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  • 慢性铝暴露对大鼠海马细胞外调节蛋白激酶2及cAMP反应元件结合蛋白mRNA和蛋白表达的影响

    作者:王彪;毕强;孟晓娜;崔鑫;宗志红;邢伟

    目的 通过观察细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)通路的变化,研究慢性铝暴露对大鼠学习记忆功能的影响机制.方法 将80只初断乳清洁级雄性Wistar雄性大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和2、4、6 mg/ml三氯化铝染毒组,每组20只.采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒3个月.测定大鼠脑铝和血铝含量,采用Western Blot法和Real-time PCR(RT-PCR)法分别检测海马组织中ERK2和CREB mRNA及蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,各浓度铝染毒组大鼠血铝和脑铝含量均升高,海马组织中ERK2和CREB蛋白及mRNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05);且随着铝染毒浓度的升高,大鼠血铝和脑铝含量呈上升趋势,海马组织中ERK2和CREB蛋白及mRNA的表达水平均呈下降趋势.结论 慢性铝暴露可能通过抑制大鼠海马中ERK2/CREB通路而损伤大鼠的学习记忆能力.

  • ERK2的CC区域在HeLa细胞中的定位作用

    作者:张斌;王伟;凡进;李翔;张宁;范卫民;殷国勇

    目的 探索细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)的coiled-coil(CA3)区域在表皮生长因子(EGF)所诱导的HeLa细胞中的定位作用.方法 用定点突变试剂盒删除ERK2的盘绕结构[ERK2(del CC)],免疫共沉淀的方法检测ERK2(del CC)在EGF刺激的条件下和G蛋白耦联受体激酶相互作用分子1(GIT1)的相互关系,免疫荧光染色检测ERK2(del CC)在细胞内的位置以及和GIT1的相互关系.结果 成功删除ERK2的CA3区域;免疫共沉淀结果显示,删除ERK2的CC区域显著抑制了ERK2和GIT1在EGF刺激条件下的相互结合;免疫荧光染色结果显示,删除ERK2的CC区域显著抑制了磷酸化的ERK2在细胞局部黏附内的定位.结论 在EGF的刺激条件下,增加了ERK2和GIT1的相互结合,ERK2的CC区域是与GIT1相互结合的重要区域.删除ERK2的CC区域不仅显著抑制了ERK2和GIT1的相互结合,而且明显降低ERK2在细胞局部黏附内的定位.

  • ERK2在胃黏膜病变中的表达及其与Hp感染的关系

    作者:雷琳;黄亚平;朱庆茹;江霞

    目的 探讨胃癌前病变及胃癌组织中细胞外调节蛋白激酶2(extracellular regulated protein kinases 2,ERK2)表达与幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染的相关性,及Hp感染与胃癌发生的关系.方法 收集慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)、慢性萎缩性胃炎伴中重度肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)、慢性萎缩性胃炎伴中重度不典型增生(dysplasia,Dys)各30例及胃癌(gastric cancer,GC)40例,采用SP免疫组化法,检测4组中ERK2蛋白的表达.结果 CSG、IM、Dys、GC组织中,Hp感染患者胃黏膜组织中ERK2表达水平高于无Hp感染患者(P<0.05).结论 Hp感染可能通过上调ERK2表达水平,从而在胃癌发生、发展过程中发挥重要作用.

  • 促凋亡蛋白Bad和细胞外调节蛋白激酶对膀胱癌多重耐药细胞的作用机制研究

    作者:曾繁畅;唐正严;岑松;康新立

    目的 检测人膀胱癌耐药细胞T24/Ifex和亲本细胞T24中细胞外调节蛋白激酶(ERK)1、ERK2、ERK5和Bad的表达,探讨其对膀胱癌细胞多药耐药(MDR)的影响.方法 人膀胱癌耐药细胞株T24/Ifex用小剂量缓慢诱导法诱导;CCK-8法检测T24/Ifex对多种化疗药物的敏感性;Western blot检测MRP-1、P-gp、ERK1、ERK2、ERK5和Bad蛋白的表达;荧光定量PCR检测Bad mRNA的表达.结果 成功建立膀胱癌耐药细胞株T24/Ifex,其对Ifex、DOC和CDDP的耐药指数分别为7.359、3.892和4.297,且高表达MRP-1和P-gp蛋白.与亲本细胞T24比较,T24/Ifex中ERK1、ERK2和ERK5的表达升高,ERK1蛋白磷酸化水平无显著变化,ERK2磷酸化水平下降,且p-ERK1/2与ERK1/2的比值下降.Bad的mRNA和蛋白表达下降.结论 ERKs和Bcl-2家族促凋亡蛋白Bad表达与人膀胱癌MDR的发生密切相关.

  • 胃癌及癌前病变组织ERK2表达的相关性研究

    作者:黄亚平;雷琳;朱庆茹

    目的 探讨细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)的表达与胃癌发生、发展的关系.方法 收集慢性浅表性胃炎(CSG)、慢性萎缩性胃炎伴中重度肠上皮化生(IM)、慢性萎缩性胃炎伴中重度不典型增生(Dys)的病理资料各30例及胃癌(GC)40例,采用SP免疫组化法检测ERK2蛋白的表达.结果 CSG、IM、Dy5、GC组织中ERK2表达呈逐渐增强趋势,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 ERK2表达在胃癌的发生、发展过程中起到一定的作用.

  • TFF3和ERK通路在甲状腺乳头状癌中的表达和意义

    作者:张芸芸;张静;张文静;李燕萍;吴靖芳;原野;薛刚

    目的 探讨三叶因子3(Trefoil Factor 3,TFF3)、细胞外调节蛋白激酶2(Extracellular Regulated Protein Kinases 2,ERK2)及其磷酸化状态(p-ERK1/2)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达水平和临床意义.方法 采用Western Blot和免疫组织化学法检测60例甲状腺乳头状癌组织,30例甲状腺腺瘤组织(adenoma,A),30例瘤旁正常甲状腺组织(normal group,N)TFF3、ERK2、p-ERK1/2蛋白的表达情况,分析三种指标在甲状腺乳头癌中的表达阳性率与其临床病理特征的关系.结果 Western Blot结果显示TFF3、ERK2、p-ERK1/2蛋白在甲状腺乳头状癌组织表达水平均高于正常组和腺瘤组(P<0.05).免疫组化结果显示TFF3、ERK2、p-ERK1/2阳性蛋白呈棕黄色颗粒,TFF3主要表达于胞浆,ERK2为胞浆(膜)阳性,p-ERK1/2以胞核阳性为主,部分细胞胞浆阳性.TFF3、ERK2、p-ERK1/2在甲状腺乳头状癌中阳性表达率分别为85.0%、81.7%、78.3%,明显高于腺瘤组和正常组(p<0.05),并与病理分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05),TFF3与ERK2、p-ERK1/2的表达呈正相关(r=0.415,r=0.467,P<0.01).结论 TFF3可能通过ERK通路促进了甲状腺乳头状癌的发展及转移.

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