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单纯疱疹病毒糖蛋白的特性及其临床意义
单纯疱疹病毒I型(HSV-1)有12种已命名的特异性的抗原糖蛋白,其中大部分具有诱导病毒原发感染的功能,是细胞免疫和体液免疫的主要靶标,也是预防和治疗HSV-1感染的亚单位疫苗或DNA疫苗的候选基因.本文综述了HSV囊膜糖蛋白的特性和其在复制循环中的作用以及其临床意义,为研制预防和治疗单疱病毒性角膜炎的糖蛋白联合疫苗提供了理论基础.
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汉滩病毒重组腺病毒疫苗与DNA疫苗的联合免疫效果分析
汉坦病毒基因组由L、M、S 3个负链RNA片段组成,M片段编码囊膜糖蛋白G1和G2,G1和G2在病毒的吸附、病毒膜与细胞膜的融合、中和抗体的产生等方面起着重要作用.以腺病毒为载体的活载体疫苗安全性好,能有效感染呼吸道和肠道等组织细胞,不仅能激发黏膜免疫,还能诱导系统免疫和细胞免疫反应.
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原核表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和G2的免疫学特性
目的研究大肠杆菌表达的汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和G2的免疫原性和免疫保护作用. 方法将大肠杆菌表达的G1和G2免疫小白鼠,测定免疫小鼠 血清中汉滩病毒抗体的间接免疫荧光抗体和中和抗体滴度并利用被动免疫保护试验观察G1和 G2免疫小鼠血清和脾细跑对汉滩病毒致死性感染乳鼠的保护作用. 结果表达G1和G2免疫小鼠血清中抗汉滩病毒抗体的滴度分别为1∶160,1∶320;G1, G2共同免疫不能提高免疫效果; NP, G1, G2共同免疫,血清中抗汉滩病毒抗体的滴度较NP单独免疫低;有一份G2免疫血清中检测到低效价的中和抗体,效价为1∶10; G1,G2免疫血清及免疫小鼠脾细胞对致死性感染的乳鼠都有一定保护作用,且G2较明显. 结论表达的G2能刺激小白鼠产 生中和抗体,但表达的G1不能刺激产生可测定的中和抗体,表达的G1, G2和NP共同免疫不能提高中和抗体的滴度; G1和G2免疫血清和脾细胞都能被动保护致死性感染的乳鼠,或使乳鼠免于死亡或延长其存活时间,G2的保护作用更明显,G2免疫血清的保护率可达50%,脾细胞的保护率可达10%.
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汉滩病毒M,S基因部分片段在大肠杆菌中的融合表达
目的 在大肠杆菌中融合表达含主要抗原位点的汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与NP片段. 方法 将汉滩病毒76-118株M基因编码G1的片段与S基因编码区5′端约0.7 kb的片段连接,克隆入pGEX-4T2,构建嵌合基因原核表达载体pGEX-4T2-G1S0.7,并在大肠杆菌XL1-Blue中,诱导GST-G1S0.7融合蛋白的表达. 表达产物用ELISA和Western blot进行鉴定. 结果 成功地构建了嵌合原核表达载体pGEX-4T2-G1S0.7. 经IPTG诱导后,ELISA活性测定结果表明,该融合蛋白可与抗汉滩病毒NP及糖蛋白的mAb特异性结合. Western blot结果显示,诱导出相对分子质量 (Mr)大于1×105的G1S0.7与GST的融合蛋白. 结论 获得具有特异性结 合活性的融合蛋白GST-G1S0.7,为汉滩病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础.(潘伯荣)