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围产期低剂量氯化三丁基锡暴露对子代青春期雄性小鼠发育及性激素水平的影响
目的 探讨围产期低剂量氯化三丁基锡( TBTCl)暴露对子代雄性小鼠发育及血清、睾丸组织中雌激素(E2)和雄激素(T)水平的影响.方法 将20只妊娠6d的SPF级昆明小鼠采用经口灌胃方式进行染毒,剂量为0(对照,玉米油)、1、10、100 μg/kg TBTCl溶液,每组5只,染毒至哺乳期结束.仔鼠断乳后每周称量一次体重.出生49天(PN D49)时,每组随机抽取10只雄性仔鼠,测定睾丸、附睾、脑、肝、肾、胸腺重量,并计算脏器系数.测定血清和睾丸组织中E2和T水平.结果 与对照组相比,除100 μg/kg剂量组在PND21、28、35、42、49时体重显著降低(P＜0.05,P＜0.01)外,其他各组体重均无显著差异；除100μg/kg TBTCl染毒组睾丸系数升高(P＜0.01)外,肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、附睾的脏器系数均无显著差异；除10及100 μg/kg TBTCl染毒组睾丸组织中E2水平降低(P＜0.05,P＜0.01)外,其他各组血清和睾丸组织中E2和T水平均无显著差异.结论 围产期低剂量TBTCl暴露不仅影响雄性小鼠的生长发育,而且降低了睾丸组织中E2水平,并可扰乱小鼠血清、睾丸组织内的雌、雄激素水平的平衡.
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围产期低剂量氯化三丁基锡暴露对子代青春期小鼠精子质量的影响
目的 探讨围产期低剂量氯化三丁基锡(TBTCl)暴露对子代雄性小鼠青春期精子质量的影响.方法 将20只妊娠6d的SPF级昆明小鼠随机分为4组,分别为100、10、1μg/gTBTCl染毒组和对照(玉米油)组,每组5只.从妊娠第6天开始,于每天同一时间经口灌胃染毒,染毒容量为1 ml/kg,至哺乳期结束(出生后21d).于出生后28 d开始观察包皮分离的日龄.出生后第49天,取附睾做精子计数,并统计精子畸形情况.结果 与对照组比较,100μg/kgTBTCl染毒组小鼠的精子计数显著下降(P＜o.0l),各剂量TBTCl染毒组小鼠精子畸形率显著升高(P＜0.05,P＜0.01)；且随着TBTC1染毒剂量的升高,小鼠精子计数呈下降趋势,精子畸形率呈升高趋势.而各剂量TBTCl染毒组小鼠包皮分离时间仅略有延迟.结论 围产期低剂量TBTCl暴露可导致青春期雄性小鼠精子质量下降.
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围产期低剂量氯化三丁基锡暴露对子代成年雄性小鼠发育及性激素水平的影响
目的 探讨围产期低剂量氯化三丁基锡(tributylin chloride,TBTCl)暴露对子代成年雄性小鼠发育及血清、睾丸中雌激素(E2)和睾酮(T)水平的影响是否具有持续性.方法 A将20只妊娠6d的SPF级昆明小鼠采用经口灌胃方式染毒0(对照,玉米油)、1、10、100μg/kg TBTC1溶液,每组5只,每天1次,染毒至哺乳期[出生后21 d(PND21)]结束.仔鼠断乳后每周称量一次体重.至PND 84时,每组随机抽取10只雄性仔鼠,测定脾脏、肝脏、肾脏、胸腺的重量,并计算脏器系数;测定血清和睾丸匀浆组织中E2和T水平.结果 与对照组比较,100 μg/kg TBTC1组子代成年雄性小鼠在PND0、49、56、63、70、77时的体重均显著降低(P＜0.05,P＜0.01),PND84时各剂量TBTC1染毒组体重均无显著改变;脾脏重量及其脏器系数均显著升高(P＜0.05),而肾脏重量及其脏器系数均显著降低(P＜0.05),而肝脏和胸腺重量及其脏器系数均无显著变化;100 μg/kg TBTC1染毒组睾丸组织匀浆中E2水平显著降低(P＜0.05),而血清中E2和T水平及睾丸组织匀浆中T水平均无显著变化.结论 围产期低剂量TBTCI暴露对子代成年雄性小鼠的发育和睾丸组织中的E2水平具有持续的毒性作用.
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氯化三丁基锡致巨噬细胞凋亡作用
目的 探讨氯化三丁基锡(tributyltin chloride,TBTC1)致巨噬细胞株RAW264.7细胞的凋亡作用.方法 当RAW264.7细胞处于代数生长期时,分别加入不同浓度(0.0,0.025,0.05,0.10,0.20,0.40 mg/L)的TBTC1处理48 h,分别用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,观察TBTCI对RAW264.7细胞增殖影响;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法观察凋亡细胞的形态,流式细胞仪检测TBTC1对RAW264.7细胞的凋亡率.结果 TBTC1能抑制RAW264.7细胞的增殖,其半数抑制浓度(IC_(50))=0.179 mg/L;TBTCI也能诱导细胞的凋亡,当TBTC1达到0.40mg/L时,细胞凋亡率达到19.5%.结论 TBTC1可诱导细胞凋亡.
关键词： 氯化三丁基锡 RAW264.7细胞 细胞凋亡 -
氯化三丁基锡对大鼠睾丸支持细胞的影响
[目的]探讨氯化三丁基锡对雄性SD大鼠睾丸支持细胞活力和增殖的影响.[方法]无菌制备20-23天龄SD大鼠的睾丸支持细胞,用ICE染色、FAS-L免疫组化染色进行细胞鉴定.设空白对照组、溶剂对照组和20×10(-9)、40×10(-9)、80×10(-9)、120×10(-9)mol/L氯化三丁基锡染毒组,用四唑盐比色法(MTT)、免疫细胞化学法观察细胞增殖及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况,流式细胞仪分析细胞周期分布.[结果]各染毒组睾丸支持细胞的存活率明显低于对照组(P<0.05),G0/G1期细胞构成比增加,细胞增殖指数下降,80×10(-9)、120×10(-9)mol/L染毒组PCNA表达量下降.[结论]氯化三丁基锡可通过抑制睾丸支持细胞增殖,影响细胞周期分布和PCNA表达而表现出对雄性大鼠的生殖毒性.
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氯化三丁基锡对泥蚶SOD的影响
从泥蚶中提纯超氧化物歧化酶(SOD),分析不同浓度氯化三丁基锡(TBTCl)在不同条件下对泥蚶SOD活性的影响.结果表明,TBTCl在室温条件下对SOD活性的影响比在4℃条件下大很多,室温下TBTCl浓度达200μg·mL-1(以Sn含量计)时与SOD作用72h酶活力只保留了58.1%,而在4℃下酶活力还保留了90.9%;随着TBTCl浓度的增大及作用时间的延长,SOD的活性逐渐降低;TBTCl使SOD的耐热、耐酸碱能力降低;PAGE显示,SOD同工酶谱带随着TBTCl浓度的增大而逐渐消失.
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氯化三丁基锡对小鼠肢芽细胞遗传毒性的实验研究
目的 了解环境污染物氯化三丁基锡(TBTCl)对小鼠胚胎肢芽细胞的遗传毒性.方法 将孕12d昆明种小鼠颈椎脱臼处死,分离胚胎,切取肢牙,剪碎,0.125%胰酶消化,用无血清的Ham's F12基础培养基将其制成单细胞悬液.加入不同浓度的TBTCl,使其终浓度分别为:0、0.1、0.2、0.4、0.8mg/L.37.5℃恒温孵育2 h,取细胞悬液做彗星实验.结果 TBTCl染毒组随染毒剂量的浓度的增高,肢芽细胞彗星拖尾率和尾长分别从对照组的4.0%和(9.7±4.3)μm升到0.8 mg/L TBTCl组的61.7%和(26.9±12.5)μm,呈明显的剂量-反应(效应)关系.结论 TBTCl能损伤昆明种小鼠胚胎肢芽细胞DNA,具有遗传毒性.
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生物及食物样品中有机锡的气相色谱法测定
近年来有机锡污染较为严重,尤其以二丁基锡及三丁基锡为甚,这两种化合物广泛应用于农业及工业领域,较易引起食物等的延续性污染.为了检测氟化二丁基锡和氯化三丁基锡的含量,我们建立了气相色谱测定法.该方法灵敏、快速且易于实施,现报告如下.
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TBTCl致PC-12细胞凋亡及Bax/Bcl-2表达的变化
目的 研究氯化三丁基锡(TBTCl)致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC-12细胞)凋亡作用及Bax与Bcl-2 mRNA表达的变化.方法 当PC-12细胞处于代数生长期时,分别加入不同浓度(0.000、0.013、0.025、0.050、0.100、0.200、0.400 mg/L)的TBTCl处理48 h,MTT试验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测Bax 和 Bcl-2 mRNA 的含量.结果 随着TBTCl染毒浓度的增高,其对PC-12 细胞增殖的抑制作用逐渐增强,当TBTCl浓度为0.400 mg/L时,其抑制率达到(68.25±3.83)%,IC50=0.15 mg/L,而细胞的凋亡率由对照组的(0.8±0.3)%上升到(25.4±1.5)%;TBTCl能上调Bax基因和下调Bcl-2基因的表达,0.400 mg/L TBTCl组Bax和Bcl-2分别是对照组的5.1±0.6倍和0.25±0.08倍.结论 TBTCl能抑制PC-12细胞的生长,诱导细胞凋亡,其可能机制是上调Bax 基因的表达和下调Bcl-2 基因的表达.
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氯化三丁基锡对体外培养小鼠胚胎毒性研究
目的观察氯化三丁基锡的体外培养小鼠胚胎毒性.方法采用全胚胎培养技术,将8.5 d龄昆明种小鼠胚胎置入含有不同浓度氯化三丁基锡的大鼠离心血清中旋转培养48 h,观察体外培养小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的变化.结果氯化三丁基锡在0.05 mg/L以上时能诱发卵黄囊生长和血管分化不良,胚胎发育异常率增高;高浓度组能诱发脑小、心脏畸形(心小和心包积液)、前肢芽小或无、无后肢芽.结论体外实验条件下,氯化三丁基锡对小鼠胚胎具有胚胎毒性和致畸性.
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氯化三丁基锡对斑马鱼胚胎发育的影响
目的 观察氯化三丁基锡(Tributyltin chloride,TBTC1)对斑马鱼胚胎发育和幼鱼死亡的影响.方法 成年健康斑马鱼雌雄按1:1的比例交配产卵,分别用不同质量浓度的TBTC1对受精后4 h(Four-hour post-fertilization,4 hpf)斑马鱼进行染毒实验,统计斑马鱼胚胎受精后48 h的心率,72 h的孵出率,24、48、72、96、120 h的死亡率和畸形率.结果 与对照组相比较,随着TBTC1染毒质量浓度的增加,斑马鱼胚胎的孵化率降低、心跳减缓、畸形率和死亡率增加.当TBTC1达到80μg/L时,斑马鱼的48 hpf的心率由对照组的(182.5±3.6)次/min下降到(130.3±3.2)次/min,72 hpf的孵出率由对照组的97.46%下降到23.08%,并且120 hpf的死亡率为65.00%、畸形率为69.17%.结论 TBTC1能影响斑马鱼胚胎发育,导致斑马鱼胚胎和幼鱼的畸形与死亡.
