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α1,2-岩藻糖转移酶基因转染增加卵巢癌细胞系RMG-I Lewis y抗原的表达
目的 将人α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-FT)基因转染卵巢癌细胞系RMG-I并探讨细胞表面Lewis y及其他相关糖脂抗原的变化.方法 采用PCR方法 克隆人α1,2-FT基因编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1(-)-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-I,建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-I-H.通过酶活性测定证明转染前后细胞系α1,2-FT活性的改变,采用薄层层析、薄层层析免疫染色方法 测定转染前后细胞脂质及糖脂,特别是Ⅱ型寡糖的变化. 结果 基因转染后细胞RMG-I-H中H-1抗原及Lewis y抗原显著增加,特别是Lewis y抗原为转染前的20倍;而Ⅰ型糖链Lewis b显著减少.转染前后细胞膜上的主要脂质成分胆固醇和磷脂质的含量没有变化,且中性糖脂质也没有明显变化.结论 α1,2-FT基因转染增加α1,2-FT活性的同时,增加卵巢癌细胞系RMG-I Lewis y抗原的表达;RMG-I Lewis y高表达细胞系的建立为研究Lewis y抗原与卵巢癌生物学行为提供了细胞模型.
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胃癌与红细胞Lewis表型的相关性研究
目的:探讨人类红细胞Lewis表型的不同是否与胃癌的发生有关.方法:应用微柱凝胶技术对63例胃癌患者及120名健康供血者的血液标本进行Lewis表型检测,比较分析两组人群红细胞Lewis表型的表达频率.结果:胃癌患者红细胞Lewis(a-b+)表型频率明显高于健康对照组(79.4% VS 61.7%,P＜0.05),而其Lewis(a+b-)表型频率明显低于健康对照组(9.5% VS 22.5%,P＜0.05).结论:Lewis(a-b+)表型可能是胃癌易发的一个危险因素.
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与肿瘤侵袭相关的Lewis抗原在人肝癌细胞H7721上的表达及其合成的酶学分析
目的研究人肝癌细胞H7721表面4种含岩藻糖类抗原一Lewis抗原的表达、它们与肝癌细胞在体外侵袭行为的关系,及其合成相关酶α1,3岩藻糖转移酶(FucT)5种亚型的基因表达.方法用单克隆抗体结合流式细胞仪测定Lewis抗原,用涂有Matrigel膜的转移小室测定细胞的侵袭行为,利用实时RT-PGR测定FucT的表达.结果 H7721细胞表面主要表达Slex和少量SDLex,而Lex和Slea表达极微.其中只有Slex和H7721细胞的侵袭明显相关.H-7721细胞中FucT的表达强度为FucT-Ⅳ＞FucT-Ⅲ＞FucT-Ⅵ≥FucT-Ⅶ,后两者表达少,而几乎完全缺乏FucT-Ⅸ.结论 Slex是H7721细胞表面多也是与细胞侵袭有关的Lewis抗原,因据报道FucT-Ⅵ催化合成Slex和SDLex的效率高于FucT-Ⅲ及Ⅶ,故可能是负责H7721细胞中Slex和SDLex合成的主要FucT,但也不排除FucT-Ⅶ和FucT-Ⅲ也参与Slex的合成.合成Lex中重要的FucT-Ⅸ的缺乏可能是Lex低表达的原因.
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ABH及Lewis组织-血型抗原异常表达与原发肺癌生物学行为的相关性研究
目的 探讨原发性肺癌组织中ABH及Lewis组织-血型抗原表达与肺癌生物学行为的相关性.方法 采用免疫组织化学SP法,检测30例正常肺组织、143例原发肺癌及相应41例转移灶中 ABH与Lewis血型抗原的表达.结果 A、B、AB、O(H)血型瘤体抗原阳性率分别为49.02%、55.56%、35.00%、69.44%,各血型间抗原表达无统计学差异(P>0.05),Lewisa、sialylLewisx在癌组织中的表达率高于正常肺组织(P=0.045,P=0.015).低分化癌组织ABH缺失、Lewisa、sialylLewisx表达均高于中高分化癌组织(P<0.001).转移组ABH抗原表达缺失、sialylLewisx抗原表达均高于未转移组(P=0.004,P<0.001),转移灶ABH抗原表达缺失、sialylLewisx抗原表达高于原发癌(P<0.001).ABH、sialylLewisx表达与未表达组5年生存率分别为32%、6%(P<0.001),7%、30%(P=0.0012).结论 原发肺癌组织中存在ABH及Lewis相关抗原的异常表达;ABH血型抗原表达缺失和sialylLewisx表达增加与肺癌转移相关;Lewisa、sialylLewisx抗原异常表达与肺癌组织分化程度有关;ABH及sialylLewisx抗原检测对预测患者预后有重要意义.
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胃窦胃体部幽门螺杆菌Lewis抗原的表达
目的:研究胃内不同部位幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)Lewis抗原表达的状况.方法:应用ELISA法检测58位患者胃窦胃体部Hp菌株Lewis抗原的表达,用RAPD-PCR法测定Hp菌株类型.结果:105例患者中,58例(55.2%)胃窦胃体部位同时Hp阳性,其中55例(94.9%)为同-Hp菌株感染.55对Hp菌株中,21对(38.2%)表达不同的Lewis抗原(Lex、Ley、Lea和Leb).结论:部分患者胃窦胃体部位相同Hp菌株表达不同的Lewis抗原.
