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金黄色葡萄球菌B型肠毒素的免疫磁分离间接竞争化学发光检测法
目的 建立快速、简便、灵敏度高的免疫磁分离(Immune magnetic separation,IMS)间接竞争化学发光法(Chemiluminescence,CL)检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素(Staphylococcal enterotoxin B,SEB).方法 首先,将SEB连接磁球,通过酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分析确定单克隆抗体的佳稀释度,然后对不同包被缓冲液、单抗与游离SEB反应时间、单抗与磁球上SEB反应时间、单抗与酶标抗体反应时间及鲁米诺发光系统佳检测时间进行优化,后用检测灵敏度、加标回收率以及特异性对该实验方法进行评价.结果 结果表明,抗SEB单克隆抗体的佳稀释浓度为0.82 μg/ml,使用浓度为2％的脱脂乳粉作为佳封闭液,酶标二抗稀释度为1∶4 000,单抗与SEB反应时间、单抗与磁球反应时间、单抗与酶标抗体反应时间、化学发光催化佳检测时间分别是20、30、15、5 min.该方法的线性回归方程为y=-0.161 61og5x+0.826 6,R2=0.992 4;检出限为4 ng/ml,用本地超市购买的脱脂牛奶、低脂牛奶和鲜牛奶进行加标回收,回收率在89.45％～110.5％之间.结论 成功构建了基于免疫磁分离的间接竞争化学发光(Immune magnetic separation chemiluminescence,IMS-CL)检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素的方法.
关键词： 免疫磁分离 间接竞争 化学发光 金黄色葡萄球菌B型肠毒素 -
免疫磁分离结合胶体金免疫层析法快速检测大肠杆菌O157∶H7
目的：探究免疫磁分离免疫磁分离结合胶体金免疫层析法快速检测大肠杆菌 O157∶H7的实验室效价。方法：将我院检验科保存的抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体用胶体金标记为标记抗体，在利用抗大肠杆菌 O157∶H7多克隆抗体制备胶体金免疫层析试纸条，用免疫磁分离分离待测样本后结合胶体金免疫层析法检测样本中的大肠杆菌 O157∶H7，观察比较单纯的胶体金免疫层析法与免疫磁分离处理后再用胶体金免疫层析法检测大肠杆菌O157∶H7灵敏度和检出情况。结果：纯培养样品检测结果显示，单纯的胶体金免疫层析法检测结果在浓度为7．6×104 CFU／mL 菌液呈弱阳性，表明检测低浓度为7．6×104 CFU／mL。而免疫磁分离结合胶体金免疫层析法在浓度为7．6×103 CFU／mL既可检测为阳性。大肠杆菌 O157∶H7培养基中37℃培养5h后，单纯的胶体金免疫层析法检测结果呈（－）；免疫磁分离后再用试纸条检测，结果呈（±）。结论：免疫磁分离结合胶体金免疫层析法在检测大肠杆菌 O157∶H7降低了细菌检出的底限浓度，提高了检出率。
关键词： 免疫磁分离 胶体金免疫层析法 大肠杆菌O157∶H7 -
?中文文摘?
1.唾液、血清和脓液对电化学测菌法检测牙龈卟啉单胞菌的影响／裴振华…／／实用口腔医学杂志.-2012，28（6）.-699-702
利用免疫磁分离捕获牙龈卟啉单胞菌后进行电化学阻抗测量，观察唾液、血清和脓液对电化学测菌法检测限和检测灵敏度的影响。结果：唾液对电化学测菌法的检测限无影响，但可降低其检测灵敏度；血清对电化学测菌法的检测限和检测灵敏度均无明显影响；脓液明显影响电化学测菌法对牙龈卟啉单胞菌的检测。结论：应用电化学测菌法检测样本时应避免脓液的污染。 -
免疫磁分离技术在电化学测菌法特异检测牙龈卟啉单胞菌中的应用
目的:探讨结合免疫磁分离技术实现电化学测菌法特异检测牙龈卟啉单胞菌的可行性.方法:利用结合特异抗体的磁颗粒捕获分离目的菌,观察免疫磁分离前、后检测样本的阻抗变化.分析磁颗粒、杂菌、抗体浓度、反应时间、温度、pH值对阻抗测量的影响.结果:与初始菌液相比,免疫磁分离后的阻抗值增加,但无统计学差异(P＞0.05)；磁颗粒和杂菌未对阻抗测量产生明显干扰；抗体浓度为1∶10稀释时系统阻抗变化明显；抗原抗体结合30 min时系统阻抗变化大,延长时间未见增加；温度在25～ 37℃范围内,系统阻抗变化较平稳,超过37℃时,系统阻抗值出现下降趋势；pH在7.0～7.5之间时,系统阻抗值较平稳.结论:免疫磁分离技术能够与电化学测菌法结合,实现细菌的特异检测.
