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MDS-RA患者外周血活化T细胞水平检测
骨髓增生异常综合征(MDS)是造血干细胞异常所致的恶性克隆性疾病，目前关于MDS异常造血和活化T细胞关系的研究甚少。为此，我们利用流式细胞仪双标记技术，检测18例MDS- RA患者外周血活化T细胞的水平，以探讨细胞免疫功能异常对造血的影响。对象和方法1 研究对象 MDS-RA患者18例，男12例，女6例，年龄9～58岁，中位年龄31岁，均符合MDS的诊断标准［1］。所有患者均为初治，2周内无感染、发热，亦未曾输过血,未用过细胞因子。正常对照12名，年龄20～42岁，中位年龄33.5岁。2 实验方法采用直接免疫法，取6个试管，分别向管中加入无关对照单抗和实验单抗CD3、 CD4CD25、CD8CD25、CD4HLA-DR、CD8HLA-DR各20?μl，CD3、CD 4、CD8（购于美国BD公司）标记FITC荧光素, CD25、HLA-DR（购于美国BD公司）标记PE荧光素。再加入肝素抗凝全血100?μl，孵育后加溶血剂，离心、洗涤、固定后上机检测。用流式细胞仪分析淋巴细胞，计算出标记CD4CD25、CD8CD25、CD 4HLA-DR、CD8HLA-DR的双阳性细胞百分率。3 血红蛋白的测定采用高铁氰化钾法。4 统计学处理采用两样本均数t检验及两组数据间相关性分析的显著性检验。结果1 MDS-RA患者外周血活化T细胞标志抗原表达 18例MDS-RA患者CD4+CD25+双阳性细胞表达略高于正常对照，差异无显著性（P>0.05）；CD8+CD 25+双阳性细胞表达明显高于正常对照（P<0.05）。CD4+HLA-DR +双阳性细胞表达略高于正常对照，差异无显著性（P>0.05）；CD8 +HLA-DR+双阳性细胞表达明显高于正常对照（P<0.05）(表1)。表1 MDS组与正常对照组活化T细胞水平比较（%，眘?
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乙酰丙酮法测定甲壳胺寡糖数均分子量
采用乙酰丙酮与氨基端反应的生色原理,将乙酰丙酮法应用于甲壳胺寡糖数均分子量的测定.通过对方法的重复性、精密性和稳定性试验,证明方法可靠.同时,通过对已报道测定甲壳胺寡糖端基相对分子质量的铁氰化钾法、HPLC法进行比较.结果表明:乙酰丙酮法比铁氰化钾法更适合甲壳胺寡糖数均分子量的测定.
