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四联袋分离脐血干细胞方法及临床效果初步研究
目的 探讨一种高效实用、安全且具有临床应用价值的分离脐血干细胞方法,并研究多次、多份脐带血干细胞静脉叠加输注治疗股骨头坏死的临床安全性和疗效.方法 ①应用四联袋结合无菌接口技术制备脐血干细胞,对分离后单个核细胞(MNC)数、MNC收率、CD34+>细胞数、台盼蓝拒染率、红细胞混入量进行检测.②将四联袋分离的脐血干细胞静脉输注给8例股骨头坏死患者,观察患者髋关节疼痛程度、性质及时间变化、髋关节外展与内旋功能变化、行走距离及步态变化;细胞移植后6个月,观察X线图像、股骨头形态学变化.结果 ①四联袋结合无菌接口技术分离的脐血MNC收率高,效果好且分离过程不易发生微生物污染.②8例患者临床症状均有不同程度的缓解或消失,有效率100%;细胞移植后6个月,X线图像、股骨头形态学有不同程度改善.③在细胞移植过程中及移植后均未发生并发症和发热、过敏等不良反应.结论 ①四联袋分离脐血干细胞是一种效率高、安全且具有临床应用价值的分离方法.②经静脉多次、多份输注脐血间质干细胞,是全身整体治疗股骨头坏死的一种新手段.③多份脐血干细胞不需ABO、HLA配型输注.
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仪器分离全血现状
为避免与单采献血者机器采集的血液成分,主要是单采血小板的分离过程相混淆,这里需要强调的是:本文所指的仪器分离,主要是在血站行业内运用的,针对用多联袋(三或四联袋)采集的全血离心后(1次或2次),通过仪器进行自动分离血浆、红细胞、血小板等的过程.
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用四联袋采集全血制备冷沉淀的体会
目的:探讨制备冷沉淀方便、实用、能有效保证质量的方法.方法:对2002年7月至2004年9月采用四联袋采集全血,分离出新鲜冰冻血浆于三联袋中,再在密闭系统中制备冷沉淀共19批741袋(u)进行回顾性分析.结果:制备的冷沉淀 FⅧ:C＞80 IU和Fib＞150 mg,经培养无细菌生长,符合质量要求.结论:采用四联袋采集全血,再在密闭系统中制备冷沉淀的方法方便、实用,能有效防止细菌污染,保证血液质量 ,值得推广应用.
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四联袋分离的脐血干细胞临床应用8例
背景:试管法分离脐血干细胞效率低,易发牛微生物污染,应用临床安伞性得不到保证,寻找一种能满足临床需要的脐血干细胞分离方法用于治疗骨股头坏死尤为迫切.目的:拟建屯一种高效、安全且具有临床应用价值的脐血干细胞分离方法.设计、时间及地点:自身前后对照实验,于2006-02/2007-08在河南省红十字血液中心血液成分应用研究所及郑州市第二人民医院外一科完成.对象:2006-02/2007-08在郑州市第二人民医院外一科住院和门诊收治的股骨头坏死患者8例,均为男性,平均年龄40.6岁,4例合并激素应用史.脐带血来自郑州市妇幼保健院正常足月分娩的健康胎儿,平均采血量90 mL.分离所片j叫联袋包括1个主袋、1个空袋、2个生理盐水袋,为山东威高集团产品.方法:将采集6 h内的脐血用无菌接口机与四联袋的1个空袋相连,离心分出部分血浆后,剩余的红细胞内加入羟乙基淀粉充分混匀,静止5 min后加入氯化钠液等倍稀释,淋巴细胞分离液倒入四联袋的主袋内,按1:1比例将脐血缓缓加入盛有淋巴细胞分离液的主袋内,离心后白膜层流入另1个空袋内,此袋即为富单核细胞溶液.将保存24 h内的脐血单个核细胞用脐血浆悬浮后,经手背浅静脉输注给股骨头坏死患者,单个核细胞≥1×108/份,2份/次,间隔3 d后再次输注,共3次,此为1个疗程,共3个疗程,每个疗程间隔两三个月.主要观察指标:脐血单个核细胞回收率及细胞活性,患者临床症状改善情况.结果:分离的脐血单个核细胞收率高、效果好,且分离过程不易发生微生物污染.8例患者关节疼痛均有不同程度的缓解或消失,有效率 100%;髋关节外展与内旋功能、行走距离及步态变化均有明显改善.细胞移植后6个月,5例可见不同程度的股骨头坏死区骨质密度的改变,2例股骨头形态恢复正常,另外1例无变化;12髋关节腔积液减少或消失,9髋MRl图像低信号区所占股骨头体积的百分比减少,3髋无变化.在细胞移植过程中及移植后均无并发症及发热、过敏等不良反应.结论:应用四联袋结合无菌接口技术分离脐血干细胞高效、安全,且具有临床应用价值,经静脉多次、多份输注脐血干细胞为伞身整体治疗股骨头坏死提供了一种新的手段.
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四联袋制备年轻红细胞悬液的研究与应用
输注年轻红细胞(YRBC)对于长期依赖输血的各类慢性贫血患者,临床意义显著[1].年轻红细胞的采集制备大多采用全自动血细胞分离机单采或从全血中分离制备[2-4],设备昂贵,且一次性耗材成本很高,目前在我国仍难以推广普及.
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四联袋制备年轻红细胞悬液的研究
目的研究简便易行的常规储存备用的年轻红细胞分离制备方法.方法应用四联袋采集全血400ml,6h内,在4℃条件下以1960g离心5min,分离血浆及少量白膜层至一空袋,然后用特制分离夹从压积红细胞中部夹住,将上部50%红细胞移入另一空袋,将含腺嘌呤的50ml保存液移入年轻红细胞袋内,制成2U年轻红细胞悬液.结果应用此法制备年轻红细胞悬液,年轻红细胞的MCV＜成熟红细胞的MCV(P＜0.05),而年轻红细胞的MCHC＜成熟红细胞的MCHC(P＜0.01),与文献报道一致[3～5].年轻红细胞GOT活力显著＞成熟红细胞的GOT活力(P＜0.01).年轻红细胞悬液中网织红细胞(RC)平均增加值是分离制备前的1.87倍.分离过程全部在密闭系统内进行,年轻红细胞和成熟红细胞均以CPD-A保存液制成悬液,可常规储存备用.结论此法制备的年轻红细胞悬液,其RC计数、红细胞三种平均值测定、年轻红细胞酶活力均达到了年轻红细胞的质量标准,可以认为是一种简便易行且具有实用价值的方法.
