZT-16组,分别给予AZT 4、8及16 mmol/L,24、48及72 h后以甲基噻唑基四唑(MTT)法检测各组细胞活力,根据MTT实验结果检测AZT抑制SGC7901细胞活力明显时各组细胞端粒酶活性.结果 AZT可抑制SGC7901细胞活力,呈时间依赖性及剂量依赖性.72 h后AZT-4、AZT-8及AZT-16组端粒酶活性下调率分别为(28.1±4.3)%、(45.4±3.6)%、(63.7±5.1)%,呈明显的剂量依赖性.结论 端粒酶活性增强是SGC7901胃癌细胞永生化的重要机制之一.
关键词： 端粒酶 SGC7901胃癌细胞 细胞活力 -
AZT对SGC7901胃癌细胞凋亡及Bax蛋白和PCNA表达的影响
目的:研究端粒酶抑制剂3′-叠氮3′-脱氧胸腺核苷(AZT)对SGC 7901胃癌细胞凋亡及Bax蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制.方法:将处于对数生长期的SGC 7901胃癌细胞分为对照组及1.0 mmol·L-1 AZT处理组,应用AZT 6 d后,采用MG-P-MY组合染色法检测SGC 7901胃癌细胞凋亡率,采用免疫组织化学EnVision法检测SGC 7901胃癌细胞Bax蛋白及PCNA的表达.结果:AZT组及对照组SGC 7901胃癌细胞凋亡率分别为(16.421±0.713)%和(3.366±0.271)%,AZT处理组SGC 7901胃癌细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);对照组Bax蛋白及PCNA阳性细胞表达率分别为(16.851±10.064)%和(63.332±22.767)%,AZT处理组Bax蛋白及PCNA阳性细胞表达率为(47.389±18.042)%和(23.446±13.055)%,与对照组比较,AZT处理组Bax蛋白表达率明显增加(P<0.05),PCNA表达率明显降低(P<0.05).结论:AZT能促进SGC 7901胃癌细胞Bax蛋白的表达,抑制PCNA表达,增加SGC 7901胃癌细胞凋亡.
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二甲基胂酸抑制胃癌细胞增殖的研究
目的:探讨二甲基胂酸(DMAA)对SGC7901胃癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制.方法:依次用5,10,15,20,25,30mmol/L二甲基胂酸处理培养的SGC7901胃癌细胞24 hrs,在5 mmol/L和10 mmol/L的浓度下分别处理6,12,18.24,30,36,42,48hrs,用MTT计数法测定DMAA对肿瘤细胞增殖的抑制率,用激光共聚焦显微镜检测细胞形态变化以及用DNA凝胶电泳检测细胞凋亡.结果:DMAA在不同浓度下对肿瘤细胞的抑制作用呈现典型的双曲线,即随着浓度的增加DMAA对胃癌细胞的抑制率不断增加并逐渐趋于稳定;在形态学上DMAA在低浓度下引起胃癌细胞的胞膜出泡、核固缩、染色体断裂和凋亡小体等典型的细胞凋亡的变化,而在高浓度下主要引起细胞坏死;DNA凝胶电泳结果显示,在低浓度DMAA作用下胃癌细胞DNA呈现细胞凋亡的梯状带型,而在高浓度下梯状带型则消失.结论:DMAA抑制胃癌细胞的增殖,其在低浓度时能有效诱导胃癌SGC 7901细胞凋亡,而在高浓度时使胃癌细胞坏死而死亡.
关键词： 二甲基胂酸 SGC7901胃癌细胞 凋亡 坏死 -
姜黄素对CIK细胞杀伤胃癌细胞株SGC-7901作用的影响及其机制的研究
目的 探讨姜黄素对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)杀伤胃癌细胞株SGC-7901作用的影响及其机制.方法 10名健康者外周血单个核细胞(PBMC)在体外经多种细胞因子诱导为CIK细胞;收集培养第5天的CIK细胞,给予不同浓度的姜黄素诱导,37℃、5%CO2条件下继续培养72 h,LDH法检测CIK细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性;FACS法检测CIK细胞表型CD3+CD8+、CD3+CD56+含量及穿孔素、颗粒酶B水平.结果 ①姜黄素诱导后,CIK细胞杀伤胃癌SGC-7901的活性明显提高,在10 μmol/L时杀伤活性显著高于对照组(P＜0.05).②姜黄素诱导后,CIK细胞内穿孔素和颗粒酶B的水平明显提高(P＜0.05).③姜黄素能够显著增加CIK细胞的CD3+CD56+表达(P＜0.05),降低其CD3+CD8+表达(P＜0.05).结论 姜黄素能提高CIK细胞对胃癌细胞株SGC-7901的杀伤活性,其机制町能与其增加CIK细胞穿孔素和颗粒酶含量以及增加CD3+CD56+表达有关.
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PPARγ在胃癌的表达及曲格列酮对胃癌SGC7901细胞生长的影响
目的 探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)在胃癌及癌前病变中的表达,研究PPARγ激动剂曲格列酮(troglitazone,TGZ)对人胃癌细胞SGC7901生长抑制作用及其作用机制.方法 免疫组织化学方法检测PPARγ在胃癌及癌前病变中的表达;体外培养SGC7901细胞给予TGZ干预,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、苏木精-伊红染色、免疫细胞化学方法、Western blot检测TGZ作用后SGC7901细胞生长情况、凋亡率及细胞周期的改变、细胞形态学变化、PPARγ表达情况.结果 ①免疫组化染色结果显示在轻度不典型增生、重度不典型增生及胃癌标本中PPARγ阳性表达率为15.15%(5/33)、66.67%(14/21)、71.43%(60/84),轻度不典型增生与重度不典型增生及胃癌组间有统计学差异(P＜0.05).②体外实验结果显示SGC7901细胞与不同浓度的TGZ共同培养,细胞的生长受到不同程度的抑制,TGZ 50 μmol/L组与对照组相比P＜0.05,同时其作用具有浓度及剂量依赖性,苏木精-伊红染色结果显示实验组肿瘤细胞的生长较阴性对照组逐渐稀疏,出现细胞体积变小、形态不规则、细胞皱缩、核固缩、胞浆空泡等形态学表现.免疫组织化学染色显示PPARγ在SGC7901细胞中有较高表达,50 μmol/L与阴性对照组及低浓度25μmol/L组相比P＜0.05,流式细胞仪检测结果显示TGZ 25 μmol/L组起作用72 h后,细胞凋亡率明显升高,处于G0/G1与S期的细胞比例与阴性对照组相比,具有统计学意义(P＜0.05).Western blot结果显示 TGZ作用72 h后与阴性对照组相比,高浓度50 μmol/L组PPARγ表达增加(P＜0.01).结论 应用TGZ可以将SGC7901细胞阻滞于G0/G1期,进而抑制其增殖.
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联合使用曲格列酮、9-顺维甲酸对胃癌SGC7901细胞细胞周期影响的实验研究
目的 探讨曲格列酮(TGZ)、9-顺维甲酸(9-cis-RA)联合用药对胃癌SGC7901细胞细胞周期的影响.方法 体外培养SGC7901细胞给予TGZ、9-cis-RA干预,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术和免疫细胞化学方法检测TGZ、9-GS-RA作用后SGC7901细胞生长情况、细胞周期的改变和p21、p27表达情况.结果 MTT结果显示,应用TGZ与9-cis-RA作用于SGC7901细胞72 h,50 μmol/L TGZ组、20 μmol/L 9-cis-RA组及10 μmol/L 9-cis-RA+25 μmol/L TGZ组细胞的生长受到抑制(P<0.05).金正均法检测显示两药对SGC7901细胞的抑制有协同作用.免疫细胞化学方法显示50 μmol/L TGZ组、20 μmol/L 9-cis-RA组及10 μmol/L 9-cis-RA+25 μmol/L TGZ组与阴性对照及低浓度组相比,p21、p27阳性表达率增加(P<0.05).流式细胞术显示50 μmol/L TGZ组、20 μmol/L 9-cis-RA组及10 μmol/L 9-cis-RA+25 μmol/L TGZ组处于G0/G1期细胞增多(P<0.05).结论 TGZ与9-cis-RA可通过诱导肿瘤细胞周期阻滞而发挥抑制胃癌SGC7901细胞增殖的作用,诱导周期阻滞的作用与药物作用后p21、p27表达上调有关.
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5-氮杂胞苷对DKK3去甲基化及对SGC7901胃癌细胞增殖的影响
目的 研究5-氮杂胞苷对SGC7901胃癌细胞DKK3基因启动子去甲基化对细胞增殖及凋亡的影响. 方法 采用5-氮杂胞苷处理SGC7901胃癌细胞,以未行5-氮杂胞苷处理的SGC7901胃癌细胞为对照,比较DKK3基因启动子甲基化改变及细胞增殖曲线、细胞增殖及凋亡的差异. 结果 SGC7901胃癌细胞DKK3基因启动子在5-氮杂胞苷作用前呈甲基化状态,作用后呈未甲基化状态,表明5-氮杂胞苷对SGC7901胃癌细胞DKK3基因启动子具有去甲基化作用.5-氮杂胞苷作用后的SGC7901胃癌细胞Go/Gi期比例、PI和凋亡率均显著高于作用前SGC7901胃癌细胞(均P＜0.05),S期和G2/M期显著低于作用前SGC7901胃癌细胞(均P＜0.05). 结论 DKK3基因可能具有抑癌基因作用,5-氮杂胞苷对SGC7901胃癌细胞DKK3基因启动子的去甲基化可促进细胞凋亡并抑制其增殖.
关键词： 5-氮杂胞苷 SGC7901胃癌细胞 DKK3 去甲基化 细胞增殖 -
丹参酮ⅡA提取工艺优化及其诱导SGC7901胃癌细胞凋亡机制研究
目的 探讨丹参酮ⅡA提取工艺及其诱导SGC7901胃癌细胞凋亡机制.方法 正交实验方法优化丹参酮ⅡA提取工艺,用MTT法及电镜观测其对SGC7901胃癌细胞凋亡的影响.结果 丹参酮ⅡA对SGC7901胃癌细胞增殖有明显的抑制作用,并呈现浓度和时间的依赖性.8.0μg/mL丹参酮ⅡA作用72 h后,电镜下出现凋亡小体.流式细胞仪检测丹参酮ⅡA 2.0、4.0和8.0μg/mL作用72 h后细胞生长抑制率为(25.70±1.86)％、(47.80±2.75)％、(58.40±3.25)％.结论 丹参酮ⅡA佳提取工艺为:加10倍量的80％乙醇,提取1次,提取时间为45分钟;丹参酮ⅡA能诱导SGC7901胃癌细胞凋亡.
关键词： 丹参酮ⅡA MTT法 SGC7901胃癌细胞 -
端粒酶反义寡核苷酸及其联合顺铂对胃癌细胞的影响
目的 探讨端粒酶反义寡核苷酸及其联合顺铂对胃癌细胞的影响.方法 利用脂质体将端粒酶反义寡核苷酸导入SGC7901胃癌细胞,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,噻唑蓝(MTT)法测定端粒酶反义寡核苷酸对胃癌细胞SGC7901的抑制;过氧化物酶的抗荧光素抗体法检测癌细胞凋亡指数.结果 经端粒酶反义寡核苷酸处理的胃癌细胞端粒酶活性显著下降,端粒酶反义寡核苷酸明显抑制胃癌细胞的生长和诱导胃癌细胞的凋亡,端粒酶反义寡核苷酸联合顺铂,能增强对胃癌细胞生长的抑制和诱导胃癌细胞的凋亡.结论 端粒酶反义寡核苷酸能有效抑制胃癌细胞生长,与顺铂协同作用,效果更为明显.
关键词： 端粒酶 反义寡核苷酸 SGC7901胃癌细胞
