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光动力治疗对高危型人乳头瘤病毒 E6、E7基因表达影响的研究
目的:研究5-氨基酮戊酸结合光动力疗法(photodynamic therapy using 5-aminolaevulinic acid , ALA -PDT)对 Hela细胞内人乳头瘤病毒(human papillomavirus ,HPV)18 E7、E7基因表达的影响。方法按照不同的氨基酮戊酸浓度(20%、1%、0.1%、0.002%),将 H ela细胞分为1组、2组、3组、4组和无处理的对照组。按各组条件处理 Hela细胞12h后,用逆转录聚合酶链反应和凝胶定量软件检测细胞中HPV 18 E6、E7 mRNA的表达情况。结果1组、2组、3组、4组 HPV 18 E7 mRNA 分别为对照组的26.81%、41.20%、61.83%、71.75%;E6 mRNA分别为对照组的0,0,34.02%、49.76%。结论5-氨基酮戊酸结合光动力疗法可抑制 Hela细胞内HPV 18 E6、E7 mRNA的表达。
关键词: 5-氨基酮戊酸结合光动力疗法 H ela细胞 人乳头瘤病毒 -
冷热护理刺激对人宫颈癌HeLa细胞克隆形成能力的影响及机制的初步研究
[目的]研究冷热护理刺激对人宫颈癌 H eLa细胞克隆形成能力的影响及机制,以期探索冷热护理的新作用机制,促进临床护理水平的提高。[方法]HeLa细胞按常规用DMEM 高糖培养基培养;按6孔板每孔100个~300个细胞的浓度接种并在不同培养温度情况下进行细胞克隆试验;提取在不同温度环境下生长的同批次 HeLa细胞的总 RNA,在逆转录反应后获得 cDNA,以此为模板,实施荧光定量分析不同温度环境下 pan QKI mRNA的表达水平。[结果]较高的环境温度能增强 HeLa细胞的克隆形成能力,抑制 pan QKI mRNA表达;但较低的环境温度则抑制了该细胞的克隆形成,同时,pan QKI mRNA表达水平显著增高。[结论]温度干预能对人宫颈癌 HeLa细胞的克隆能力产生影响,pan QKI 在不同温度环境中的表达变化可能是导致 HeLa细胞克隆形成能力差别的重要原因,温度干预的护理效用和机制值得深入探究。
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二甲基亚砜、二甲基酰胺、甲醇、乙醇四种溶剂对Hela细胞培养干预效应研究
目的:观察二甲基亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)、甲醇、乙醇四种常用有机溶剂对Hela细胞生存率的影响,为开展体外细胞干预实验研究选择溶剂种类和浓度提供参考。方法:采用MTT法检测四种溶剂各9个浓度下Hela细胞的存活率;在此基础上采用AnnexinⅤ‐FITC/PI双标记流式细胞术,观察8种不同浓度的乙醇对Hela细胞凋亡的影响。结果:四种有机溶剂不同浓度时对Hela细胞生存率产生不同影响,DMSO佳浓度为0.5%;DMF佳浓度0.1%,甲醇的佳浓度0.1%~0.5%;Hela细胞的存活率和凋亡结果均表明乙醇作为有机溶媒的佳浓度0.25%。结论:DMSO、DMF、甲醇、乙醇四种溶剂对Hela细胞活性和生存率存在负向影响,程度从小到大依次为乙醇、DMSO、DMF、甲醇,用于体外细胞培养的浓度大均不可超过0.5%;乙醇是体外细胞培养中较为理想的溶剂,但浓度不可超过0.25%,刺激时间不可超过12h。