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ELISA夹心法测定TRPC6蛋白的初步应用研究
目的 初步利用所建立的双抗体ELISA夹心法检测TRPC6蛋白.方法 采用本室制备的单克隆抗体A2和F11,分析为识别不同位点,以佳配对组合建立双抗体ELISA夹心法,并以此方法检测小鼠脑组织中的TRPC6蛋白.结果 确定检测的标准TRPC6多肽浓度区间为1.25-40μg/ml,相关系数R2为0.992,测定小鼠脑组织总蛋白中含有的TRPC6蛋白表达量在1.16μg/ml-1.45μg/ml.结论 所建立的ELISA夹心法可初步用于TRPC6蛋白的检测,为进一步的临床应用提供基础.
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应用酶免疫方法检测生物制品中残余牛血清白蛋白含量
目的应用酶免疫方法检测生物制品中残余牛血清白蛋白(BSA)含量.方法制备高亲和力、高纯度的抗BSA单克隆抗体作为包被抗体,高纯度、高效价的兔抗BSA多克隆抗体为酶标抗体,采用ELISA夹心方法,以系列含量的BSA溶液作为标准,制备标准曲线,对样品中所含BSA进行定量.结果优化了酶免疫反应条件,标准曲线线性范围内r≥0.98,经验证,该方法对BSA的低检测限为2.5 ng/ml.分别检测5、10、ng/ml含量的BSA时,试验内(n=11)和试验间(n=3)测定的变异系数分别为2.3%～4.9%和4.0%～6.1%;回收率均值分别为104%、123%和109%.未见该方法与人、马、猪血清白蛋白之间的交叉反应.结论该法敏感度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于生物制品的质量控制.
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脑型脂肪酸结合蛋白在颅脑损伤患者血清中含量检测及意义
目的：检测脑型脂肪酸结合蛋白（B-FABP）在脑挫伤患者血清中的含量，探讨其与颅脑损伤严重程度间相关性及临床意义。方法应用ELISA 夹心法检测脑挫伤患者、健康志愿者及头皮软组织挫伤患者血清中脑型脂肪酸结合蛋白含量。结果健康志愿者、头皮软组织挫伤患者血清中没有检测出脑型脂肪酸结合蛋白，80例脑挫伤患者血清中共检测出脑型脂肪酸结合蛋白者62例，阳性率77.5%，其中A组(GCS 14-15分）13例，B组（GCS 9-13分）26例，C组（GCS 3-8分）23例。分组阳性率分别为52%、81.3%、100%。三组脑型脂肪酸结合蛋白含量变化与GCS评分值组间比较呈正相关。结论脑挫伤患者血清中脑型脂肪酸结合蛋白含量与脑挫伤严重程度密切相关，可作为临床预测脑挫伤患者严重程度的生化标志物。
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肺癌患者血清可溶性B7-H4分子的检测及其临床意义
目的:分析肺癌患者血清中可溶性分子B7-H4的水平变化并探讨其临床意义.方法:确诊为肺癌的患者37例,用ELlSA夹心法检测患者治疗前后血清中的B7-H4水平变化,用微粒子化学发光法测定患者治疗前后肿瘤抗原125(CA125)水平的变化,分析比较B7-H4与CA125水平变化与患者病理类型及其诊断的相关性；选取30例健康人群血清作为对照.结果:与健康组相比:治疗前患者血清中B7-H4水平(1.53±0.22)μg/L明显高于治疗后的水平(0.96±0.17)μg/L,差异有统计学意义(P＜0.05)；同时也发现腺癌患者血清B7- H4水平(2.05±0.33)μg/L远高于小细胞癌、大细胞癌和鳞癌患者,差异有统计学意义(P＜0.05).B7-H4分子的敏感度为62.2％低于CA125分子的75.7％,而二者联合使用时的敏感度可达91.9％.肺癌患者血清B7 -H4水平与CA125水平呈正相关(P＜0.05).结论:肺癌患者血清中B7-H4水平变化与病理类型密切相关,在腺癌的诊断上B7-H4分子可作为一个重要的参考指标,而在鳞癌的诊断上不建议采用该分子作为一个诊断指标.
