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部分抗-HCV阴性和阳性血清丙肝抗体分片段检测分析
目前,ELISA抗-HCV作为血液(HCV)传染指标的主要检测手段,其检测结果的可靠性至关重要.我们对部分ELISA抗-HCV阴性和阳性的血清进行丙肝抗体分片段检测,以探讨ELISA抗-HCV不同区域抗体的反应性和血液HCV感染的真实情况,现将结果报告如下.
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全基因组分析乙型肝炎病毒缺失变异及其与干扰素疗效的关系
干扰素是治疗慢性乙型肝炎(CHB)的主要药物之一,但其有效率仅为20%~40%[1-3].研究显示,HBV一些特定位点的变异具有抵抗干扰素的作用,这些位点的变异虽然可以抵抗干扰素的作用,但不足以说明干扰素抵抗的机制.目前大多数研究是以HBV的部分片段或特定位点作为研究对象,并不能反映患者体内病毒的真实状态,具有一定的局限性.为进一步了解HBV的生物学特性对干扰素疗效的影响,本研究采用全基因克隆的方法[4]从CHB患者血清中扩增HBV全基因组DNA,分离检测HBV基因组缺失突变体,分析HBV变异与干扰素疗效之间的关系.
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HCV抗体检测临界值附近样本传播HCV风险的研究
目的 用尽可能低的消耗,达到HCV感染早期诊断,尽量缩短ELISA HCV抗体检测的"窗口期",防止和减少经输血传播丙型肝炎的风险.方法 采集初次检测抗-HCV(S/CO)样本测定值/临界值0.40~0.99的样本310份,采用"HCV抗体分片段酶联免疫确认试剂盒"进行补充旁证检测,对检测阳性及可疑阳性样本再进行HCV-PCR和RIBA及HCV-cAg检测.结果 310份样本共检出单片段阳性样本25份,2个片段以上阳性样本3份,共计28份.HCV-PCR阳性3份,HCV-cAg阳性4份,RIBA检测3个条带阳性2份,1个条带阳性22份.28份样本中,抗-HCV分片段、PCR、HCV-cAg以及RIBA共同阳性1份,HCV-cAg与PCR共同阳性2份,HCV-cAg和RIBA共同1份.结论 加强对抗-HCV检测阴性高值样本的重视,尽量缩短ELISA-HCV抗体检测"窗口期".
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两种抗HCV试剂检测献血者结果不符追踪观察
目的探讨两种抗HCV试剂检测结果不符标本在抗HCV分片段试剂不同区抗原的反应性,随访和跟踪该类人员在抗HCV和抗HCV分片段试剂中的反应变化.方法利用抗HCV分片段试剂对国家抗HCV参考品及抗HCV试剂检测不符的标本进行测试,并对可跟踪的献血者在6个月后再进行抗HCV及抗HCV分片段试剂检测.结果国家抗HCV参考品中,29份阳性标本均出现二片段或二片段以上阳性,阴性标本全部阴性;103份抗HCV试剂结果不符标本中有6例为二片段阳性,26例为单片段阳性,以NS3、C区为主;6个月后对可以跟踪的86例献血员进行检测,37例两种抗HCV试剂转阴,16例两种试剂均转为阳性,6例抗HCV分片段阴性者己转为一个或二个片段阳性.结论对抗HCV试剂阳性结果不符标本同时应用HCV分片段试剂检测有利于降低HCV阳性血清漏检率,跟踪和复检有助于了解阳性结果不符标本在抗HCV及抗HCV分片段试剂中的反应变化,排除假阳性.
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无偿献血抗-HCV阳性标本及灰带区样本的处理(摘要)
1材料与方法我站抗-HCV检测初、复检一方出现阳性结果或OD/cut off值超过0.8者视为可疑,如连续待检2次仍为阳性,均应予以报废.如何确认初、复检不一致的阳性标本及如何处理灰带区的血样标本,是保证安全输血的重要组成部分,因此,笔者于2003年1月至5月,在本站无偿献血的标本中随机抽查了部分初、复检不一致的阳性标本,用分片段酶联免疫测定对ELISA进行对比进一步确定,同时对3706份血样标本进行了连续42次的测试质控OD值,对低值质控样本做了再分析.
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亨廷顿病转基因动物模型研究进展
HD亨廷顿蛋白(htt)的发现使得建立与人类亨廷顿病(HD)有相似遗传基础的动物模型成为可能[1]。随机插入人类htt基因(包含聚谷氨酰胺重复序列)部分片段而构建的转基因动物模型[1],能模拟人类HD发病时的病因和病理特征且能被用来研究HD的治疗策略,现综述目前HD转基因动物模型的研究进展。
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可溶性转铁蛋白受体的研究进展
可溶性转铁蛋白受体(serum transferrin receptor,sTfR)是一个新的铁代谢参数.sTfR是细胞膜转铁蛋白受体(transferrinreceptor,TfR)经蛋白酶水解作用生成的分泌到循环血液中的部分片段,分子量为85 KD.sTfR含量与细胞的TfR量呈平行关系.
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抗-HCV分片段试剂在辅助诊断HCV感染中的应用
目的探讨抗-HCV分片段试剂在辅助诊断HCV感染中的效果.方法收集常规初复检抗-HCV不符的临界样本31份,用抗-HCV分片段酶联免疫检测试剂进一步检测抗-HCV-C、NS3、NS4、NS5、膜高变区1(HVR1)抗体.结果 31份初复检不符临界样本分片段检测结果为4份阳性(12.90%),10份不确定,即仅1个抗原片段阳性(32.26%),17份阴性(54.84%).结论对抗-HCV初、复检结果不符的临界样本,用抗-HCV分片段酶联免疫检测试剂进一步作辅助检测,可降低假阳性,提高检测的特异性,具有一定的临床意义.
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两株登革2型病毒E、NS1蛋白基因序列测定及其系统发生分析
目的: 对从登革出血热(dengue hemorrhagic fever, DHF)病人血清分离到的一株登革2型病毒(dengue virus type 2, DEN-2 B株)和DEN-2 NGC株作E、NS1蛋白部分基因序列测定并进行系统发生树分析,了解其变异及分子进化特证.方法: 利用RT-PCR法扩增B株和NGC株E、NS1部分基因片段,PCR产物直接测序;利用DNAssist软件预测其氨基酸序列,以及PHYLIP软件的CLUSTAL方法绘制系统发生树.结果: B株与NGC株E蛋白基因区第1~476 nt(476 bp)碱基序列存在8个位点的差异;编码氨基酸存在4个位置的不同;NS1基因区第589~1 002 nt(413 bp)碱基序列存在7个位点的差异,编码氨基酸有2个位置的改变;B株与NGC株和DEN-2 44株E区部分片段核苷酸同源性分别为99.1%和98.7%;与NS1区部分片段核苷酸同源性分别为98.3%和98.1%.B株E基因、NS1基因序列已登录GenBank,注册号分别为AY179733和AY238471.结论: B株E、NS1基因序列和氨基酸序列与NGC株存在差异;B株与我国海南1989年流行的DEN-2 44株和NGC株系统进化关系较近.
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TTV部分传播途径的初步研究及西安地区TTV部分片段测序分析
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汉滩病毒M,S基因部分片段在大肠杆菌中的融合表达
目的 在大肠杆菌中融合表达含主要抗原位点的汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与NP片段. 方法 将汉滩病毒76-118株M基因编码G1的片段与S基因编码区5′端约0.7 kb的片段连接,克隆入pGEX-4T2,构建嵌合基因原核表达载体pGEX-4T2-G1S0.7,并在大肠杆菌XL1-Blue中,诱导GST-G1S0.7融合蛋白的表达. 表达产物用ELISA和Western blot进行鉴定. 结果 成功地构建了嵌合原核表达载体pGEX-4T2-G1S0.7. 经IPTG诱导后,ELISA活性测定结果表明,该融合蛋白可与抗汉滩病毒NP及糖蛋白的mAb特异性结合. Western blot结果显示,诱导出相对分子质量 (Mr)大于1×105的G1S0.7与GST的融合蛋白. 结论 获得具有特异性结 合活性的融合蛋白GST-G1S0.7,为汉滩病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础.(潘伯荣)