首页 > 文献资料
-
苏子油对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌胰岛素敏感性相关基因表达的影响
目的：探究富含n－3多不饱和脂肪酸（ polyunsaturated fatty acid，PUFA）的苏子油高脂饮食对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性及其相关基因表达的影响。方法将胰岛素抵抗模型大鼠随机分为2组：高脂组（ high fat group， HF）和苏子油组（ perilla oil group， PO），PO为苏子油替代HF中猪油比例的20％，4周后测定大鼠胰岛素敏感性；气相色谱法检测苏子油及大鼠血清α－亚麻酸（α－linolenic acid， ALA）含量；Western blot方法检测骨骼肌葡萄糖转运蛋白4（glucose transporter 4，GLUT4）和胰岛素受体底物－1（insulin receptor substrate－1，IRS－1）蛋白表达；real time PCR方法检测骨骼肌Glut4、Irs－1 mRNA表达。结果苏子油干预4周后，与HF组相比，随着PO组大鼠ALA摄入量及血清ALA含量升高，GLUT4蛋白和mRNA表达量均显著升高，而IRS－1蛋白和mRNA表达均显著降低；高胰岛素－正常血糖钳夹实验结果显示两组大鼠胰岛素敏感性没有明显差异。结论 ALA（0．556 g／d）高脂饮食干预可以调节骨骼肌GLUT4、IRS－1表达，但不能改善胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性。
-
脂肪酸受体GPR120影响胰岛素受体底物-1的表达
目的 研究在3T3-L1脂肪细胞中G蛋白耦联受体120(GPR120)与胰岛素受体底物-1(IRS-1)的关系.方法 利用经典“鸡尾酒法”诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,以未诱导组作为阴性对照,通过油红O染色法检测细胞内脂滴的形成情况,从而确定前脂肪细胞分化为脂肪细胞,再利用实时PCR方法检测GPR120 mRNA的表达水平.采用siRNA技术下调3T3-L1前脂肪细胞中GPR120的表达,以无关干扰组为阴性对照,干扰24 h后诱导细胞分化,诱导后于3T3-L1脂肪细胞培养液中加入软脂酸孵育24 h,分别用实时PCR和Western印迹方法检测3T3-L1脂肪细胞中IRS-1的表达水平.结果 诱导分化的3T3-L1脂肪细胞中,GPR120 mRNA表达量较未诱导组明显升高(P＜0.05);干扰GPR120表达后3T3-L1脂肪细胞中脂滴体积和数量明显减小.另外,GPR120表达的量降低后,IRS-1 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).结论 GPR120参与胰岛素信号通路中IRS-1的表达调控.
关键词： 游离脂肪酸 胰岛素受体底物-1 G蛋白耦联受体120 胰岛素抵抗 -
PTP-1B 及 IRS-1在慢性间歇低氧大鼠肝细胞中的表达
目的：探讨慢性间歇低氧(CIH)对大鼠肝细胞蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(protein tyrosine phosphatase-1B,PTP-1B)及胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)蛋白表达量的影响及其导致胰岛素抵抗发生的可能机制。方法选取健康雄性 SD 大鼠24只,按随机数字表法分为正常对照组(NC 组)、慢性间歇低氧4周组(CIH4组)、慢性间歇低氧8周组(CIH8组),每组8只。NC 组无间歇低氧暴露正常饲养,CIH4组及 CIH8组于上午9时至下午5时放入间歇低氧仓暴露于间歇低氧环境中,舱内低氧浓度为6%~7%。分别于第4周及第8周检测大鼠空腹血糖及空腹胰岛素水平,用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)以及胰岛素敏感指数(insulin sensitive index,ISI)评价胰岛素抵抗, SABC 法免疫组织化学试剂盒检测 CIH 大鼠肝细胞 PTP-1B 及 IRS-1蛋白表达,以平均灰度值表示PTP-1B 及 IRS-1的蛋白表达量,并做统计学分析。结果与 NC 组比较,CIH4组及 CIH8组空腹血糖、空腹胰岛素及 HOMA-IR 升高,ISI 降低,差异有统计学意义(P <0.05),且 CIH8组更为显著；与 NC 组相比较,CIH4组及 CIH8组 PTP-1B 蛋白表达增加,IRS-1蛋白表达减少,差异有统计学意义(P <0.05),Pearson 相关分析显示,HOMA-IR 与 PTP-1B 平均灰度值呈负相关、与 IRS-1平均灰度值呈正相关；ISI 与 PTP-1B 平均灰度值呈正相关、与 IRS-1平均灰度值呈负相关。结论①CIH 暴露使大鼠空腹血糖及胰岛素水平升高且发生胰岛素抵抗,随着 CIH 暴露时间的延长,胰岛素抵抗程度加重。②CIH 导致大鼠肝细胞 PTP-1B 蛋白表达增加,IRS-1蛋白表达减少,PTP-1B 及 IRS-1可能共同参与了 CIH 大鼠胰岛素抵抗的发生发展。
关键词： 慢性间歇低氧 蛋白酪氨酸磷酸酶-1B 胰岛素受体底物-1 胰岛素抵抗 -
2型糖尿病大鼠胰腺IRS-1mRNA表达的变化及丝胶的调控作用
目的:分析2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素受体底物-1 (insulin rceptor substrate-1,IRS-1)mRNA表达的变化及丝胶的调控作用.方法:雄性SD大鼠随机分组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶用药组.高脂饲料+高糖饲料喂养联合链脲佐菌素注射建立2型糖尿病大鼠模型,成功建模后,丝胶用药组大鼠给予丝胶(2.4g/kg)灌胃.采用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的血糖,Real Time Q-PCR法检测各组大鼠胰腺RS-1 mRNA的表达.结果:与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠的血糖明显升高,胰腺IRS-1 mRNA的表达明显降低(P＜0.05);与模型组大鼠比较,丝胶用药组大鼠的血糖明显降低,胰腺IRS-1 mRNA的表达明显升高(P＜0.05).结论:丝胶可能通过上调胰腺IRS-1的表达起到降低血糖的作用.
-
酒精对大鼠胰岛素受体及底物-1基因表达影响
目的 研究慢性酒精摄入对雄性大鼠脂肪组织胰岛素受体(insulin receptor,IR)、胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)mRNA表达的影响,探讨酒精与胰岛素敏感性的关系及相关分子机制.方法 清洁级雄性Wistar大鼠40只,按体重随机分为对照组和低、中、高酒精剂量组,每天分别给予0,0.8,1.6和2.4g/(kg·bw)的酒精灌胃.第19周末,断头处死大鼠,测定空腹血糖和血胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).提取脂肪组织总RNA,通过半定量聚合酶链式反应方法测定IR、IRS-1 mRNA表达水平.结果 与对照组相比,中、高剂量组空腹血糖(葡萄糖)浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);低、中剂量组胰岛素浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);各剂量组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的升高差异均有统计学意义(P<0.05).低、中、高酒精剂量组IR、IRS-1mRNA表达水平分别为(0.588 ±0.039),(0.504±0.070);(2.678 ±0.031),(1.178±0.177);(0.761±0.137),(0.515±0.037).与对照组相比,各酒精剂量组IR、IRS-lmRNA表达水平均增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 慢性酒精摄入可以引起雄性大鼠胰岛素抵抗,酒精造成脂肪组织IR、IRS-1mRNA表达的改变可能是引起胰岛素抵抗的分子机制之一.
-
IRS-1和IRS-2基因多态性与冠心病易感性关系
目的 探讨胰岛素受体底物-1基因(IRS-1单核苷酸多态性(SNP)位点rs10205923,rs16822633以及胰岛素受体底物-2基因(IRS-2)rs9521509与广东汉族人群冠心病遗传易感性的关系.方法 收集2009-2012年在广东医科大学附属医院、中山大学第一附属医院、茂名市人民医院等多家医院心血管内科住院诊治的冠心病病例783例和同期进行健康体检的健康人749名,采用SNPscanTM多重SNP分型试剂盒进行基因型分型,应用x2检验和多因素logistic回归模型检验SNP位点与冠心病的关联性.结果 3个SNP位点等位基因和基因型分布在病例和对照组间的差异均无统计学意义(P＞0.05).多因素logistic回归模型检验未发现这3个SNP位点在3种遗传模式(加性、显性和隐性)下对冠心病有显著影响,校正混淆因素后P值=0.406 ～ 0.949.进一步对单体型分析未发现IRS-1基因的2个SNP位点(rs10205923和rs16822633)构成单体型对冠心病有明显影响.校正混淆因素后P值=0.439～0.941.结论 该研究提示IRS-1和IRS-2基因单核苷酸多态性与广东汉族人群冠心病无关联性.
-
降糖补肾方对糖尿病大鼠肌肉组织胰岛素受体及胰岛素受体底物-1表达的作用研究
目的:探讨降糖补肾方改善胰岛素抵抗,治疗糖尿病的作用机制.方法:制备糖尿病大鼠模型,葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖；免疫印迹检测InsR磷酸化、IRS -1酪氨酸磷酸化蛋白活性的变化.结果:空腹血糖≥11.1 mmol/L为糖尿病大鼠成模标准,成模大鼠随机纳入研究.降糖补肾方能降低糖尿病大鼠的空腹血糖,降糖补肾方高剂量组降糖效果与阿司匹林组相当(P＞0.05)；免疫印迹法检测结果显示:模型组糖尿病大鼠肌肉组织lnsR的磷酸化水平下降,与空白对照组比较有明显差异(P＜0.01),降糖补肾低剂量组与阿司匹林组相比P＞0.05,说明在改善糖尿病大鼠肌肉组织InsR磷酸化水平方面这两组效果相当.模型组糖尿病大鼠肌肉组织IRS -1的酪氨酸磷酸化下降,与空白对照组比较有明显差异(P＜0.01),阿司匹林组、降糖补肾高剂量组与空白对照组相比(P＞0.05),说明阿司匹林组、降糖补肾高剂量组能显著改善IRS -1酪氨酸磷酸化水平,两组效果相当(P＞0.05).结论:降糖补肾方一定程度上能增加糖尿病大鼠肌肉组织InsR磷酸化、IRS -1酪氨酸磷酸化蛋白表达,这可能是降糖补肾方抑制炎症信号通路的传导而发挥其改善胰岛素抵抗,治疗糖尿病的机制之一.
-
针刺对2型糖尿病大鼠肝组织IRS-1基因表达的调节
目的 探讨肝组织胰岛素受体底物1(IRS-1)基因表达与2型糖尿病(T2DM)发病的关系,以及针刺对T2DM大鼠肝组织IRS-1基因表达的影响.方法 食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(25 mg/kg)造模成T2DM大鼠,随机分为针刺组、格列本脲组和模型组,处理4 w后,用快速血糖仪检测空腹血糖(FPG)、用放免法检测空腹胰岛素(FINS)、用实时RT-PCR法检测肝组织IRS-1 mRNA表达,并与正常组大鼠进行对照.结果 模型组FPG、FINS明显高于正常组;针刺组FPG、FINS明显下降,接近正常组水平;格列本脲组FPG明显下降,接近正常组水平,FINS有所下降,和模型组有差异;模型组IRS-1 mRNA相对含量是正常组的1/4,针刺组为正常组的2.83倍,格列本脲组为正常组的1.23倍.结论 T2DM大鼠存在肝组织IRS-1 mRNA表达低下,针刺和格列本脲均可上调T2DM大鼠肝组织的IRS-1 mRNA表达,针刺对T2DM大鼠肝组织IRS-1 mRNA表达的上调作用优于格列本脲.
-
丹栀逍遥散对糖尿病抑郁大鼠胰岛素受体和胰岛素底物-1mRNA表达的影响
目的 探讨丹栀逍遥散对糖尿病抑郁大鼠肝组织胰岛素受体和胰岛素底物-1 mRNA影响的分子机制.方法 以高脂高糖乳剂加链尿佐菌素复制糖尿病大鼠模型,再予慢性孤养加慢性不可预见性中等刺激,建立糖尿病抑郁模型,给予丹栀逍遥散3 w后,观察其体重、行为学、空腹血糖、胰岛素、葡萄糖耐量试验、下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的激素的变化、采用RT-PCR检测肝组织胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)mRNA的表达.结果 丹栀逍遥散提高糖尿病抑郁大鼠活动度;降低血糖和胰岛素;降低CRH、ACTH、CorT;提高胰岛素靶组织肝的IR、IRS-1mRNA 的表达.结论 丹栀逍遥散治疗糖尿病抑郁其机制可能与纠正紊乱HPA 轴和提高肝组织IR、IRS-1的基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关.
-
复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠IRS-1基因表达的影响
目的:探讨复方黄连降糖片治疗2型糖尿病的可能作用机制.方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予复方黄连降糖片治疗8周.氧化酶法测定血糖,放射免疫双抗体法测定血清胰岛素,RT-PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1 mRNA的表达及western blot法测定肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1蛋白的表达.结果:复方黄连降糖片治疗组大鼠的血糖和血清胰岛素均有所下降,各组织IRS-1的基因表达均显著提高.结论:复方黄连降糖片可能通过提高外周组织IRS-1的基因表达,从而对2型糖尿病起到治疗的作用.
-
孕期尼古丁暴露所致子代胎鼠肝脏和骨骼肌IRS-1和IRS-2的表达变化
目的 探讨孕期大鼠尼古丁暴露所致宫内发育迟缓(IUGR)子代胎鼠肝脏和骨骼肌中胰岛素受体底物(IRS)-1和IRS-2的表达变化及其相关机制.方法 将24只Wistar受孕大鼠自妊娠12d起,随机分成4组,实验组分别皮下注射小剂量(0.5mg/kg)、中剂量(1.0mg/kg)和大剂量(2.0mg/kg)尼古丁,对照组给予等体积、不含尼古丁的生理盐水.所有孕鼠每次给药体积均为2ml/kg,每天注射两次,直到孕鼠妊娠20d后停止.待孕鼠妊娠20d时,采用异氟醚将其麻醉,剖腹取出胎鼠.称重,统计每组中IUGR胎鼠的数量,并计算IUGR胎鼠的发生率.收集胎鼠的血浆,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测胎鼠的脂联素、皮质酮水平;分离胎鼠肝脏和骨骼肌,采用半定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时定量PCR(qRT-PCR)检测胎鼠肝脏和骨骼肌IRS-1、IRS-2的mRNA表达水平,采用蛋白质印迹(Westernblot)技术检测胎鼠肝脏和骨骼肌中IRS-1、IRS-2的蛋白表达水平.结果 随尼古丁剂量的增加(0→0.5→1.0→2.0mg/kg),胎鼠的体重递降[(3.85±0.14)g→(3.61±0.19)g→(3.48±0.16)g→(3.15±0.21)g,P＜0.05],IUGR发生率递升(0→14.24％→26.35％→75.93％,P＜0.05),呈剂量依赖性.不同剂量尼古丁处理后脂联素水平较对照组均显著降低(P均＜0.05),中、高剂量组皮质酮水平较对照组显著升高(P均＜0.05).2.0mg/kg尼古丁处理后胎鼠肝脏中IRS-2mRNA、蛋白表达水平和骨骼肌中IRS-1mRNA、蛋白表达水平均显著低于对照组(P均＜0.05).结论 孕期大鼠尼古丁暴露可引起子代胎鼠肝脏中IRS-2mRNA、蛋白和骨骼肌中IRS-1mRNA、蛋白表达水平下降,进而使胎鼠糖脂代谢通路发生改变,直接影响胎鼠的生长发育,这可能是造成IUGR的产生与胎儿出生后胰岛素抵抗发生的原因之一.
-
自发性2型糖尿病大鼠主动脉形态学改变与胰岛素受体底物1mRNA的表达
目的 研究自发性2型糖尿病OLETF大鼠在疾病发展的不同阶段,其主动脉组织形态学改变以及胰岛素受体底物-1(IRS-1)mRNA的表达水平,探讨胰岛素抵抗状态下大血管病变的发生机制.方法 10只OLETF大鼠随机分别在16周龄与24周龄检杀,10只同种系非糖尿病LETO大鼠为正常对照组.应用光镜和透射电镜观察大鼠主动脉组织形态学改变,原位杂交技术检测主动脉IRS-1 mRNA表达.结果 OLETF大鼠在16周龄时主动脉已出现超微结构异常,至24周时其病变程度加重,表现为典型动脉粥样硬化性早期改变;OLETF大鼠在16周和24周时其主动脉IRS-1 mRNA的表达均明显低于同期LETO对照组,分别减少24.6%(P＜0.01)和25.6%(P＜0.001).结论 血管组织胰岛素受体后信号传递分子在基因转录水平即存在异常,导致内皮细胞胰岛素抵抗,可能是糖尿病早期大血管病变危险性增加的机制之一.
-
二甲双胍抑制 SREBP-1c 改善高脂诱导的骨骼肌胰岛素抵抗
目的：二甲双胍已成为治疗2型糖尿病的一线药物,前期研究结果提示固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regula-tory element binding protein-1c,SREBP-1c)抑制胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)基因转录表达,在高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中起关键作用。该研究探讨SREBP-1c 在二甲双胍改善高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中的作用及机制。方法经500μmol·L -1 PA 处理的 L6细胞被二甲双胍(1、10 mmol·L -1)干预24 h 后,采用2-NBDG方法检测其葡萄糖摄取水平,Western blot 检测 SREBP-1c、FAS、p-IRS-1( Tyr608/612)、IRS-1、p-AKT( Ser473)、AKT 的蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测二甲双胍对SREBP-1c 和 IRS-1基因转录的调控。 CHIP 定量分析二甲双胍处理后 SREPB-1c 蛋白与 IRS-1启动子区域的相互作用。结果 L6肌管细胞经 PA 处理后,糖摄取下降,SREBP-1c 及其下游分子 FAS 表达升高,胰岛素信号通路相关分子 p-IRS-1(Tyr608/612)、IRS-1、p-AKT(Ser473)/ AKT 表达下降；不同浓度二甲双胍干预后,L6肌管细胞糖摄取呈剂量依赖性增加,SREBP-1c、FAS 表达下降,而 p-IRS-1(Tyr608/612)、IRS-1、p-AKT(Ser473)/ AKT 表达升高。双荧光素酶报告基因实验结果显示二甲双胍抑制 SREBP-1c 启动子活性,增加 IRS-1启动子活性。 CHIP 结果显示二甲双胍使 SREBP-1c 蛋白结合到 IRS-1启动子区域的量下降约30%。结论二甲双胍通过抑制 SREBP-1c 改善高脂诱导的骨骼肌胰岛素抵抗。
-
燥湿化痰药治疗多囊卵巢综合征痰湿证的机制研究
目的:研究燥湿化痰中药对多囊卵巢综合征(PCOS)痰湿证患者卵巢局部胰岛素抵抗(IR)的影响.方法:收集行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的PCOS痰湿证患者(痰湿组)和输卵管性不孕症患者(对照组)促排卵后的黄素化颗粒细胞.采用免疫印迹法检测卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达及其酪氨酸磷酸化程度.结果:治疗前痰湿组IRS-1蛋白表达均显著高于对照组(P＜0.01),而IRS-1络氨酸磷酸化程度明显低于对照组.治疗后痰湿组IRS-1蛋白表达下降,IRS-1酪氨酸磷酸化程度增高.结论:燥湿化痰中药可以改善PCOS痰湿证患者的胰岛素抵抗状态,从而发挥治疗作用.
-
PCOS患者脂肪组织IRS-1、IRS-2蛋白表达及其酪氨酸磷酸化的研究
目的:研究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者脂肪组织胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)及胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2,IRS-2)蛋白的表达及其酪氨酸磷酸化,探讨PCOS产生胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的分子机制.方法:用放射免疫法检测各实验组血清促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、睾酮(testosterone,T)、血清空腹胰岛素(fasting insulin,FIN)的水平;用葡萄糖氧化酶法测定血浆空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG);用HOMA(homeostasis model assessment,HOMA)模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);用Western blot检测IRS-1及IRS-2蛋白的表达,应用免疫沉淀及增强化学发光法检测二者的酪氨酸磷酸化程度.结果:(1)PCOS IR组患者血清LH、LH/FSH、T、FIN及HOMA-IR均显著高于PCOS非IR组与对照组(均P﹤0.05);(2)PCOS IR组与PCOS 非IR组及对照组相比,IRS-1蛋白表达量明显下降(P﹤0.05),IRS-2蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);(3)PCOS IR组IRS-1及IRS-2蛋白质酪氨酸磷酸化程度显著降低(均P﹤0.05).结论:PCOS患者脂肪组织IRS-1蛋白表达下降,IRS-1及IRS-2蛋白质酪氨酸磷酸化程度降低,由此导致的受体后信号转导障碍可能是产生胰岛素抵抗的机制之一.
-
IRS-1 IRS-2蛋白质在PCOS患者脂肪组织中的表达
目的 研究多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者脂肪组织胰岛素受体底物-1(Insulin receptor substeate-1,IRS-1)及胰岛素受体底物-2(Insulin receptor substeate-2,IRS-2)蛋白的表达,探讨PCOS产生胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)的分子机制.方法 采用放射免疫法检测PCOSIR组(20例)、PCOS非IR组(15例)及对照组(20例)血清空腹胰岛素(Fasting insutin,FIN)的浓度;采用葡萄糖氧化酶法测定血浆空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG);采用HOMA(Homeostasis model assessment,HOMA)模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用Western blot方法检测IRS-1及IRS-2蛋白的表达.结果 (1)PCOS IR组患者血清FIN及HOMA-IR均显著高于PCOS非IR组与对照组(均P＜0.05);PCOS非IR组患者血清FIN及HOMA-IR亦显著高于对照组(均P＜05);(2)PCOS IR组与PCOS非IR组及对照组相比,IRS-1蛋白表达量明显下降(P＜0.05),而IRS-2蛋白表达无显著性差别.结论 PCOS患者脂肪组织IRS-1蛋白表达的下降所导致的受体后信号转导障碍可能是其产生胰岛素抵抗的机制之一.
-
妊娠期糖尿病患者胎盘组织胰岛素受体底物1、蛋白酪氨酸磷酸酶1B 表达及意义
目的：探讨妊娠期糖尿病（GDM）患者胎盘组织胰岛素受体底物1（IRS－1）、蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP 1B）表达及意义。方法选择GDM孕妇49例（GDM组），正常足月妊娠孕妇50例（正常组）。两组均于孕24～28周检测空腹胰岛素（ FINS）、空腹血糖（ FPG），采用胰岛素稳态模型评估法（ HOMA）计算胰岛素抵抗指数（ HOMA－IR）、胰岛β细胞功能（HOMA－β％）、胰岛素敏感指数（HOMA－ISI）；两组分娩后取胎盘组织，采用免疫组化ABC法检测胎盘组织IRS－1、PTP 1B。结果 GDM组FPG、FINS、HOMA－IR均高于正常组（P均＜0．01），HOMA－ISI、HO－MA－β％均低于正常组（P均＜0．01）。正常组胎盘组织IRS－1阳性表达率为100％，GDM组为63．26％，两组比较P＜0．01。正常组胎盘组织PTP 1B阳性表达率为56．00％，GDM组为91．83％，两组比较P＜0．01。 GDM患者胎盘组织PTP 1B与IRS－1表达呈负相关（r＝－4．85，P＜0．01）；IRS－1与HOMA－IR呈负相关（r＝－0．552，P＜0．01），与HOMA－β％和HOMA－ISI无相关性（P＞均0．05）；PTP 1B与HOMA－IR呈正相关（r＝0．563，P＜0．01），与HOMA－β％和HOMA－ISI无相关性（P＞均0．05）。结论 GDM患者胎盘组织IRS－1表达降低，PTP 1B表达升高，且均与HOMA－IR相关；胰岛素信号传导系统中信号蛋白表达异常可能与GDM发病有关。
关键词： 妊娠期糖尿病 胰岛素抵抗 胰岛素受体底物-1 蛋白酪氨酸磷酸酶1B -
微小RNA-126在食管鳞癌中的表达及作用机制
目的 观察微小RNA-126(miR-126)在食管鳞癌组织中的表达及其可能调控的靶基因.方法 采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法,检测75例患者食管鳞癌组织和其匹配的癌旁组织中miR-126的表达水平,应用软件预测miR-126的靶基因,免疫组织化学法分析靶蛋白在癌组织中的表达,在食管鳞癌细胞中提高或降低miR-126表达水平,验证其对靶基因的调控作用.结果 对75组配对标本分析,癌组织中miR-126的相对表达量为0.28±0.32,癌旁组织为0.45±0.47,差异有统计学意义(P＜0.01);miR-126低表达与食管鳞癌分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度和临床分期相关(P＜0.05);胰岛素受体底物-1(IRS-1)在食管鳞癌组织中过表达,与肿瘤分化程度有关(P＜0.01);上调食管鳞癌细胞Eca9706、Eca109、TE-1中miR-126的表达会导致IRS-1蛋白的表达量(0.785±0.337、1.873±0.684、1.938±1.081)较空白组(1.188±0.336、2.756±1.097、3.028±0.789)下降(P＜0.01),下调食管鳞癌细胞中miR-126的表达会导致IRS-1蛋白的表达量(2.543±0.610、5.182±1.897、5.940±0.997)相对升高(P＜0.01).结论 食管鳞癌组织中miR-126表达水平下降,IRS-1蛋白的表达受miR-126的负调控,IRS-1可能是miR-126在食管鳞癌中发挥抑癌基因功能的靶基因之一.
-
表没食子儿茶素没食子酸酯对APP/PS1转基因小鼠海马IRS-1磷酸化的影响
目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对APP/PS1转基因小鼠海马胰岛素受体底物-1(IRS-1)磷酸化的作用.方法:12月龄雌性APP/PS1小鼠随机分为模型组(Tg)、EGCG低剂量组(Tg/EGCG-L)、高剂量组(Tg/EGCG-H),同月龄雌性C57BL/6J小鼠作为对照组(NT).采用Western blot和免疫组织化学方法检测各组小鼠海马IRS-1 pSer636的表达.结果:与对照组比较,模型组小鼠海马IRS-1 pSer636表达明显升高(P＜0.05),EG-CG各治疗组IRS-1 pSer636表达较模型组降低(P＜0.05).结论:EG.CG可以减轻APP/PS1小鼠海马胰岛素抵抗,其机制可能部分与减轻IRS-1在丝氨酸636位点的磷酸化水平有关.
-
IRS-1的表达和泛素化在KKAy及C57BL/6J小鼠糖尿病发展过程中的意义
目的:探讨胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达和泛素化水平在糖尿病发展过程中的作用.方法:20只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(正常饲料喂养,n＝10)和胰岛素抵抗组(高脂饲料喂养,n＝10).8周龄KKAy小鼠8只,高脂饲料喂养,为2型糖尿病组.检测各组小鼠体重、血糖和血胰岛素水平.12周后免疫印迹检测各组动物肝组织IRS-1的表达量,同时采用剥离免疫印迹法检测肝组织IRS-1的泛素化水平.结果:高脂喂养12周后C57BL/6J小鼠出现胰岛素抵抗,KKAy小鼠出现肥胖和糖尿病.2型糖尿病组IRS-1的表达显著低于正常对照组和胰岛素抵抗组(P＜0.05),而IRS-1的泛素化水平则显著高于胰岛素抵抗组(P＜0.05),与对照组无显著性差异(P＞0.05).结论:2型糖尿病时IRS-1的表达下调,IRS-1泛素化水平增加是导致胰岛素信号转导障碍的重要原因.
