经典Wnt信号通路对少突胶质前体细胞生长发育的调控

• Sox5促进胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化

  作者：余伟；马达；刘礼军；张志标 期刊：微循环学杂志2018年04期

  目的:探讨Sox5对胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化的影响.方法:人正常胰腺细胞HPDE6-C7(HPDE6-C7组)、胰腺癌细胞PANC-1 (PANC-1组)和AsPC-1(AsPC-1组)正常培养至对数生长期,采用qRT-PCR法和Western blot法分别检测各组细胞中Sox5 mRNA和蛋白水平.将shSox5、shControl、pcDNA 3.1-Sox5和载体pcDNA 3.1以脂质体法转染胰腺癌细胞PANC-1,分别标记为shSox5组、shControl组、pcDNA 3.1-Sox5组和Scrambled组,采用qRT-PCR法检测各组细胞中Sox5、E-cadherin、N-eadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA 表达;Western blot检测各组细胞中Sox5、E-cadherin、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的蛋白表达;Transwell 法检测各组细胞的迁移和侵袭.结果:与HPDE6-C7组相比,PANC-1组和AsPC-1组中Sox5 mRNA和蛋白水平均升高(P＜0.01);与shControl组比较,shSox5组Sox5、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA和蛋白以及细胞迁移和侵袭水平均显著降低(P＜0.01),E-cadherin mRNA和蛋白水平均显著升高(P＜0.01);与Scrambled组比较,pcDNA-3.1-Sox5组Sox5、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA和蛋白以及细胞迁移和侵袭水平均显著升高(P＜0.01),E-cadherin mRNA和蛋白水平均显著降低(P＜0.01).结论:Sox5可促进胰腺癌细胞迁移、侵袭和EMT,将为胰腺癌的靶点治疗提供新靶标.

  关键词： Sox5 胰腺癌细胞 迁移 侵袭 上皮间质化

• 三黄生肤油联合硫化氢对糖尿病足模型大鼠的治疗作用

  作者：孙晓顺；陈露；敖先伟；张艳芳；朱贤静 期刊：微循环学杂志2018年04期

  目的:观察三黄生肤油联合硫化氢对糖尿病足(DF)模型鼠的治疗作用.方法:利用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,随后利用切除足部皮肤制造DF模型.48只造模成功的DF模型大鼠使用数字表法分为基质对照组、硫化氢组、三黄生肤油组和三黄生肤油十硫化氢组,每组12只.各组大鼠采用相应药剂涂抹创面、2次/天,连续3周.比较四组治疗期间足底皮温、足底痛阈、创面愈合率和创面肉芽组织血管数.结果:治疗后,三黄生肤油十硫化氢组创面愈合率高于基质对照组(1、2、3周,P＜0.05或P＜0.01)、硫化氢组和三黄生肤油组(P＜0.05).硫化氢组和三黄生肤油组创面愈合率高于基质对照组(2,3周,P＜0.05),但硫化氢组与三黄生肤油组创面愈合率无显著性差异(P＞0.05).治疗前四组足底皮温和足底痛阈无显著性差异(P＞0.05).三黄生肤油十硫化氢组治疗2、3周足底皮温高于基质对照组,足底痛阈低于基质对照组(P＜0.05).三黄生肤油十硫化氢组治疗3周足底皮温高于硫化氢组和三黄生肤油组,足底痛阈低于硫化氢组和三黄生肤油组(P＜0.05).硫化氢组和三黄生肤油组治疗3周足底皮温高于基质对照组,足底痛阈低于基质对照组(P＜0.05),但硫化氢组和三黄生肤油组间无显著性差异(P＞0.05).创面肉芽组织中血管数,三黄生肤油十硫化氢组、硫化氢组和三黄生肤油组均高于基质对照组(P＜0.05),三黄生肤油十硫化氢组又高于硫化氢组和三黄生肤油组(P＜0.05).结论:三黄生肤油联合硫化氢可改善DF模型鼠足底皮温和痛阈,增加创面血管生成,有利于创面的愈合,疗效优于单用三黄生肤油或硫化氢.

  关键词： 三黄生肤油 硫化氢 糖尿病足模型鼠

• 糖尿病大鼠肾小管间质缺氧诱导因子2α表达变化及氯化钴对其影响

  作者：程晖；梁伟；杨英杰；李紫燃；柳欣 期刊：微循环学杂志2018年04期

  目的:观察缺氧诱导因子2α(HIF-2α)在2型糖尿病(T2DM)大鼠肾小管间质的表达及其降解抑制剂氯化钴(CoCl2)的干预作用.方法:24只健康Wistar大鼠,留取8只作为对照(CON组),余16只采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建T2DM模型,成模后平分为T2DM组(DM组)和CoCl2干预组(DM+ CoCl2组).24周后取大鼠肾脏,常规方法制作石蜡切片.采用免疫组化法检测大鼠肾组织HIF-2α表达水平;PAS染色法检测大鼠肾组织结构病理变化及半定量分析肾小球硬化指数(GSI)和小管间质纤维化指数(IF);TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡率;免疫印迹法检测肾组织促红细胞生成素(EPO)表达水平.结果:DM组和DM+CoCl2组大鼠肾组织HIF-2α表达高于CON组(P＜0.01),DM+CoCl2组HIF-2α表达水平较DM组更高(P＜0.01);DM大鼠肾小球系膜基质及细胞轻度增生,肾小管间质区域增宽、细胞外基质聚集,其GSI和IF均显著高于CON组(P＜0.01),与DM组比较,DM+CoCl2组上述病理改变减轻,GSI和IF降低(P＜0.01).DM组肾小管上皮细胞凋亡率高于CON组(P＜0.01),而DM+CoCl2组细胞凋亡率较DM组降低(P＜0.01).DM组肾组织EPO表达水平低于CON组(P＜0.05),而DM+CoCl2组EPO水平高于DM组(P＜0.05).结论:上调肾组织HIF2α表达可减轻T2DM大鼠肾间质损害.

  关键词： 糖尿病 肾小管间质 缺氧诱导因子 氯化钴 大鼠

• 甲型流感病毒对白细胞介素-35表达的影响

  作者：谢文；段勇威；鲍腾飞；徐献群 期刊：微循环学杂志2018年04期

  目的:探讨甲型流感病毒(IAV)对白细胞介素-35(IL-35)表达的影响.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测78例IAV感染患者(患者组)和80例健康体检者(健康对照组)血清IL-35的水平,以流感病毒H3N2感染人外周血单个核细胞(PBMC)设为流感细胞组,未感染H3N2的PBMC为对照组,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测各组细胞中p35和EBI3 mRNA和蛋白水平,ELISA检测细胞上清中IL-35的含量.结果:患者组IL-35血清水平较健康对照组高(78.40±28.90pg/ml vs 30.60±17.80pg/ml),流感细胞感染组EBI3和p35 mRNA和蛋白表达较对照细胞组高(mRNA:EBI3为2.32±0.28 vs 0.75±0.13,p35为1.83±0.23vs 0.94±0.17;蛋白:EBI3为1.25±0.11 vs 0.56±0.06,p35为1.34±0.13 vs0.69±0.10),流感细胞感染组细胞培养液中IL-35亦高于对照细胞组(67.35±9.20pg/ml vs 25.62±6.40pg/ml),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:甲型流感病毒感染可引起体内IL-35表达升高.

  关键词： 白细胞介素-35 流感病毒 外周血单核细胞

• 肥胖合并急性坏死性胰腺炎大鼠肺组织损伤及肺表面活性蛋白A和炎性指标变化

  作者：鄂恒；梅方超；余佳；李满；项明伟；刘志勇；王卫星 期刊：微循环学杂志2018年04期

  目的:观察分析肥胖合并急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺组织病理改变和肺表面活性蛋白A(SP-A)及炎症指标的变化.方法:SPF级SD大鼠24只,采用随机数字表法分为4组(均n=6):普通饲料正常组(N组),普通饲料ANP组(N-ANP组),高脂饲料正常组(H组),高脂饲料ANP组(H-ANP组).胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠溶液制备ANP模型.成模后12h处死大鼠,摘取肺组织,HE染色观察各组大鼠肺组织学变化并行病理学评分;免疫组化法检测肺组织核因子κB (NF-κB)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)蛋白表达,免疫荧光法检测肺组织SP-A、髓过氧化物酶(MPO)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平.统计学分析各组上述变化的差异.结果:四组上述各指标水平差异均有统计学意义(P＜0.01).N-ANP和H-ANP组肺组织SP A表达较N组和H组降低(P＜0.01),病理评分、MPO、NF-κB、IL-1β及Caspase-3水平较N组和H组增加(P＜0.01);H-ANP组肺组织SP-A表达水平较N-ANP组更低(P＜0.01),病理评分、MPO、NF-κB、IL-1β及Caspase-3水平较N ANP组更高(P＜0.01).结论:肥胖可能加重ANP肺组织损伤;肺组织SP-A表达水平降低及炎症反应加重可能对其有重要影响.

  关键词： 肥胖合并急性坏死性胰腺炎 肺组织损伤 肺表面活性蛋白A 炎症 大鼠

• 上调蛋白磷酸酯酶2A水平可显著抑制宫颈癌细胞迁移

  作者：申复进；郑红云；廖淑梅；许学先 期刊：微循环学杂志2018年03期

  目的:探讨蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)在宫颈癌迁移中的作用.方法:培养Hela宫颈癌细胞,通过药物或质粒转染干预PP2A水平.药物实验中将Hela细胞分为3组,即正常对照组(DMSO处理,n=6),DES组(10nM PP2A激动剂DES处理,n=6)和OA组(10nM PP2A抑制剂OA处理,n=6);质粒转染实验中将Hela细胞分为DsRed-vector组(n=6),DsRed-PP2Ac组(n=6)和DsRed-siPP2Ac组(n=6),按分组要求转染相应质粒.采用划痕实验观察各组不同时间点(药物0h、24h、48h;转染0h、48h) Hela细胞迁移情况并比较组间差异.结果:药物或基因上调PP2A可显著抑制宫颈癌细胞的迁移,而药物或基因下调PP2A水平则明显促进宫颈癌细胞的迁移.结论:PP2A在宫颈癌的发展中起重要的作用,该研究可为宫颈癌的发展提供新的分子机制,亦可为宫颈癌临床药物的开发提供新的靶点.

  关键词： 宫颈癌 蛋白磷酸酯酶2A 细胞迁移

• 连接蛋白43在远端缺血预处理防治兔脊髓缺血再灌注损伤中对血脊髓屏障的作用及机制

  作者：张燕；张双霜；胡霁；袁芬；刘娇；戴军 期刊：微循环学杂志2018年03期

  目的:探讨连接蛋白43(Cx43)在远端缺血预处理(RIPC)防治兔脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)中对血-脊髓屏障(BSCB)的作用及机制.方法:36只健康日本大耳白兔,按照完全随机数字法分为3组(每组12只):假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)、远端缺血预处理组(I/R+R组).分别于恢复灌注后48h行后肢神经运动功能评分,HE染色观察脊髓组织病理变化及正常运动神经元数量,TUNEL凋亡染色观察脊髓组织神经细胞凋亡情况,伊文思蓝(EB)检测血脊髓屏障的通透性,荧光定量PCR(RT-PCR)检测脊髓组织Cx43 mRNA水平,Western blot检测脊髓组织Cx43、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及基质金属蛋白酶-2/9(MMP-2/9)蛋白表达变化.结果:与Sham组比较,I/R组后肢神经运动功能评分显著降低(P＜0.05),脊髓结构损伤严重,凋亡神经细胞数明显增加(P＜0.01),血脊髓屏障渗透性明显增加,Cx43 mRNA及Cx43、TNF-α、IL-1β和MMP-2/9蛋白表达均显著增加(P＜0.05);与I/R组比较,I/R+R组后肢神经运动功能评分增高(P＜0.05),脊髓损伤较轻,正常运动神经元数量增加(P＜0.05),凋亡神经性细胞数明显减少(P＜0.05),血脊髓屏障渗透性明显降低,Cx43 mRNA及Cx43、TNF-α、IL-1β和MMP-2/9蛋白表达均显著减少(P＜0.05).结论:RIPC可以保护SCIRI时BSCB的完整性,减轻脊髓损伤,改善后肢神经运动功能,其保护机制可能与RIPC抑制Cx43的表达,从而下调TNF-α、IL-1β及MMP-2/9蛋白表达水平有关.

  关键词： 缺血再灌注损伤 远端缺血预处理 血-脊髓屏障 连接蛋白43 兔

• 抑制蛋白激酶D1表达水平对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响及作用机制

  作者：杨佳伟；胡沛；谢进；唐冰 期刊：微循环学杂志2018年03期

  目的:探讨下调蛋白激酶D1(PKD1)对高糖环境下心肌细胞凋亡的影响及机制.方法:实验分5组:Control组(正常培养的H9c2细胞)、HG组(H9c2细胞高糖条件培养24h)、si-NC组(H9c2细胞转染siRNA control后高糖条件培养24h)、si-PKD1组(H9c2细胞转染PKD1 siRNA后高糖条件培养24h)和si-PKD1+ SB203580组[-H9c2细胞转染PKD1 siRNA 12h后加入p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路抑制剂SB203580,再高糖条件培养24h],用qRT-PCR和Western blot方法检测各组细胞PKD1 mRNA和蛋白表达水平(si-PKD1+SB203580组除外);流式细胞术测定细胞凋亡情况,Western blot测定细胞促凋亡蛋白Bc1-2相关X蛋白(Bax)的表达水平,同时检测细胞中p38MAPK及其磷酸化p-p38MAPK水平.结果:HG组细胞PKD1 mRNA和蛋白水平均明显高于Control组(P＜0.01).与HG组比较,si-PKD1组细胞中PKD1 mRNA和蛋白表达明显降低(P＜0.01),细胞凋亡率降低,Bax蛋白表达水平下降,细胞中p-p38MAPK水平降低(P＜0.01).与si-PKD1组比较,si-PKD1+ SB203580组心肌细胞凋亡率进一步降低,细胞中Bax蛋白水平下降,p-p38MAPK、p-p38MAPK/p38MAPK水平降低(P＜0.01).结论:高糖诱导心肌细胞PKD1表达,下调PKD1可能通过抑制p38MAPK信号通路激活减少高糖诱导的心肌细胞凋亡.

  关键词： 心肌细胞 PKD1 高糖 凋亡

• 当归四逆汤对糖尿病血瘀症大鼠周围神经病变及水通道蛋白1、RhoA/ROCK信号通路的影响

  作者：向庆伟 期刊：微循环学杂志2018年03期

  目的:研究当归四逆汤对糖尿病血瘀症大鼠周围神经病变及水通道蛋白1 (AQP1)、RhoA/ROCK信号通路的影响.方法:65只健康雄性SD大鼠,12只作为正常对照组(A组),其余53只制备2型糖尿病大鼠血瘀症模型.48只成模大鼠再分为:糖尿病血瘀症组(B组)、甲钴胺治疗组(C组)、当归四逆汤低剂量治疗组(D组)和当归四逆汤高剂量治疗组(E组),每组12只.检测各组大鼠坐骨神经传导速度、坐骨神经含水量;背根神经节AQP1和RhoA/ROCK信号通路相关因子mRNA/蛋白表达水平变化.结果:造模大鼠体重明显下降,血糖、血脂、血流变指标水平明显异常(P＜0.01);B组大鼠坐骨神经含水量显著高于A组(P＜0.01),C组与A组接近(P＞0.05),E组与C组相当(P＞0.05),好于D组(P＜0.05);各组坐骨神经传导速度差异无统计学意义(P＞0.05);各组大鼠背根神经节信号通路因子mRNA表达比较,B组AQP1高于A组,RhoA、ROCKⅡ低于A组(P＜0.05),C组AQP1、RhoA、ROCKⅡ表达水平接近A组(P＞0.05),E组接近C组(P＞0.05),D组AQP1表达高于E组,RhoA、ROCKⅡ表达量低于E组(P＜0.05),各组ROCKⅠ mRNA表达未见统计学差异(P＞0.05);各组大鼠信号通路因子蛋白表达,B组AQP1、RhoA、ROCKⅡ较A组显著下调(P＜0.01),C组AQP1、RhoA、ROCKⅡ表达接近A组(P＞0.05),E组接近C组(P＞0.05),D组表达低于E组(P＜0.05),各组ROCKⅠ蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:当归四逆汤治疗糖尿病周围神经病变有效,且高剂量组效果更好,作用机理可能与其调节AQP1及RhoA/ROCK信号通路表达水平有关.

  关键词： 当归四逆汤 周围神经病变 2型糖尿病 水通道蛋白1 RhoA/ROCK 大鼠

• 阿必鲁肽调节2型糖尿病大鼠糖脂代谢及下丘脑SOCS-3、NF-KB mRNA表达水平

  作者：孙晶波 期刊：微循环学杂志2018年02期

  目的:观察阿必鲁肽对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢和下丘脑组织细胞因子信号转导抑制蛋白-3(SOCS-3)、核因子Kappa B(NF-κB) mRNA表达的影响.方法:40只SD雄性大鼠适应性饲养1周后,随机选择30只并一次性腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg),并给予高糖高脂饲料饲养1周造模.成模大鼠随机平分为T2DM组、阳性对照药物利拉鲁肽组(利拉鲁肽组)及观察药物阿必鲁肽组(阿必鲁肽组).未经处理的10只大鼠为正常对照组.观察各组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及下丘脑SOCS-3、NF-κB mRNA表达水平变化.结果:与正常对照组比较,T2DM组、利拉鲁肽组及阿必鲁肽组FBG、TC、TG、LDL-C明显升高,HDL-C明显降低(P＜0.05或P＜0.01).利拉鲁肽组及阿必鲁肽组FBG、TG和LDL-C水平均较T2DM组降低,阿必鲁肽组降低更明显(P＜0.05),但HDL-C水平变化不明显(P＞0.05).T2DM组大鼠下丘脑SOCS-3、NF-κB mRNA表达水平均较正常对照组明显升高(P＜0.05),利拉鲁肽组及阿必鲁肽组SOCS-3、NF-κB mRNA表达水平均较T2DM组显著下降(P＜0.01),且阿必鲁肽组下降更明显(P＜0.01).结论:阿必鲁肽可降低T2DM大鼠血糖、血脂水平,其作用机制可能与其调节下丘脑SOCS-3、NF-κB mRNA表达有关.

  关键词： 阿必鲁肽 2型糖尿病 细胞因子信号转导抑制蛋白-3 核因子kappa B 大鼠