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汉滩病毒M,S基因部分片段在大肠杆菌中的融合表达

罗雯;徐志凯;阎岩;吴兴安;张芳琳;刘勇;赵茜;白文涛;王海涛

摘要: 目的 在大肠杆菌中融合表达含主要抗原位点的汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与NP片段. 方法 将汉滩病毒76-118株M基因编码G1的片段与S基因编码区5′端约0.7 kb的片段连接,克隆入pGEX-4T2,构建嵌合基因原核表达载体pGEX-4T2-G1S0.7,并在大肠杆菌XL1-Blue中,诱导GST-G1S0.7融合蛋白的表达. 表达产物用ELISA和Western blot进行鉴定. 结果 成功地构建了嵌合原核表达载体pGEX-4T2-G1S0.7. 经IPTG诱导后,ELISA活性测定结果表明,该融合蛋白可与抗汉滩病毒NP及糖蛋白的mAb特异性结合. Western blot结果显示,诱导出相对分子质量 (Mr)大于1×105的G1S0.7与GST的融合蛋白. 结论 获得具有特异性结 合活性的融合蛋白GST-G1S0.7,为汉滩病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础.(潘伯荣)

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