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P,P'-DDE对睾丸支持细胞雄激素结合蛋白表达的影响
[目的]研究雄激素结合蛋白在p,p'-DDE致雄性大鼠生殖内分泌干扰过程中的作用机制.[方法]对大鼠睾丸支持细胞离体原代培养4～5 d;设溶剂(DMSO)及阴性对照,以终浓度为30、50、80、100μmol/L的p,p'-DDE作用于支持细胞24h,计数200个细胞,计算支持细胞存活率;分别以浓度为10、30、50μmol/Lp,p'-DDE作用于支持细胞24h,运用一步法RT-PCR检测支持细胞内雄激素结合蛋白基因mRNA水平.[结果]p,p-DDE在50 μmol/L及以下浓度作用24 h后,支持细胞存活率＞90%,而80 μmol/L组仅45%;染毒24 h后,对照组及10、30、50 μmol/L的p,p-DDE组支持细胞内雄激素结合蛋白mRNA灰度比值分别为0.3140±0.102 0、0.392 0±0.094 9、0.583 7±0.122 1、0.649 0±0.171 8,随p,p'-DDE所给浓度的增高而逐渐升高,且30、50 μmol/L组与对照组差异存在显著性(P＜0.05),呈剂量依赖关系.[结论]p,p-DDE作用于睾丸支持细胞后,雄激素结合蛋白基因转录水平可明显升高,从而表达增强,促进雄激素结合蛋白的生成,代偿性地维持生精过程.
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P,P'-DDE宫内暴露致雄性子代大鼠的生殖毒性
[目的]探讨宫内暴露p,p'-DDE对雄性子代生殖毒性的影响. [方法]母鼠交配成功后,将其随机分为对照(玉米油)组和100 mg/kg p,p'-DDE染毒组,每组8只.染毒组于孕第8～15d采用灌胃方式给予100 mg/kg p,p'-DDE处理,对照组孕鼠给予等容积玉米油.孕鼠自由分娩,观察仔鼠个数和出生性别,测量雄性仔鼠肛殖距及检查乳头存留情况;计算睾丸的脏器系数;利用计算机辅助精子分析系统测定雄性仔鼠的精子质量各相关指标;酶联免疫吸附法测定雄性子代血清睾酮水平. [结果]染毒组仔鼠肛殖距[(0.94±0.12)cm]较对照组仔鼠肛殖距[(1.11±0.13)cm]有所缩短,乳头存留率(34％)较对照组(0％)明显上调,精子数目[(50.00±4.62)×106个/mL],较对照组[(70.63±4.17)×106个/mL]明显降低,精子活力[(62.42±3.32)％],较对照组[(76.75±2.68)％]明显下降,差异均有统计学意义.2组雄性仔鼠雌雄比例、睾丸脏器系数、血清睾酮水平、睾丸重量差异均无统计学意义. [结论]宫内暴露p,p'-DDE可诱导雄性仔鼠出现雌性化特征,精子数目和活力下降,导致雄性子代生殖毒性.
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p,p'-DDE致大鼠跨代雄性生殖毒性效应及Igf2 DMR2区域甲基化的可能机制
[目的]建立宫内p,p’-DDE暴露跨代大鼠模型,观察雄性子代生殖毒性是否具有亲源性遗传特征及可能的表观遗传机制.[方法] SPF级的SD大鼠于孕8～15天给予每天每千克体重100mgp,p,-DDE灌胃,另设溶剂对照组采用玉米油灌胃,孕鼠自由分娩,保留所有雄性仔鼠(F1代),同组别不同窝别的F1代仔鼠于出生后90天按雌雄比1:1交配,产生F2代仔鼠.染毒组和对照组雌雄F2代按以下分组设计两两交配后,产生F3代仔鼠,分组为:①雌雄均为对照组(C ♂-C♀),②雌雄均为染毒组(DDE ♂-DDE♀),③染毒组雄性与对照组雌性(DDE ♂-C♀),④对照组雄性与染毒组雌性(C ♂-DDE♀).用计算机辅助精子分析系统(CASA)分析3代雄性仔鼠成年后的精子质量,亚硫酸氢钠基因组测序法检测Igf2 DMR2区域甲基化水平,实时荧光定量PCR分析印记基因表达.[结果]p,p’-DDE可诱导F1、F2及F3代DDE♂-DDE♀、DDE♂-C♀精子数量和活力下降,F1代精子数量和活力分别从(70.63±11.79)×106/mL、(76.75±7.57)％下降至(50.00±13.08)×106/mL、(62.42±9.40)％;F2代精子数量和活力分别从(82.86±38.60)×106/mL、(82.14±6.44)％下降至(43.75±25.04)×106/mL、(60.88±25.03)％;F3代DDE ♂-DDE♀精子数量及活力分别从(68.89±41.37)×106/mL、(68.56±10.67)％下降至(21.66±4.83)×1&/mL和(29.33±32.70)％,F3代DDE♂-C♀精子数量和活力下降为(28.00±16.60)×106/mL和(34.60±31.60)％,差异均有统计学意义(均P＜0.05).F1～F3代雄性仔鼠精子细胞Igf2 DMR2区域(1、16、18位点)低甲基化,Igf2转录下调,H19转录上调,Igf2口基因的转录水平和Igf2 DMR2甲基化成正相关(r=0.8065).[结论] Igf2 DMR2区域甲基化改变可能在p,p’-DDE诱导的跨代雄性大鼠生殖毒性中起重要作用.
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肠易激综合征患者内脏感觉及其与结肠黏膜肥大细胞、P物质和血管活性肠肽的相关性研究
目的 研究肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者内脏感觉及其与结肠黏膜肥大细胞(colonic mucousmast cell,MC)、P物质(substance P,SP)以及血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)的相关性研究.方法 本研究对象为2017年7月至2018年2月于西安市第三医院治疗的30例IBS患者以及20例既往肠内镜下息肉切除术后复查者,分别设为观察组与对照组,留取升结肠、回肠末端、回盲部以及乙状结肠病理标本,采用应用特殊组织化学染色以及免疫组织化学染色检测比较不同部位黏膜MC密度以及VIP免疫反应阳性神经纤维指标;比较2组直肠对容量刺激的感觉变化.结果 观察组升结肠、回肠末端、回盲部以及乙状结肠黏膜MC密度均高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);观察组各部位SP、VIP能神经纤维面积、强度平均值均高于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);观察组排便阀值、疼痛阀值、感觉阀值均显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);观察组SP、VIP能神经纤维面积、强度平均值、MC密度与感觉阀值呈负相关(r=-0.542、r=-0.533、r=-0.532、r=-0.434,r=-0.399,均P＜0.05).结论 SP、VIP、MC可能参与到IBS的发生及发展,MC密度、SP、VIP能神经纤维的变化可能与内脏感觉高敏感性有关.
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补肾宁心方对早期先兆流产孕囊周围暗区、血β-HCG、P的影响
目的:探讨补肾宁心方联用黄体酮针对早期先兆流产患者孕囊周围暗区、血β-HCG、P的影响.方法:将符合标准的76例患者,随机分为观察组和对照组,每组各38例,观察组予补肾宁心方联用黄体酮针,对照组采用单纯黄体酮针,2组均治疗2周,治疗1周、2周后复查B超,并于治疗前及治疗后1周、2周时各抽取静脉血5ml,测定血清β-HCG及孕酮水平,比较治疗前后孕囊周围液性暗区、血β-HCG及孕酮的差异.结果:补肾宁心方联用黄体酮针的总有效率为92.11％,对照组总有效率78.90％,治疗1-2周后,血清β-HCG水平较治疗前明显上升,(P＜0.05),差异有统计学意义,孕酮较治疗前上升明显(P＜0.05).观察组液性暗区吸收率(86.84％);对照组液性暗区吸收率(57.89％),(P＜0.05),2组比较差异有统计学意义,观察组疗效均优于对照组;结论:补肾宁心方联用黄体酮针治疗早期先兆流产疗效确凿,能明显促进患者孕囊周围液性暗区的吸收,显著提高患者的血β-HCG及孕酮水平,提高保胎的成功率.
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补肾安胎冲剂治疗早期自然流产临床研究
目的:观察补肾安胎冲剂治疗脾肾亏虚证早期自然流产的临床疗效及外周血β-HCG、P及T细胞亚群的变化.方法:早期自然流产脾肾亏虚证患者60例,给予补肾安胎冲剂口服治疗,观察临床疗效、证候积分及各项指标的变化,并以60例早期正常妊娠者作对照.连续服药2周为1个疗程,共观察2个疗程.结果:治疗有效率为86.6%,主要证候积分和总积分均较治疗前明显下降(P<0.01),β-HCG、P水平升高,CD3、CD4T淋巴细胞比率及CD4/CD8比值降低,与对照组比较(P>0.05).结论:补肾安胎冲剂治疗早期自然流产脾肾亏虚证疗效显著,通过升高血清β-HCG、P水平,降低CD3、CD4T淋巴细胞比率及CD4/CD8比值,调整内分泌免疫系统,发挥安胎作用.
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人红细胞负载海藻糖后冻干保存过程的初步研究
目的 探讨红细胞冻干长期保存的有效方法,并评价复水后红细胞各项理化指标的变化.方法 设对照组(常规条件下保存的红细胞)和实验组(负载海藻糖冻干-复水后红细胞),在37℃条件下,红细胞负载海藻糖7 h后,采用主要成分为含15%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和150 mmol/L海藻糖的缓冲液作为保护液,在设定的降温程序下进行红细胞的冻干保存.冻干后置37℃的再水化液快速水化,检测各项理化指标.结果 红细胞冻干再水化后红细胞和血红蛋白回收率均在80%以上,且各项理化指标与常规保存的对照红细胞间差异无显著性(P>0.05).结论 红细胞在37℃孵育7 h的条件下负载海藻糖后进行冻干,复水后能保持细胞的理化稳定性和结构形态的完整性,为进一步研究长期冻干保存红细胞奠定了基础.
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人工授精妊娠期孕酮、γ-干扰素水平与妊娠结局的相关性分析
目的 探讨人工授精妊娠期孕酮(P)、γ-干扰素(IFN-γ)水平与妊娠结局的相关性.方法 选择因不孕症行468个人工授精治疗周期患者,术后口服地屈孕酮予以黄体支持,对妊娠的54例患者观察P、IFN-γ水平.结果 正常妊娠组P与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.576,P＜0.05).生化妊娠组第9天开始P水平下降,与正常妊娠组比较,差异有统计学意义(t=12.319,P＜0.05).流产组P水平从第16天开始下降,与正常妊娠组差异有统计学意义(t=7.663、19.315,均P＜0.05).与正常妊娠组比较,流产组及生化妊娠组的IFN-γ水平均显著升高(P＜0.05).结论 使用黄体支持方法提高体内P水平对预防生化妊娠和自然流产有着积极的作用,人工授精后监测P、IFN-γ的水平,可以预测患者的预后.
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234例患者血清β-HCG、P、E2对早期先兆流产安胎结局的影响
目的 探讨孕4～9周血清β王单位人绒毛膜促性腺素(β-HCG)、孕激素(P)、雌二醇(E2)值水平对早期先兆流产安胎结局的影响,为临床掌握保胎时机提供参考,进而提高保胎成功率.方法 采用回顾性资料,整理收集病例234例,根据妊娠结局分为安胎成功组(观察至孕周≥10周,无先兆漉产症状)189例,安胎失艘组(在＜10周时出现流产)45例,经非参数 Mann-Whitney U 检验,观察孕4～9周血清β-HCG、P、E2值水平对早期先兆流产安胎结局的影响.结果 妊娠4～9周时,安胎成功组的血清β-HCG水平均数增长幅度从孕5用开始显著高于安胎失败组(P＜0.05或P＜0.01).安胎成功组的P激素水平均数增长幅度高于安胎失败组,以孕5、6、7、8周显著高于安胎失败组(P＜0.05或P＜0.01).安胎成功组的E2水平均数增长幅度从孕6周开始显著高于安胎失败组(P＜0.01).结论 E2低是导致安胎失致的重要因素之一,而β-HCG、P、E2联合测定时判断安胎结局更有临床价值.
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右归丸对去势骨质疏松大鼠钙磷代谢和 骨代谢的影响
目的:观察右归丸对去卵巢骨质疏松模型大鼠钙磷代谢和骨代谢的影响,探讨其干预机制.方法:将大鼠随机分为假手术组,模型对照组,右归丸低、中、高剂量组,戊酸雌二醇组6组,每组10只.除假手术组外,其余各组采用去卵巢法制备大鼠骨质疏松症模型,假手术组大鼠仅切除卵巢周围脂肪.造模成功后12周,戊酸雌二醇组给予雌激素戊酸雌二醇片(0.09μg/g)灌胃,假手术组和模型对照组给予等体积蒸馏水灌胃,右归丸干预组按高、中、低剂量依次给予右归丸5,10,20g/kg灌胃,1 d 1次,连续4周.末次给药结束,检测股骨组织中的骨密度(bone mineral density,BMD);股动脉采血检测血清的钙(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)含量,骨钙素(osteocalcin,BGP)含量和抗酒石酸酸性磷酸酶(tar-trate resistant acid phosphatase,trACP)含量;处死大鼠,取材计算胸腺、脾脏及肾脏指数,检测生物力学指标断裂载荷和定伸长-位移.结果:与模型对照组对比,假手术组大鼠股骨BMD水平、血清BGP、Ca和P含量升高,胸腺指数、脾脏指数和肾指数升高,股骨断裂载荷、定伸长-位移也升高,而血清trACP含量降低,差别均有统计学意义(P<0.05).与模型对照组对比,右归丸3个剂量组大鼠股骨BMD水平,血清Ca、P和BGP含量、股骨定伸长-位移升高,中、高剂量组胸、脾指数和断裂载荷升高,高剂量组肾指数亦升高,差别有统计学意义(P<0.05);而高剂量组大鼠血清trACP的含量则较模型对照组降低,差别有统计学意义(P<0.05).结论:右归丸通过提高去卵巢骨质疏松大鼠骨密度和改善骨代谢达到防治骨质疏松的目的.
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嘛呢骨痹胶囊对骨质疏松大鼠骨代谢指标的影响
目的:观察嘛呢骨痹胶囊对骨质疏松大鼠血清钙、磷水平及尿脱氧吡啶酚(deoxypyridinoline,DPD)和尿肌酐(creatinine,Cr)比值(DPD/Cr)的影响.方法:取SD雌性大鼠72只,随机抽取12只为假手术组,其余大鼠手术切除双侧卵巢以建立大鼠骨质疏松模型；将手术组大鼠60只随机分为结合雌激素(1 ×10-5 g/kg)组,模型对照组,嘛呢骨痹胶囊低、中、高剂量(0.337 5,0.675 0,1.350 0 g/kg)组5组；术后7d灌胃给药,假手术组、模型对照组予以等量生理盐水,连续治疗12周.实验结束处死大鼠,检测各组大鼠血清Ca、P水平,尿DPD/Cr比值.结果:与模型对照组对比,嘛呢骨痹胶囊高剂量组血Ca水平升高,尿DPD/Cr比值降低,差别有统计学意义(P值依次为P＜0.05,P＜0.01)；嘛呢骨痹中、低剂量组Ca水平升高,但差别无统计学意义(P＞0.05)；在血P方面,嘛呢骨痹胶囊低、中、高剂量可升高去卵巢大鼠的血磷水平,但差别无统计学意义(P＞0.05).与结合雌激素组对比,嘛呢骨痹胶囊高、中剂量组血Ca、血和尿DPD/Cr比值均差别无统计学意义(P＞0.05).结论:嘛呢骨痹胶囊可升高去势大鼠骨质疏松模型血清钙、磷水平,降低尿DPD/Cr比值,从而降低骨高转换率,有效抑制骨质疏松症骨量的丢失,对骨质疏松有一定的治疗作用.
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术竭异位安胶囊对子宫内膜异位症大鼠治疗作用的实验研究
目的 观察术竭异位安胶囊对子宫内膜异位症大鼠的治疗作用.方法 手术移植法制备大鼠子宫内膜异位症模型,将模型大鼠分为术竭异位安胶囊低、中、高剂量组,灌胃给药4周,观察各组异位内膜外观,异位灶生长情况,进行组织形态学检查;放免法测定血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)、6-酮-前列环素(6-k-PG)、血栓素B2(TXB2)的含量.结果 术竭异位安胶囊各剂量组异位内膜包块积液量明显减少,体积变小,生长受到抑制,异位内膜呈萎缩相,内膜变薄,表面上皮变矮,未增生形成腺体,间质细胞小而稀疏,大鼠血清E2、P、6-k-PG 、TXB2水平降低并趋于正常.结论 术竭异位安胶囊对异位内膜具有明显萎缩作用,可通过调节激素水平而促使异内膜萎缩.
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自拟补肾安胎方治疗复发性流产的临床观察
目的:探讨自拟补肾安胎方治疗复发性流产的临床疗效.方法:选取符合纳入标准的复发性流产患者76例,随机分为两组,每组38例,对照组予西医常规治疗,治疗组在此基础上联合自拟补肾安胎方口服治疗,连续治疗至妊娠12周,疗程结束后观察两组患者临床疗效、中医证候积分及不同治疗时相孕酮(P)数值(治疗第6、8、10周)等指标.结果:治疗组临床总有效率为89.5％,显著高于对照组的78.9％,差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者中医症状积分均较前下降,而治疗组下降幅度更显著,差异均有统计学意义(P＜0.05);治疗第8周前治疗组患者血P数值水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),而10周后差异无统计学意义(P＞0.05).结论:自拟补肾安胎方治疗复发性流产的临床疗效确定,可提高孕酮水平,改善黄体功能,提高妊娠成功率.
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韶关地区ABO,Rh,MN,P血型分布
目的 掌握韶关地区人群的ABO,Rh,MN,P血型的分布规律,为献血者招募及科学合理库存血液提供理论依据.方法 采用U型96孔微量板对献血者血样进行ABO正反定型及Rh,MN,P血型检测,结果 可疑者用试管法确认.结果 ABO血型基因频率r＞P＞q,表型分布特征为O＞A＞B＞AB;Rh(D)阴性占0.16%;A2亚型在AB型的检出率高于在A型的检出率;MN血型的基因频率m＞n,表型分布特征为MN＞M＞N;P血型的基因频率p2＞p1,表型分布特征为P2＞P1.结论 本地区血型分布特征为O型所占比例多,且A型多于B型、A2亚型检出率高,Rh(D)阴性率低;应加大O型、A型献血者的招募和保留及相应增加其库存量,特别是要加强Rh(D)阴性献血者的档案管理和Rh(D)阴性血液的保存.
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126周期体外受精-胚胎移植临床结局与分析
目的:了解影响体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的因素.方法:用常规IVF-ET技术对123例妇女进行了126周期的治疗,对比分析妊娠组与非妊娠组的不孕原因、治疗方案、用药情况、注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日的相关激素水平、获卵数、受精率、卵裂率、移植胚胎数、冷冻率、内膜厚度等指标对妊娠结局的影响.结果:非妊娠组HCG日的雌二醇(E2)及孕激素(P)水平高于妊娠组(P＜0.001);两组间E2/P比值差异有统计学意义(P＜0.05).结论:HCG日的E2、P水平和E2/P比值与IVF-ET结局相关.
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丹皮酚对乳腺增生病模型大鼠体内激素及激素受体表达的影响
目的:研究丹皮酚对乳腺增生病的干预及治疗作用.方法:注射外源性苯甲酸雌二醇、黄体酮建立乳腺增生病大鼠模型.给药4周后,检测各组大鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)、垂体泌乳素(PRL)的含量;取乳腺组织做病理切片,检测组织中的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达.结果:与模型组相比,丹皮酚可有效降低E2、PRL及ER表达,大剂量且可升高P水平.结论:丹皮酚可以有效干预大鼠乳腺增生病,其治疗作用随剂量的增加体现一定的量效关系.
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大黄不同萃取物对大鼠子宫卵巢形态结构及血清中P、T、E2激素水平的影响
目的:筛选大黄产生生殖毒性的主要萃取物,为生殖毒性成分的研究奠定基础.方法:依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇对大黄水煎液进行萃取,得到相应的萃取物和水溶物.60只SD雌性大鼠随杌分为正常对照组、大黄水煎液组、氯仿萃取物组、乙酸乙酯萃取物组、正丁醇萃取物组、水溶物组,各组用药剂量均相当于大黄生药4.0g/kg,连续灌胃给药60天,末次给药后24h取血清、子宫、卵巢,HE染色,光镜下观察子宫腺体、卵巢中各级卵泡的结构变化;ELISA法检测大鼠血清中P、T、E2激素水平.结果:(1)组织结构:与正常对照组相比,各给药组子宫均出现不同程度的腺体扩张,上皮细胞呈扁平状,部分呈空泡状或高柱状,部分增生,数量增多,核增大.血管数量增多,扩张呈囊状.问质疏松、水肿.氯仿萃取物组表现明显,乙酸乙酯萃取物组次之;各给药组卵巢中各级卵泡数均减少,黄体数、闭锁卵泡数增多,氯仿萃取物组卵巢中颗粒细胞减少,卵泡内细胞排列紊乱.(2)血清激素水平:与正常对照组比较大黄各萃取物组及大黄水煎液组大鼠血清中P、T激素水平均降低,E2激素水平均升高.其中氯仿萃取物组激素水平变化为显著.结论:初步确定氯仿萃取物为大黄产生生殖毒性的主要萃取物.
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补经合剂对初老大鼠血清激素水平和卵巢、子宫病理形态学的影响
目的:探讨补经合剂补肾益气、养血调经功效的机理.方法:以雌性初老大鼠为自然肾虚模型,采用放射免疫分析法(RIA)测定了该药对血清中雌激素(E2)、孕激素(P)、雄激素(T)、催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的影响,同时观察了给药大鼠卵巢、子宫组织的病理形态学变化.结果:补经合剂能显著地升高大鼠血清中E2的水平;而对FSH、LH、T、PRL无明显影响.卵巢、子宫组织病理形态学观察发现:补经合剂可增加初老大鼠卵巢各级卵泡、黄体数目等.结论:补经合剂具有增加血清中E2、P的作用,并有促进卵泡生长,增加子宫内膜厚度的作用.
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大鼠模拟经前期综合征(PMS)肝气逆证动情周期血清激素水平的测定基金项目:国家中医药管理局资助课题 No:972035
本实验通过对雌性正常青年大鼠(未孕)和经脉冲电剌激5天造模大鼠血清激素的测定,结果发现:未孕正常大鼠血清中泌乳素(PRL)、雌二醇(E2)、孕酮(P)在动情期的前、中、后三期变化很显著(P<0.001);造模未孕大鼠三种激素除孕酮在中后期变化不显著、雌二醇在前中期较显著(P<0.01)外,其余均很显著(P<0.001),且三种激素与正常未孕相应期比除孕酮的中期变化不显著外,其余均变化很显著(P<0.001).
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清远市瑶族人群血型分布调查
目的 了解清远市瑶族人群血型分布情况.方法 采用微量板法分别检测ABO、Rh、MN、Ss、P血型系统血型.结果 1 559名受检者血型结果经x2检验,无显著性差异,其分布符合Hardy-Weiberg平衡.ABO血型分布以O型多,O>A>B>AB,基因频率r=0.6938,民族指数=1.095;Rh血型表现型中以CCDee型多,占0.6280,基因复合体频率以Cde为多,达0.7925,基因频率D为0.9747;基因频率m=0.5603,n=0.4397;S=0.0603,s=0.9397;P血型分布为:P2>P1,基因频率P1=0.1970,P2=0.8030.结论 清远瑶族人群ABO血型频率符合长江流域的华东型血型频率分布特点,Rh、MN、Ss、P各血型分布结果进一步表明该民族的血型分布在北方和南方之间,更接近南方人群的血型分布特点.
